Системы экспрессирующих дрожжевых

Клетки дрожжей как экспрессирующие системы [c.171]

Рис. 10-29. Тип клеток у дрожжей определяется дрожжевыми белками-регуляторами, кодируемыми локусом МАТ. В гаплоидных клетках типа а, в гаплоидных клетках типа айв диплоидных клетках (типа а/а) транскрибируются различные наборы генов. Гаплоидные клетки экспрессируют либо набор генов aSG (а.-специфические гены), либо набор aSG (а-специфические гены) плюс набор hSG (гаплоид-специфические гены) В диплоидных клетках ни один из этих генов не экспрессируется. Белки oii, 0.2 и аь детерминируемые локусом МАТ, связываются (поодиночке или в сочетаниях) с определенными последовательностями ДНК в элементах, расположенных перед промотором, и, таким образом, действуют как главные б елки-регуляторы. Следует отметить, что белок Ai является белком-активатором, тогда как белок а.2-это белок-репрессор Сам по себе белок ai не оказывает никакого действия (а следовательно, клетка, не содержащая локус типа спаривания, принадлежит к типу а) Однако при одновременном синтезе белков ai и а.2 они образуют комплекс, включающий иной набор генов, чем белок oq, действующий сам по себе Таким образом, простая система из трех белков служит хорошим примером принципа комбинаторного контроля генов, представленного на рис 10-

В настоящее время, после завершения программы Геном человека , тысячи неизвестных ранее белков стали доступными для изучения. Чтобы выяснить их биологическую роль, необходимо экспрессировать соответствующие гены и выделить рекомбинантные белки. Проще всего использовать для этой цели последовательности природных генов, полученных, например, с помощью ПЦР или из геномных библиотек. Однако такой подход часто не приводит к желаемому результату при экспрессии чужеродных генов в гетерологичной системе, например в Е. oli или дрожжах. Такие осложнения связаны с высоким содержанием G -nap в природных генах, использованием разных кодонов в различных системах экспрессии, сложной интрон-экзонной структурой генов. Эти проблемы могут быть решены с помощью химикоферментативного синтеза генов. [c.59]