Методы задержки бактерий

Методы задержки бактерий 95 [c.95]

МЕТОДЫ ЗАДЕРЖКИ БАКТЕРИИ [c.95]

Методы задержки бактерий [c.97]

Методы задержки бактерий 99 [c.99]

Хотя рассмотренная выше процедура испытаний относится главным образом к лабораторным условиям, метод задержки бактерий применим также и к крупномасштабным промышленным, и к фармацевтическим мембранным аппаратам [159, 165]. На рис. 4.13 иллюстрируется проведение испытаний фирмой-изготовителем для определения качества мембран. [c.100]

Методы задержки бактерий 101 [c.101]

В заключение настоящего раздела следует заметить, что испытания по методу задержки бактерий — это весьма чувствительный метод определения целостности мембран, но после испытания мембран этим методом они оказываются непригодными для дальнейшего применения. Поэтому фирмы-изготовители используют этот метод для контроля качества стерилизующих мембран на этапе изготовления и для выборочного контроля качества больших партий фильтрующего материала и готовых изделий (таких, как фильтр-патроны). Испытания по методу задержки бактерий проводятся фирмами-изготовителями также и для того, чтобы подтвердить пригодность к использованию каких-то отдельных элементов или всей фильтровальной установки в целом, а также с целью проверки всего процесса мембранной фильтрации. Как правило, потребители мембран проводят испытания один раз перед их использованием или при тех или иных изменениях технологии. Методы задержки бактерий можно сделать чрезвычайно чувствительными в зависимости главным образом от числа бактерий на мембране. [c.101]

Необходимо подчеркнуть одно важное обстоятельство, касающееся размеров пор мембран, которое нуждается в том, чтобы на него обратить внимание. При оценке мембран нередко принимают необоснованное допущение, что задержка частиц на мембранах происходит главным образом по ситовому механизму. Как мы уже упоминали в гл. 2 и будем говорить об этом в гл. 7 и 12, имеются основания полагать, что мембранная фильтрация осуществляется за счет адсорбции, а не ситового механизма. В литературе существует некоторое разногласие по поводу того, насколько важной для задержки частиц является адсорбция (см., например, работы [144, 177, 197]). Это представляет для нас определенный интерес в том смысле, что если адсорбция ответственна за задержку частиц, то полезность таких физических методов, как метод пузырька, оказывается несколько сомнительной. Однако с практической точки зрения ключевым моментом является не то, определяются ли размеры пор сита методом пузырька и, таким образом, минимальный размер задерживаемых частиц, а то, коррелированы ли между собой степень задержки частиц определенного размера и данные измерения точки пузырька. В работе [177] сравнением метода задержки бактерий с определением значения точки пузырька четко показано, что такая строгая корреляция существует. Большие значения давления в точке пузырька соответствуют задержке мелких частиц. Для тех, кто использует мембраны, такая связь точки пузырька с размерами частиц представляет определенный интерес. [c.116]

Заключая этот раздел, укажем, что, хотя физические методы (например, метод точки пузырька) применялись и их можно применять для определения размеров пор мембран, во многих случаях оценку размеров пор можно получить и методами задержки частиц (например, бактерий), описываемыми в разд. 4.6 и 4.10. Однако метод точки пузырька обеспечивает простой, удобный и неразрушающий способ измерения размеров пор мембран, если для данного типа мембраны установлена связь между способностью мембраны задерживать частицы и значением точки пузырька. [c.85]

Нередко для оценки характеристик мембранных фильтров применяют методы задержки тест-бактерий. С помощью этих методов можно определять размеры пор и оценивать пригодность мембран для стерилизации жидкостей в условиях, близких к реальным. Хотя метод пузырька является общепринятым для определения размеров пор мембран, измерения по методу задержки тест-бактерий подкрепляют уверенность в том, что испытания по методу пузырька дают правильные результаты. [c.95]

Благодаря высокому разрешению, наличию различных препаративных методов и большому выбору соответствующей техники микроскопирования удается выявлять детали бактериальных структур. Например, с помощью солей тяжелых металлов, окружающих бактерию и проникающих в поверхностные неровности, получают контрастирование за счет дифференциальной задержки электронов. Этот эффект, известный как негативное контрастирование, аналогичен эффекту применения нигрозина в световой микроскопии. Однако, если в клеточной стенке или мембране нет разрывов, позволяющих [c.93]

Определение чувствительности бактерий к антибиотикам методом дисков. Исследуемую бактериальную культуру засевают газоном на питательный агар в чашке Петри, после чего на его поверхность пинцетом помещают на равномерном расстоянии друг от друга бумажные диски, содержащие определенные дозы разных антибиотиков (рис. 43). Посевы инкубируют при 37°С до следующего дня. По диаметру зон задержки роста культуры стафилококка судят об ее чувствительности к соответствующим антибиотикам. При зоне задержки роста диаметром до 10 мм культура расценивается как малочувствительная, а свыше 10 мм —как высокочувствительная. В том случае, если диски пропитаны разными концентрациями одного [c.76]

Чтобы правильно оценить результаты испытаний по методу задержки бактерий, очень важно, чтобы можно было контролировать свойства культуры бактерий и управлять ими в течение этих испытаний. Это означает, что культуры бактерий следует чаще исследовать на чистоту микробиологическими и микроскопическими методами, а величину и степень агрегирования бактерий проверять фазово-контрастной микроскопией. Новые порции культуры бактерий следует периодически получать из музея культур, с тем чтобы гарантировать их генетическое постоянство. В дополнение к стандартным бактериологическим испытаниям тест-бактерий следует проводить эти испытания также и в тех условиях, в которых будет впоследствии использоваться мембрана. Для Pseudomonas diminuta, например, оценка агрегированности осуществляется фильтрованием бульона с культурой бактерий, выращенной, как описано выше, через стандартный мембранный фильтр с порами диаметром [c.98]

Для испытаний по описанной выше методике Американское общество по испытанию материалов (ASTM) рекомендует минимум пять случайно выбранных мембран из пяти произвольно взятых упаковок. Поскольку даже единственный микроорганизм, прошедший сквозь мембрану, может дать начало бактериальному росту, что сразу вызовет помутнение фильтрата, метод задержки бактерий имеет чрезвычайно высокую чувствительность. Для практических лабораторных испытаний вполне достаточными оказываются 100 мл фильтруемой бактериальной суспензии, содержащей 10 фильтруемых микроорганизмов. Однако условия проводимого испытания можно ужесточить, увеличив либо объем фильтруемого бульона, либо концентрацию суспензии тест-бактерий. В гл. 7 мы более подробно рассмотрим такие более жесткие методы испытаний мембран по задержке бактерий. [c.99]

Испытания своих мембран по методу задержки бактерий проводит большинство фирм-изготовителей, но они не сообщают при этом допустимого Зфовня качества. Эти уровни качества, по-видимому, такие же, что и принятые в Военном стандарте США (см. разд. 4.10). Описанный выше метод ASTM пригоден для оценки эффективности лишь мембран с размерами пор 0,2 [c.100]

И 0,45 мкм. Фирма Майкрофилтрейшн Системе осуществляет проверку своих мембран с порами диаметром 0,1 мкм, используя культуру бактерий My oplasma laidlawii, клетки которых проходят сквозь поры размером 0,2 мкм. Фирма Пол компани испытывает свои мембраны с порами диаметром 0,1 мкм, используя один из штаммов бактерий, обнаруженных в воде и имеющих размеры в пределах 0,08—0,13 мкм. За исключением особых случаев, таких, как промышленное производство вакцин и инъекционных растворов, остается не ясным, следует ли столь трудоемкий метод испытания, как метод задержки бактерий, широко использовать на практике, за исключением изготовителей мембран, применяющих этот метод при контроле качества продукции в процессе ее производства. Целостность мембраны можно установить также и методом пузырька, описанным в разд. 4.2 этот метод позволяет осуществить неразрушающий контроль, в то время как мембрана, испытанная по методу задержки бактерий, очевидно, непригодна для дальнейшего использования. [c.101]

Стандартным решением является метод задержки бактерий [159, 133], при котором через фильтр-патрон или дисковую мембрану пропускают жидкость с известным количеством бактерий, а затем в фильтрате определяют их наличие. Существуют противоречивые мнения по поводу того, сколько бактерий должно содержаться в исходной жидкости. Рэти [176] доказывает, что доза бактерий должна быть такой, чтобы на квадратный микрометр поверхности мембраны приходилось по два жизнеспособных микроорганизма или 2 10 клеток на квадратный сантиметр. Идея заключается в том, чтобы на каждую пору приходилось по бактерии. После фильтрации весь объем фильтрата анализируется на содержание в нем жизнеспособных бактерий. Фильтрация считается успешной, если роста бактерий в фильтрате не обнаруживается. Джонстон и Мельцер [118], напротив, доказывают, что этот метод не достигает поставленной цели. [c.180]

Чтобы на основании испытаний по методу задержки можно было сделать какие-то количественные оценки, Лихи и Сулливан [133] определяли число бактерий, проходящих сквозь мембрану, улавливая их на другой мембране с порами меньших размеров с последующим помещением этой последней мембраны прямо на чашку с агаром для счета микроорганизмов по числу колоний. Таким же образом можно определить и величину , т. е. отношение числа бактерий в посеве к числу бактерий в фильтрате. Большое значение указывает на высокую задерживающую способность мембраны. В табл. 4.2 (из работы [133]) представлены некоторые значения для мембранных фильтров с различными размерами пор. Мы видим, что перепад давления влияет на эффективность работы мембраны — при [c.99]

Этот способ является самым распространенным в хи- мической защите растений от болезней. Его назначение состоит в защите различных частей вегетирующих растений от заражения фитопатогенными грибами и бактериями путем задержки начала эпифитотии или снижения скорости инфекции - г (Ван дер Планк, 1966), передающейся главным образом по воздуху. Характерная особенность этих возбудителей состоит в том, что для завершения своего генеративного жизненного цикла (инфекционный период) — заражение, развитие, размножение и распространение — им необходимо лишь несколько суток. Ввиду того что в активной фазе эти возбудители находятся на протяжении почти всего вегетационного периода растения и проходят несколько генеративных циклов, методы борьбы с ними обусловлены именно этими обстоятельствами. [c.25]

Таким образом, ауреомицин в самых незначительных дозах задерживает развитие многих видов бактерий, наносящих ущерб качеству пищевых продуктов. Однако попытки заменить холодильное хранение продукта его обработкой антибиотиками не привели к положител1.ным результатам. Большинство исследовате.ией пришли к заключению об использовании консервирующего действия антибиотиков только в сочетании с действием холода. Т акой метод позволяет не только значительно продлить сроки хранения пролуктов, ио и уменьшить необходимую дозу антибиотика. Так-, для задержки роста некоторых микрооргатшзмов при 0° концентрация ауреомицина, по сравнению с тсмпера-турмыми условиями развития 20—30°, требуется в несколько десятков раз меньше. [c.79]

Однако эффективность удаления микроорганизмов с помощью отмеченных выше методов водоподготовки не может считаться достяточной. Данные И. А. Кибальчич (цит. по [59]) показывают, что процессы водоочистки, освобождая воду от значительного количества микрофлоры, не обеспечивают ее полной инфекционной безопасности. Так, в отстойниках с предварительной коагуляцией задерживается 31,4—42,0% кишечной палочки и около 15% общего числа бактерий. После скорой фильтрации процент задержки кишечных палочек увеличивается до 70,6, а после медленной фильтрации — до 92,4%. Из общего числа бактерий задерживается соответственно 81 до 93,9%. Еслн учесть, что большинство водоочистительных станций в связи с возрастающими потребностями в воде в народном хозяйстве и быту применяют скорые фильтры, то необходимость повышения эффективности удаления микроорганизмов при водоподготовке является очевидной. [c.88]

Иногда перед негативным контрастированием оказывается полезной химическая фиксация микроорганизмов. Ее применяют для того, чтобы избежать структурных изменений и искажений из-за действия растворов с разными pH и осмотическими свойствами, из-за действия самих красителей или из-за высушивания в красителе. Фиксацию проводят в растворах глута-ральдегида низкой концентрации, а иногда суспензию на сетке подвергают действию паров глутаральдегида в закрытом сосуде. Перед окраской фиксированные бактерии нуждаются в отмывке либо прямым способом, либо путем отмывки сеток методами, упомянутыми выше. В итоге часто наблюдается в какой-то степени позитивное окрашивание, а задержка красителя вокруг фиксированного микроорганизма такова, что для окрашивания можно применять значительно менее концентрированные растворы красителя. [c.104]

Определение чувствнтельности бактерий к антибиотикам методом серийных разведений. Данным методом определяют минимальную концентрацию антибиотика, ингибируюшую рост исследуемой культуры бактерий. Вначале готовят основной раствор, содержащий определенную концентрацию антибиотика (в мкг/мл или ЕД/мл) в специальном растворителе или буферном растворе. Из него готовят все последующие разведения в бульоне (в объеме 1 мл), после чего к каждому разведению добавляют 0,1 мл исследуемой бактериальной суспензии, содержащей 10в—10 бактериальных клеток в 1 мл. В последнюю пробирку вносят 1 мл бульона и 0,1 мл суспензии бактерий (контроль культуры). Посевы инкубируют при 37°С до следующего дня, после чего отмечают результаты опыта по помутнению питательной среды, сравнивая с контролем культуры. Последняя пробирка с прозрачной питательной средой указьшает на задержку роста исследуемой культуры бактерий содержащейся в ней минимальной ингибирующей дозой антибиотика (табл. 7). [c.77]

Результаты анализа сукцессионных изменений в дерново-подзолистой почве методом главных компонент приведены на рис. 14. Сукцессионная траектория в фазовом пространстве главных компонент имеет циклический характер, напоминающий фазовую плоскость классической модели хищник- жертва. Таким образо.м, изучение микробных сукцессий методом МСТ подтверждает циклический характер сукцессионных изменений. По всей видимости, в ходе сукцессии имеют место процессы перераспределения ресурсов между микромицетами и бактериями, которые носят колебательный характер. Как известно из теории систем и теоретической экологии, подобная динамика характерна для циклических процессов и предполагает наличие фазы задержки. Причина задержки видимо связана с тем, что значительные капиллярные силы внутри фрагментов гиф микромицетов делают самопроизвольное вытекание хщтоплазмы маловероятным. Можно рассматривать мертвые грибные гифы как [c.38]

Определение бактериоциновара. Спектр чувствительности исследуемых штаммов к эталонным бактериоцинам позволяет выяснить источники заболевания и циркуляцию, например, возбудителя дизентерии в коллективах. Чашки с плотной питательной средой расчерчивают, маркируют, подсушивают и уколом сеют на них соответствующие индикаторные культуры — продуценты бактериоцинов. Посевы инкубируют при 37 °С в течение 48 ч. Выросшие макроколонии индикаторных культур инактивируют хлороформом или УФ-лучами. Затем на поверхность агара наливают 3 — 4 мл 0,7%-го расплавленного МПА, куда после охлаждения до температуры 45 °С внесли 0,2 мл исследуемой 4-часовой бульонной культуры после застывания агара посевы вновь помещают в термостат на 18 — 24 ч. Учитывая зоны задержки роста вокруг индикаторных культур, определяют бактериоциновар изучаемых бактерий. Этот метод исследования дает хорошие результаты при использовании свежевьщеленных культур. [c.40]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология