Пептиды препаративное выделение

Примерами процессов препаративного выделения белков (особенно ферментов) и пептидов являются разделение кислой [c.166]

Защита карбоксильной функции путем солеобразования — наиболее простой и в то же время наименее изученный метод блокирования. Такая защита достигается исключительно легко и приводит к практически количественным выходам выделение солей в чистом виде не является обязательным. Свободную кислоту, необходимую для осуществления следующей стадии синтеза, можно выделить обработкой полученного пептида кислотой в подходящих условиях. К сожалению, при этом часто встречаются трудности препаративного характера, не позволяющие использовать рассматриваемый метод в качестве общего метода защиты карбоксильной группы. [c.109]

Использование гетеросетчатых карбоксильных катионитов, анал11з структур которых приведен в гл. 2, позволяет осуществлять с использованием относительно крупных зерен иопитов препаративные процессы выделения пептидов п белков при стандартных скоростях протекания растворов, т. е. именно в тех условиях, которые относятся к введенному термину — стандартной квазиравновесной хроматографии на ионитах. Ввиду того что коэффициенты диффузии белков в высоконроницаемых ионитах обычно не превышают см с, то как сорбционные, так и де-сорбционные процессы осуществляются с несколько меньшими [c.165]

Выделение пептидов путем электрофореза. Смесь пептидов растворяют в буфере пиридин уксусная кислота — вода (6 10 1200, pH 4,4), наносят полосой в 330 мм на хроматографическую бумагу ватман 3 ММ вместе с маркерами (амид Ala и таурин, 5 нмоль/мм) и подвергают электрофорезу при pH 4,4 в течение 60 мин при напряжении 6 В/мм бумагу высушивают. Для проведения аналитического опыта вырезают полосу, содержащую пептиды, пришивают ее к целому листу бумаги ватман 3 ММ и проводят ЭФ при pH 2,1 (муравьиная кислота — уксусная кислота — вода, 1 4 45) в течение 40 мин при 6 В/мм. Электрофореграмму окрашивают d-нингидриновым раствором (разд. 8.14.2). На электрофореграмме, приведенной на рис. 18.2, видно, что на диагонали, ограниченной маркерами, находятся два пептида. (В препаративном опыте после проведения ЭФ при pH 4,4 можно вырезать область на диагонали, содержащую два пептида, и привести ЭФ при pH 2,1.) Пептиды, движущиеся медленнее других и соответствующие двум диагональным пептидам, вырезают и при необходимости дополнительно очищают ЭФ при pH 2,1 или 6,5. [c.486]

Выделение любого нового рекомбинантного гена, как правило, заканчивается попытками получения его полноценной экспрессии в искусственных генетических системах, т.е. наработки в препаративном количестве полноценного в функциональном отношении рекомбинантного белка. В настоящее время имеется множество систем экспрессии рекомбинантных генов, среди которых наибольшее применение в биотехнологии находят модифицированные различным образом микроорганизмы. Поскольку такие системы не позволяют решить многих проблем, связанных с экспрессией эукариотических рекомбинантных генов, в том числе, осуществления посттрансляционных модификаций рекомбинантных белков, в ряде случаев для решения этих проблем используют культивируемые клетки животных и растений. Для изучения механизмов экспрессии генов в лабораторных условиях большую пользу приносят так называемые пермеабилизованные культивируемые клетки с полупроницаемыми мембранами, что можно сделать в определенных условиях. Кроме того, незаменимыми помощниками молекулярных биологов и генетиков остаются бесклеточные белоксинтези-рующие системы, один из вариантов которых, а именно проточные системы, находит применение и в промышленном производстве пептидов. Принципы, лежащие в основе использования таких систем, будут кратко рассмотрены ниже. [c.168]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология