Нанесение образца и проявление хроматограммы

Наиболее ценные результаты дает применение тонкослойной хроматографии в качестве метода оценки низких уровней примесей в медицинских веществах. Для этой цели вещество наносят на хроматографическую пластинку и после хроматографирования любые вторичные пятна, которые могут быть видны на хроматограмме после соответствующего проявления, сравнивают по размеру и интенсивности с пятнами, которые дают небольшие количества ожидаемых примесей при одновременном хроматографировании на той же пластинке. Для этой методики нужно иметь в наличии ожидаемые примеси, поэтому в некоторых статьях предписывается использование аутентичных образцов примесей. Часто бывает, что в лабораториях этих примесей нет в таких случаях можно сравнивать вторичные пятна, образующиеся от следовых количеств примесей, с пятном, полученным при хроматографировании на той же пластинке соответствующего небольшого количества испытуемого вещества. Этот прием не всегда возможно применить, так как примеси и испытуемое вещество могут по-разному реагировать на метод обнаружения, однако с его помощью можно получить приемлемый критерий, по которому можно судить об уровне примеси в веществе. Третья, иногда рекомендуемая методика состоит в нанесении такого количества испытуемого вещества, при котором после хроматографирования не появляется никаких вторичных пятен, если образец приемлемо чист. Это наименее удовлетворительный из всех трех методов, так как возможность увидеть вторичное пятно зависит от субъективных особенностей наблюдающего, а интенсивность пятен на хроматограмме может значительно варьировать в зависимости от конкретных условий хроматографирования. [c.94]

Христиансен [479] описал микрометод, основанный на определении хинидина и салициловой кислоты непосредственно при помощи ТСХ образцов сыворотки и плазмы объемом 10 мкл. Образец без экстракции наносили на слой силикагеля, белок в зоне нанесения осаждали этанолом. Количественную оценку хроматограмм проводили путем флуориметрического сканирования с возбуждением при 366 нм и эмиссией при 456 нм после проявления в системе бензол — диэтиловый эфир — ледяная уксусная кислота — метанол (120 60 18 1). [c.129]

Широкое распространение получил фотоденситометрический метод, применимый в тех случаях, когда вещества дают при обнаружении достаточно интенсивное окрашивание. Необходимым условием при этом является воспроизводимость метода обнаружения. До нанесения веществ исходную хроматографическую пластинку промеряют денситометром только после этого наносят образец, проводят проявление и обнаружение [147, 155, 202, 255]. Измерение проводят с помощью фотоденситометров различных типов, широко известных и производимых в большом количестве. Полученные значения с учетом поправки на пустой слой наносят на график против количества вещества. Иногда для проведения денситометрических измерений используют фотографию хроматограммы (негативное изображение) [31]. Для обсчета хрома- [c.156]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология