Значение констант связывания

Четыре субъединицы гемоглобина удерживаются вместе в результате слабого взаимодействия между комплементарными поверхностями (см. разд. 15.5 и рис. 15.13, на котором показаны только две субъединицы из четырех). Комплементарность частично нарушается при связывании одной молекулы кислорода и снова восстанавливается при связывании второй молекулы кислорода. Различием в энергии взаимодействия между комплементарными поверхностями и объясняется более низкое значение константы связывания для первой молекулы кислорода и более высокое — для второй. [c.442]

Промотор — это участок ДНК, в котором происходит в самом начале присоединение РНК-полимеразы к ДНК значения констант связывания, характеризующих присоединение РНК-полимеразы к промоторам, очень велики. Сильное влияние на скорость ассоциации и инициации могут оказывать специальные регуляторные белки. Один из них — сАМР-рецепторный белок ( AP)—имеет важное значение для Ia -оперона. Он также связывается в промоторном участке (рис. 15-3). [c.202]

Во-первых, гетерогенностью антител по физико-химическим свойствам, в том числе по сродству к антигену. Во-вторых, сложностью определения общего количества антител, а также отдельных фракций. В-третьих, в случае поливалентных антигенов возможностью образования комплексов сложного состава, в том числе циклической структуры, в которых проявляется кооператив-ность Взаимодействия активных центров антител. Все это не позволяет применить традиционные методы для расчета истинных значений констант связывания. Более надежные данные могут быть получены для моноклональных антител и их РаЬ-фрагментов, так как в этом случае могут быть выделены индивидуальные антитела в гомогенном виде. [c.41]

Увеличение Кр, и Кр по сравнению с Кр,, согласно схеме (4), может быть обусловлено двумя причинами во-первых, повышением стерического фактора реакции роста за счет одновременной координации мономера и радикала молекулой КО и, во-вторых, снижением энергии активации за счет поляризации переходного состояния вследствие делокализации неспаренного электрона в циклическом активированном комплексе А. Для выяснения этого вопроса необходимо измерение истинной энергии активации роста в присутствии КО. Подобные измерения осложнены, поскольку в настоящее время неизвестны точные значения констант связывания мономера и радикала КО, а также их температурная зависимость. [c.67]

Сравнение значений констант связывания, определенных различными методами [c.231]

Значение констант связывания [c.342]

Обычный диапазон изменения аффинности антител составляет 10 —10" М , что соответствует изменению свободной энергии связывания в области —24- —52 кДж/моль. Максимальные значения констант связывания характерны для антигенов, обладающих ярко выраженными гидрофобными свойствами или же взаимодействующих с активным центром антитела достаточно большой областью молекулы. Наименьшей эффективностью взаимодейст- [c.36]

Истинные значения констант связывания важны для определения термодинамических характеристик процесса взаимодействия антиген--антитело. Для практических целей, в частности для разработки методов иммуноферментного анализа, достаточно знать эффективные значения, характеризующие свойства используемых антител. [c.41]

Константа связывания антигена с иммобилизованными антителами. Степень сродства антител к антигену, количественно выраженная константой связывания, является основным параметром, определяющим чувствительность иммунохимического анализа. Процедура иммобилизации в ряде случаев может приводить к снижению константы связывания, что является одной из отрицательных сторон твердофазного анализа. Так, при сравнительном изучении антител к инсулину показано, что константа связывания антигена с иммобилизованными антителами в 20 раз ниже, чем в растворе. Экспериментально значения констант связывания получают из опытов по титрованию активных центров антител (рис. 28). [c.219]

Антитела, вырабатываемые организмом против антигенных детерминант, представляют неоднородную популяцию. Поэтому в случае поликлональных антител определяемое значение константы связывания является эффективной величиной, характеризующей образование иммунного комплекса с антителами, активные центры которых обладают различным сродством к антигену (см. гл. [c.219]

В зависимости от структуры и молекулярной массы антигена при введении ферментной метки его константа связывания с антителами может увеличиваться, уменьшаться или оставаться неизменной. Увеличение эффективного значения константы связывания может быть обусловлено образованием в результате химической модификации олигомеров меченого антигена, формирующих при взаимодействии с антителами сложные по составу комплексы. Уменьшение сродства молсет наблюдаться при экранировании ферментом части антигенных детерминант либо в результате кон-формационных изменений, возникающих из-за образования ковалентных связей. [c.230]

Рнс. 33. Теоретические калибровочные графики прн разных значениях константы связывания реакции антиген — антитело [c.232]

Вычисления, проведенные выше, а также данные табл. 4.7 основаны на двух допущениях, которые могут не подтвердиться. Первое касается возможной гетерогенности распределения присоединенных лигандов в ограниченных участках адсорбента величина т< может быть намного выше, поэтому даже при низких значениях констант связывания (например, 10 М) с адсорбентом может связаться гораздо больше белка, чем можно было бы предположить. В одном из недавних исследований для анализа распределения лигандов использовали модельные спин-меченые лиганды [86]. Оказалось, что негомогенность в их распределении незначительна. Однако было обнаружено (путем подсчета на основе степени модификации), что при близком расположении лигандов друг от друга белок среднего размера может связываться с ними одновременно в нескольких участках (если белок имеет более одного центра связывания). [c.155]

Как уже говорилось выше, гипотетическая дикарбоновая кислота с бесконечно удаленными друг от друга карбоксильными группами, для которой 1д/С = 4,8, характеризуется двумя константами связывания различия между ними (см. первую строчку табл. 4-1) обусловлены статистическим фактором (1д 4 = 0,6). Наблюдаемые значения констант связывания прогонов дианионами кислот, содержащих 7, 4, 2 и 1 СНг-группу, приведены в табл. 4-1. Для кислоты с самой длинной [c.258]

Критическое значение для безошибочного синтеза белка имеет также правильное кодон-антикодоновое взаимодействие. Для различных кодон-антикодоновых взаимодействий значения констант связывания могут различаться, поскольку пары образуются между различными основаниями. Поэтому частота неправильного спаривания индивидуальна для каждой кодон-антикодоновой пары. Например, замена аргинина на цистеин в бактериальном белке флагеллине происходит с частотой приблизительно 1 на 10 триплетов, кодирующих аргинин. (Все неправильные включения в рассматриваемом примере происходят, по всей видимости, из-за ошибок при распознавании кодона, так как неверное ацилирование тРНК в данном случае маловероятно.) [c.114]

Железопорфирины должны присоединяться к белку с высокой константой равновесия образования комплекса, но таким образом, чтобы по крайней мере одно место в координационной сфере железа оставалось вакантным для реакции с субстратом (перекисью водорода). Это, в сущности, проблема такого же типа, как и в случае гемоглобйнов и миоглобинов, и решается она тем же способом. Апофермент цитохром с-пероксидазы связывается с некоторыми не содержащими металла порфиринами почти так же прочно, как и с железопорфиринами. Отсюда следует, что энергия взаимодействия порфирина с боковыми цепями аминокислот белка больше, чем металла с гистидином, выступающим в качестве аксиального лиганда. Белок, таким образом, обеспечивает гораздо более высокое значение константы связывания, чем этот лиганд сам по себе. Это означает, кроме того, что белок может регулировать природу аксиальных лигандов путем соответствующего расположения потенциальных лигандов относительно порфиринового кольца. В частности, он предоставляет для комплексообразования только один гистидиновый лиганд в положении, подходящем для координации с железом. Подобный вьшод относится, по всей вероятности, ко всем каталазам и пероксидазам. Как отмечено в разд. 8.5, точная природа аксиального лиганда, предоставляемого для образования комплекса с железом, не является критической. Это может быть гистидин или карбоксилсодержащий лиганд. Каталазную активность проявляет и хлоропероксидаза с гистидиновым лигандом, и настоящие каталазы в их тетрамерной форме, у которых аксиальный лиганд содержит карбоксильную группу. В то же время диссоциированная на мономеры каталаза, у которой природа аксиального лиганда, вероятно, остается неизменной, проявляет пероксидазную активность, так же как и истинные пероксидазы, с гистидином в качестве аксиального лиганда. [c.223]

Различают два типа кофакторов — коферменты и простетические группы. Обычао кофактор относят к тому или к другому типу в зависимости от того, насколько легко разрывается его связь с ферментом. Но, по мнению Диксона и Уэбба [9], классификация по этому признаку не слишком удобна. Хотя некоторые простетические группы соединены с ферм-ентом ковалентными связями, встречаются и такие, которые связаны с белком более слабыми связями и наоборот, при обратимом связывании некоторых коферментов некоторыми ферментами положение равновесия сильно сдвинуто в сторону ассоциации. На самом деле имеется широкий спектр значений констант связывания , и только при крайних значениях они могут служить строгой основой классификации. [c.31]

ПИИ замещения бензимидазола (точнее, ацилирования п--нйтрс фенилгептаноатом [ 7] и арилирования 2,4-динитрофторбензолом [8,16]). Значения констант связывания этих реагентов с мицеллами приведен в табл. 13.1. [c.231]

Рис. 13.6. Зависимость экспериментальной константы скорости второго порядка реакции ацилирования бензимидазола 2,4-динитрофенилацетатом в октане от концентрации (М) мицчллообразуюшего ПАВ (АОТ) при 26°С.[Н20]/ [ПАВ] о—0,5 5—10(0,1 М боратнофосфатный буфер, pH 8,0-9,0). Кривые проведены теоретически согласно уравнению (7) с использованием значений констант связывания реагентов, приведенных в табл. 13.2, отношения = - 134 мин-1 (кривая о) и = 68 мин-1 (кривая б).

Концентрация фракции антител с высоким эффективным значением константы связывания, как правило, значительно ниже, чем с низким. Для разработки суперчувствительных систем детекции бывает необходимо выделять наиболее высокоаффинную фракцию и использовать в анализе только ее. Это может достигаться путем адсорбции антител на иммобилизованном антигене и последующей их элюцией линейным или ступенчатым градиентом pH, что [c.220]

При данных условиях с колонки элюируется несколько фракций антител (рис. 29) с разными значениями констант связывания инсулина (численные значения констант определены гомогенным методом биолюминесцентного иммуно-кофакторного анализа с использованием инсулина, меченного АТР). Значениям pH элюции 3,8 3.3 2,5 2,2 2 соответствовали фракции с константами связывания 10- 3-10- 8-10- 3-10- > М, [c.221]

Применение высокоактивных фрементов или подбор условий, приводящих к увеличению эффективного значения Акат, позволяет уменьшать начальную концентрацию меченого антигена при сохранении абсолютного значения регистрируемого прибором параметра. Это делает анализ более экономичным, а при высоких значениях констант связывания, как отмечалось выше, приводит к увеличению чувствительности определения. [c.234]

Выберите биорецептор с численным значением константы связывания порядка 10/[А ]. [c.515]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология