Белок, определение, метод Бредфорд

Определение белка цо методу Бредфорд [c.31]

Принцип метода тот же, что и в методе Бредфорд. Метод применим для определения суммарного количества белков и полипептидов с молекулярной массой более 3000 дальтон. [c.32]

При тщательном изучении метода Бредфорда [350] было найдено, что коэффициент экстинкции комплекса краситель — белок остается постоянным при концентрации белка 0,8—10 мкг/мл, поэтому рекомендуется выбирать объем раствора красителя (0,5—5,0 мл) таким образом, чтобы конечная концентрация белка оказывалась в указанных пределах. Это обеспечивает выполнение закона Бера (линейность зависимости) и позволяет осуществить точное определение белка при содержании 0,5—50 мкг. [c.298]

К наиболее широко применяемым методам определения концентрации белка относятся следуюш ие биуретовая реакция, метод Лоури, метод Гринберга, метод Бредфорда, измерение поглош ения в ультрафиолетовой области спектра. [c.45]

С ошибками, которые по опубликованным данным присущи трем обычно используемым методам определения белка биуре-товому методу, методу Лоури и методу Бредфорда. Для этих трех методов ошибки определений устанавливали, сравнивая опубликованные данные (Инструкция по определению белка фирмы Bio-Rad, с. 3—4) с количествами белков, определяемыми гравиметрически. В качестве стандартов для определения по Лоури и Бредфорду использовали бычий -у-глобулин, а для определения биуретовым методом — БСА. Несмотря на некоторые различия в определениях при двух длинах волн, диапазон ошибок (средний уровень отклонений) для определений по площади пиков при 205 нм укладывается в диапазон ошибок для трех стандартных колориметрических определений. Петерсон (Peterson, 1983) в своем обзоре указывает, что измерение по поглощению при 205 нм в два раза чувствительнее, чем модифицированный фенольный метод Фолина при определении белка по Лоури. [c.127]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология