Конъюгаты модулятор лиганд

Получение конъюгатов [модулятор — лиганд] [c.60]

Показано, что модуляторы ферментов могут служить универсальными метками для иммуноферментного анализа без разделения компонентов (т. е. для гомогенного анализа). Предъявляемым требованиям лучше всего удовлетворяют модуляторы, легко образующие прочные конъюгаты с лигандами и обладающие высоким связывающим сродством к индикаторному ферменту. Для повышения чувствительности ИФА нужно использовать конъюгаты [модулятор — лиганд], проявляющие к индикаторному ферменту максимальное сродство. [c.66]

Можно предположить, что некоторые конъюгаты [модулятор — лиганд] удастся получить в больших количествах с помощью генно-инженерных методов. Например, для крупномасштабного производства конъюгата [модулятор—лиганд] можно методом рекомбинантных ДНК ввести в геном микроорганизма синтетический ген, кодирующий полипептидный гормон и S-пептид рибонуклеазы в виде единой полипептидной цепи. [c.67]

Иммуноанализ с помощью модуляторов ферментов (ИМФ) основан на способности модулятора, связанного с лигандом (М—Л), изменять активность индикаторного фермента (Ф). Конъюгат М—Л конкурирует с определяемым веществом — свободным лигандом (Л)—за добавленные в недостатке антитела (Ат) к лиганду. Находясь в комплексе с антителами, М—Л лишен возможности модулировать активность индикатор ного фермента. При отсутствии лиганда (Л) реакция I не идет [c.14]

Иммуноанализ с помощью модуляторов ферментов (ИФАМ) представляет собой метод без разделения компонентов, связанный с ферментативным усилением сигналов. В этом методе в качестве метки для определяемого лиганда (Л) используют модулятор фермента (М). Прочный ковалентный конъюгат [модулятор—лиганд (М—Л)] способен изменять активность индикаторного фермента, т. е. действовать как мощный ингибитор или активатор. [c.57]

Следующий этап разработки ИФАМ состоит в выборе модулятора, имеющего необходимые свойства 1) способность в малых концентрациях изменять активность индикаторного фермента (примерами таких модуляторов служат ингибиторы ферментов, отличающиеся высоким связывающим сродством, т. е. низкой Ki) . 2) отсутствие подобной модулирующей активности в исследуемых образцах 3) сохранение существенной модулирующей активности после ковалентного присоединения к лигандам 4) утрата активности конъюгатом [модулятор — лиганд (М—Л)] при связывании с антителами против Л 5) в случае необратимых модуляторов реакция должна быть быстрой и специфичной по отношению к индикаторному ферменту, а ковалентный комплекс [фермент—модулятор] должен быть устойчивым в условиях анализа на протяжении всего опыта. [c.59]

Установив, какую наименьшую концентрацию индикаторного фермента можно обнаружить, находят минимальную концентрацию модулятора, при которой ферментативная активность ингибируется по крайней мере на 80% (если в качестве модулятора применяют ингибитор). Для этого смешивают разные количества модулятора с одним и тем же количеством фермента (рис. 4-2, Л). В аналогичном опыте определяют оптимальную концентрацию конъюгата [модулятор — лиганд (М—Л)]. Модулирующее действие М—Л на активность индикаторного фермента обычно выражено слабее, чем у исходного немодифици-рованного, т. е. не связанного с лигандом модулятора (рис. 4-2, Б). Далее необходимо получить ответ на другой важ- [c.59]

Нго и Ленхофф (Ngo, Lenhoff, 1980) описали иммуноанализ с применением модуляторов ферментов, основанный на изменении активности индикаторного фермента под действием конъюгата [определяемое вещество — модулятор]. Ферментативная активность зависит от распределения антител против определяемого лиганда между свободным лигандом и конъюгатом. Принцип метода был продемонстрирован на примере определения [c.54]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология