Химическая модификации введением меток

Микроокружение аромвтических остатков в белках исследуется методом флуоресценции. Для этих целей используются также анв-лиз спектров КД в области 250 — 300 нм и дифференциальные УФ-спектры, получаемые при изменении pH водной среды, температуры или состава растворйтелей. По спектрам КД следят за кон-формационными превращениями белкоа и пептидов а процессе их функционирования, а также проверяют, сохранилась ли натианая конформация при изменении условий окружающей среды или при химической модификации природного соединения. Для изучения конформации белков, содержащих парамагнитные центры — такие, как гем в гемоглобине или спиновые метки (различные группы, имеющие неспаренный электрон), введенные с помощью хими- [c.112]

В зависимости от структуры и молекулярной массы антигена при введении ферментной метки его константа связывания с антителами может увеличиваться, уменьшаться или оставаться неизменной. Увеличение эффективного значения константы связывания может быть обусловлено образованием в результате химической модификации олигомеров меченого антигена, формирующих при взаимодействии с антителами сложные по составу комплексы. Уменьшение сродства молсет наблюдаться при экранировании ферментом части антигенных детерминант либо в результате кон-формационных изменений, возникающих из-за образования ковалентных связей. [c.230]

В опубликованных недавно книгах и обзорных статьях можно найти множество примеров ингибиторов, специфичных к активному центру [312, 313, 315]. Помимо химической модификации фермента и аффинного мечения за последние десять лет разработано еще несколько новых методов. Хотя эти методы и не имеют прямого отношения к бноорганнческому моделированию ферментов, о них все же следует упомянуть, так как в приложении к биологическим системам с их помощью можно получить полезную информацию, К ним относятся введение фотоаффинной метки [316] и использование флуоресцентной спектроскопической линейки [317]. Эти разработанные недавно методы включают в основном биофизические приемы, обсуждение которых выходит за рамки данной книги, но которые важны для лучшего понимания биологических процессов. Получаемая информация может быть ценным руководством к планированию и созданию новых биоорганических моделей биологически важных макромолекул. [c.450]

Не менее важна роль данных о первичной структуре при анализе результатов, полученных любыми методами, использующими химическую модификацию или введение в молекулу метки. Если известно только то, что сшивающий реагент провзаимодействовал с остатками лизина или что спектроскопическая метка присоединилась именно к лизину, то это еше мало о чем говорит. Можно ли считать образовавшийся продукт единственным Дает ли это какую-либо информацию об укладке пептидной цепи с образованием трехмерной структуры Зная последовательность и идентифицировав с помощью пептидных карт меченые пептиды, можно определить специфические места химической модификации. [c.70]

В заключение следует отметить, что все способы введения метки в нуклеиновые кислоты, кроме медленного водородного обмена, связаны с определенными химическими модификациями этих биополимеров. Учитывая строго детерминированную химическим составом матричную функцию большинства НК, такие модификации,должны, как правило, приводить к нарушениям этой функции (в отличие от белков, где даже у ферментов есть балластные участки полипептидной цепи). В связи с этим для введения метки в НК in vitro в последние годы повсеместное распространение приобрели ферментативные методы, позволяю-ш,ие включать из нуклеозидтрифосфатов и нуклеозиддифос-фатов с очень высокой УА. [c.254]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология