Пробирки, прокалывание

Рис. 1.1. Простое приспособление для фракционирования градиентов. Приспособление собирают, как показано на схеме при этом следует убедиться в герметичности всех соединений. Пробку, закрывающую пробирку с градиентом, необходимо слегка смазать вазелиновым маслом. Дно пробирки перед прокалыванием также смазывают очень тонким слоем вазелинового масла, чтобы обеспечить постоянный размер капель. Скорость поступления воздуха в пробирку определяется скоростью вращения перистальтического насоса фракционирование градиента можно остановить, выключив насос

Фракционирование градиентов. Если очистке подвергают достаточно большое количество материала, то зону вируса в изопикническом градиенте можно идентифицировать визуально как голубовато-белый опалесцирующий слой. Чтобы зона была видна лучше, пробирку, расположенную на темном фоне, освещают лучом света (например, от небольшой лампы). Если при этом вирус удается четко идентифицировать, его можно извлечь из градиента, прокалывая пробирку сбоку. Если пробирка была закрыта термическим способом, сверху проделывают небольшое отверстие для обеспечения доступа воздуха. Пробирку прокалывают сбоку непосредственно под зоной вируса иглой для подкожных инъекций, надетой на шприц объемом 5—10 мл просвет иглы должен быть обращен вверх. Из пробирки медленно удаляют раствор до тех пор, пока не будет извлечена большая часть вируса. Если в градиенте видно несколько зон, то их извлекают по отдельности, начиная с верхней, и идентифицируют вирусную зону с помощью специфического теста (см. ниже). Однако при работе с патогенными вирусами прокалывание пробирки сбоку представляет слишком большую опасность, и зоны следует отбирать с помощью длинной загнутой иглы, которая вводится в градиент сверху (см. гл. 2, разд. 5.4). [c.102]

В препаративных опытах, когда зоны хорошо видны (например, рибосомы — по мутности), можно сверху пастеровской пипеткой с загнутым под прямым углом кончиком отсасывать пустые слои раствора сахарозы и — одну за другой — разделившиеся зоны. Другой, также достаточно грубый способ состоит в прокалывании пробирки иглой шприца сбоку, непосредственно под зоной, и отсасывании ее. [c.220]

Затем дно пробирки протирают и приклеивают к нему небольшой кусочек липкой лепты, которая будет препятствовать подтеканию раствора после прокалывания пробирки иглой. Для этой цели можно использовать обычную неперфорированную липкую лепту или лейкопластырь. Затем иглой от шприца прокалывают дно центрифужной пробирки и капли собирают в пробирку. Если основание иглы не отрезано, то оно и будет определять величину капель. В этом случае 1 мл градиентного раствора даст примерно 12—13 капель. Скорость вытекания раствора определяется диаметром канала внутри иглы. Мы нашли, что для фракционирования градиента виолие применимы обычные иглы № 22 длиной 0,5 см. Если необходимо провести более дробное фракционирование и собрать большее число капель, то для этого достаточно отрезать основание иглы и про- [c.134]

Толстостенные поликарбонатные пробирки тоже прозрачны, но для прокалывания непригодны. Как и нитроцеллюлозные, они не выдерживают автоклавирования, поэтому в случае необходимости их стерилизуют ультрафиолетовым облучением. Наиболее удобные полиалломерные пробирки полупрозрачны, причем тонкостенные можно прокалывать. Их можно автокла-вировать, но не более одного раза. Пробирки из нержавеющей стали нельзя заполнять полностью (ввиду их большой массы), если предполагается работать на максимальных оборотах ротора. [c.185]

Для работы с градиентом плотностн применяют прока-лыватель пробирок МСЕ (фирма МСЕ , Англия). Полая игла используется для прокалывания дна центрифужной пробирки. Содержимое пробирки можно удалить через иглу, не нарушая уровни градиента. Скорость истечения регулируется специальным клапаном, находящимся на верху пробирки. Иногда бывает необходимо удалить материал через верх пробирки. Для этого клапан на верху стойки заменяют специальной иглой. Содержимое пробирки вытесняется через эту иглу путем подачи снизу вытесняющего раствора (сахарозы) через иглу в нижней части пробирки. С этой целью для каждого типа пробирок — 3-, 5-, 10-, 23- и 65-миллилитровых — имеется пять специальных игл. [c.205]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология