Авидин биотиновый комплекс АБК

Первый подход заключается в том, что вместо Р-нуклеотида в ДНК-зонд внедряется химически модифицированный нуклеотид, например, биотинированная duTP, аналог dTTP. Модифицированные нуклеотиды внедряются стандартным способом, например ник-трансляцией, но с меньщей скоростью. Гибридизованный ДНК-зонд с биотиновой меткой детектируют по его взаимодействию с биотин-связы-вающими белками, такими как авидин или стрептавидин, в комплексе с ферментами, например пероксидазой хрена, кислой и щелочной фосфатазой, дающими окращенные продукты, или же с помощью системы двойных антител, используя сначала антибио-тиновые антитела и затем флуоресцирующее вторичное тело. [c.75]

Синтез конъюгата антител с щелочной фосфатазой через авидин-биотиновый комплекс. [c.192]

Благодаря очень высокому сродству между авидином и биотином при использовании метода, основанного на образовании авидин-биотинового комплекса, достигается чрезвычайно высо кая чувствительность определения. Одним из важнейших пре- [c.421]

Можно использовать одну из трех основных разновидностей системы авидин — биотин 1) меченый авидин — биотин (МАБ-метод), 2) авидин-биотиновый мостик (АБМ-метод) и 3) ави-дин-биотиновый комплекс (АБК-метод). В рамках МАБ-метода вещество, меченное биотином, непосредственно обнаруживают по взаимодействию с авидиновым конъюгатом типа [авидин — флуоресцеин] или [авидин — пероксидаза]. Хотя использование-авидин-пероксидазного конъюгата обеспечивает достаточно высокую чувствительность определения, следует отметить и существенный недостаток этого метода — высокий уровень фона и неспецифическое окрашивание тканей некоторых типов, в частности почечных тканей. [c.415]

Вещества, меченные биотином, могут быть обнаружены с помощью любого из используемых конъюгатов или комплексов авидина с тем или иным индикаторным реагентом типа авидин — флуоресцеин, авидин — ферритин или АБК- Таким образом, после того как вещество помечено биотином, для его обнаружения можно приспособить любую систему анализа. В то же время при использовании антител, меченных флуоресцеином или пероксидазой, круг их применения ограничен, т. е. авидин-биотиновая система характеризуется гораздо большей гибкостью, чем дру- [c.419]

Поясним, что возникающие при употреблении сырых куриных яиц токсикозы вызваны образованием специфического комплекса биотина с авидином — гликопротеином белка куриных яиц, в результате чего развивается биотиновая недостаточность. [c.166]

При добавлении фиксированных количеств авидин-сефарозы (ИР) к серии растворов, содержащих фиксированные количества конъюгата [Л—Ф—Я] и возрастающие количества ДНФ-спе-цифичной антисыворотки (Ат), наблюдали повышение ферментативной активности в свободной жидкости и понижение активности в нерастворимой фракции (рис. 18-4). Это означает, что 1) антитела связываются с ДНФ-группами (Л), входящими в состав конъюгата [Л—Ф—Я], и 2) биотиновые якорные остатки (Я), входящие в состав комплекса Ат Л—Ф—Я, утрачивают способность к взаимодействию с авидин-сефарозой (ИР), вероятно, за счет маскирующего эффекта связанных антител. [c.280]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология