Тест-бактерии

Чтобы правильно оценить результаты испытаний по методу задержки бактерий, очень важно, чтобы можно было контролировать свойства культуры бактерий и управлять ими в течение этих испытаний. Это означает, что культуры бактерий следует чаще исследовать на чистоту микробиологическими и микроскопическими методами, а величину и степень агрегирования бактерий проверять фазово-контрастной микроскопией. Новые порции культуры бактерий следует периодически получать из музея культур, с тем чтобы гарантировать их генетическое постоянство. В дополнение к стандартным бактериологическим испытаниям тест-бактерий следует проводить эти испытания также и в тех условиях, в которых будет впоследствии использоваться мембрана. Для Pseudomonas diminuta, например, оценка агрегированности осуществляется фильтрованием бульона с культурой бактерий, выращенной, как описано выше, через стандартный мембранный фильтр с порами диаметром [c.98]

Определение магнитной восприимчивости биомассы исследованных тест-бактерий, взятых в различные часы суток, показало общую тенденцию повышения диамагнетизма в обнаруженных точках максимума их роста и биохимической активности, Так, величины магнитной восприимчивости полу-влажных навесок эшерихий, засеянных в 12-14 ч, составляли -0,607-10-, в 24-2 ч - -0,527-10 , для сальмонелл --0,576-10 и -0,542-10 , а для сенной палочки -0,583-10 и -0,532-10 соответственно. [c.71]

Нередко для оценки характеристик мембранных фильтров применяют методы задержки тест-бактерий. С помощью этих методов можно определять размеры пор и оценивать пригодность мембран для стерилизации жидкостей в условиях, близких к реальным. Хотя метод пузырька является общепринятым для определения размеров пор мембран, измерения по методу задержки тест-бактерий подкрепляют уверенность в том, что испытания по методу пузырька дают правильные результаты. [c.95]

Рис. 4.13. Испытание на пропускание тест-бактерий мембранного фильтр-патрона. (С разрешения фирмы Миллипор .)

Как можно ответить на вопрос о том, локализованы ли мутации в одном и том же гене, в близко расположенных генах или же в генах, отстоящих друг от друга на некотором расстоянии Ответ на этот вопрос можно получить с помощью теста на комплементацию. Если два мутантных бактериофага несут мутации в разных генах, то при заражении бактерии обоими мутантными фагами одновременно часто оказывается, что бактериофаги могут размножаться в бактерии-хозяине. Поскольку в этйм случае у каждого фага есть неповрежденный ген для Одного из двух затронутых белков, все генетические функции в этом случае выполняются. Если же у обоих мутантных фагов поврежден Один и тот же ген, то такие фаги не смогут дополнять функции друг Друга при совместном заражении. Такой эксперимент часто называют Чис-гранс-сравнением. Одновременное заражение двумя различными мутантами — это транс-тест. В качестве же контроля используют цис-тест бактерию заражают одновременно рекомбинантом, несущим обе мутации в одной и той же ДНК, и стандартным фагом. В этом случае репликация должна протекать нормально. [c.250]

Рис. 4.12. Установка для определения задерживающих характеристик мембранных фильтров. Вся установка стерилизуется. Вначале в колбе находится 140 мл питательной среды двойной крепости. Суспензию тест-бактерий (100 мл) пропускают через мембрану при открытом зажиме 1 и закрытом зажиме 2. Части фильтродержателя и мембрану промывают двумя порциями по 20 мл стерильного бульона. Затем открывают зажим 2, сбрасывают вакуум и вновь пережимают трубку, снимают мембрану, колбу закрывают стерильной резиновой пробкой и инкубируют. Отсутствие мути в колбе указывает на то, что мембрана задерживает тест-бактерии. <По методике ASTM D 3862 авторские права ASTM.)

Для испытаний по описанной выше методике Американское общество по испытанию материалов (ASTM) рекомендует минимум пять случайно выбранных мембран из пяти произвольно взятых упаковок. Поскольку даже единственный микроорганизм, прошедший сквозь мембрану, может дать начало бактериальному росту, что сразу вызовет помутнение фильтрата, метод задержки бактерий имеет чрезвычайно высокую чувствительность. Для практических лабораторных испытаний вполне достаточными оказываются 100 мл фильтруемой бактериальной суспензии, содержащей 10 фильтруемых микроорганизмов. Однако условия проводимого испытания можно ужесточить, увеличив либо объем фильтруемого бульона, либо концентрацию суспензии тест-бактерий. В гл. 7 мы более подробно рассмотрим такие более жесткие методы испытаний мембран по задержке бактерий. [c.99]

Определение В узкую стерильную пробирку наливают 0,2 мл 2 % натрия фагоцитарной цитрата, 0,1 мл исследуемой крови, взягой из пальца, и 0,5 мл активности бактериальной взвеси (500 млн м. т. в 1 мл). В качестве лейкоцитов тест-бактерий используют, например, стафилококк или эше- рихии. Смесь инкубируют при температуре 37 °С в течение [c.84]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология