Выделение тотальных препаратов нуклеиновых кислот из

Для выделения используют небольшие объемы ночных культур. Методика включает ферментативную обработку агробактерий с последующим удалением белков из экстракта смесью фенол/хлороформ и концентрирование нуклеиновых кислот путем осаждения этанолом. Описанная ниже методика успешно использовалась для ряда штаммов агробактерий. В следующем разделе 1.12 представлены результаты расщепления суммарной ДНК, агробактерий ферментами рестрикции и примеры анализа по Саузерну последовательностей плазмид, содержащихся в различных мини-препаратах тотальной нуклеиновой кислоты агробактерий. [c.76]

Выделение тотальных препаратов нуклеиновых кислот из А. tumefa iens [c.76]

Выделение тотальных препаратов нуклеиновых кислот из А. tu mefa iens.............. [c.403]

Кроме того, микрометоды (разд. 4.2.3.1 и 4.3.3.2) выделения, тотальной ДНК из трансформированных клеток растений позволяют получить предварительные данные о ее организации. Для таких методов требуется всего лишь 20 мг лиофилизиро-ванной либо 0,5 г свежей растительной ткани, а очистка в градиенте плотности СзС1/БЭ не применяется. Выделенная ДНК имеет достаточно большую мол. массу, однако сильно загрязнена РНК и в меньшей степени полисахаридами. Концентрацию нуклеиновой кислоты в таких неочищенных препаратах невозможно определить спектрофотометрически, однако содержание ДНК может быть определено достаточно точно очень чувствительным методом с использованием дифениламина (разд. 4.6). [c.238]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология