Способы введения радиоактивной метки

При использовании собственных радиоизотопов элемента равномерность распределения метки в первом случае гарантируется, во втором контролируется путем сравнения удельной активности порций металла, взятых из различных участков плавленого образца. Из других способов введения готовой метки в образец можно упомянуть метод поверхностной имплантации радиоактивных ионов, использовавшейся, в частности, при определении толщины оксидной пленки. [c.206]

VI. СПОСОБЫ ВВЕДЕНИЯ РАДИОАКТИВНОЙ МЕТКИ [c.77]

Существует несколько способов получения меченых органических соединений. Прежде всего, радиоактивный изотоп может быть введен в молекулу исследуемого соединения в процессе прямого химического синтеза этого соединения из исходных продуктов, один из которых содержит радиоактивный изотоп. Прямой химический синтез является основным методом, с помощью которого можно обеспечить введение радиоактивной метки в строго определенное положение в молекуле. Для получения меченых соединений используют также специфические радиохимические методы (изотопный обмен, метод атомов отдачи) и биосинтез. С помощью изотопного обмена в ряде случаев удается получать соединения, меченные радиоактивным изотопом в определенном положении использование других методов синтеза приводит, как правило, к получению соединений, в молекулах которых радиоактивную метку может нести любой из атомов данного элемента. [c.296]

Определение строения. олигонуклеотидов. Во всех совр>еменных способах определения первичной структуры нуклеиновых кислот первостепенную роль играют методы введения радиоактивных меток а 5 - и З -концевые звенья. Чаще всего роль концевой метки играет фосфатная группа, содержащая но иногда в качестве метки используют также тритий ( Н) или нод ( 1). [c.316]

Интенсивность метаболизма, или метаболическая активность, вещества складывается из двух процессов — из синтеза, или новообразования, и распада молекул данного вещества. Наиболее точным способом оценки новообразования вещества является определение скорости, или активности, включения радиоактивной метки. Распад вещества можно оценить по скорости выведения, или потери метки, этим веществом. В совокупности включение и выведение радиоактивной метки дают представление о скорости обновления молекул и метаболической активности исследуемого вещества. Сочетая введение в НК различных меток (например, Рзг и азотистые основания, меченные тритием), можно составить представление о скорости обновления всей молекулы НК и ее отдельных структурных элементов. [c.123]

Детали использования этих и других подходов в наборе радиоиммунных методов будут описаны ниже. Прежде чем обратиться к наиболее тонким — конкурентным методам изотопного разбавления, рассмотрим подробно упомянутые выше новые способы преципитации и сорбции индивидуальных иммунных комплексов. Для простоты и, вместе с тем, полноты освещения этого вопроса начнем с некоторых примеров выделения нерадиоактивных комплексов,- Это послужит введением к использованию тех же приемов в сочетании с радиоактивной меткой. [c.270]

Наконец, возможен случай, когда металл либо вовсе не имеет долгоживущих собственных радиоизотопов, либо применение их затруднено из-за малой доступности, сложности введения в образец и т.д. В этом случае проверку равномерности выхода чужеродной метки в раствор вместе с основным металлом осуществляют путем сопоставления уровня радиоактивности проб раствора, отбираемых в процессе коррозионного испытания, и содержания в них растворенного металла, измеренного каким-либо другим аналитическим способом. [c.210]

Результаты измерений могут выражаться несколькими способами. В большинстве методик определяется общее число распадов (в единицу времени) в образце, которое умножается на коэффициент, характеризующий эффективность счетчика таким путем получают общую радиоактивность, выраженную в числе распадов в минуту. Деление последней величины на массу образца дает удельную радиоактивность] в некоторых случаях, например, при изучении процессов расщепления, мольная удельная активность может быть разделена на число меченых положений в молекуле. Результаты эксперимента по введению метки выражаются далее либо как включение (общая активность в продукте реакции как часть общей введенной активности), либо как разбавление (отношение удельной активности предшественника к удельной активности продукта реакции), либо как удельное включение (величина, обратная разбавлению). Когда по условиям эксперимента реальный выход продукта превращения низок, предпочтительнее определение удельной активности. Любому из способов выражения результатов свойственен — часто в скрытом виде — ряд трудностей, связанных с количествами эндогенных предшественников и промежуточных соединений ( метаболического пула ), а также с соотношением между скоростью изучаемого процесса и скоростями общих процессов метаболизма [96—98]. Включение меченого ацетата в типичный поликетид в микроорганизмах обычно составляет 1 —10% в растениях эта величина на один — два по- [c.470]

Введение метки в насыщенные соединения изотопным обменом в растворе не эффективно, так как из-за небольших молярных радиоактивностей эти меченые препараты могут быть использованы только в качестве маркёров. Естественно, что получение таким способом меченых ненасыщенных соединений можно рассматривать как разработку нового метода селективного введения метки при сохранении в молекулах кратных углерод-углеродных связей, кратных углерод-гетероатом связей, а также ароматических фрагментов. [c.506]

Таким образом, мы приходим к заключению, что различные динамические системы могут описываться совершенно одинаковыми дифференциальными уравнениями. Скорости таких процессов можно определять сходными методами, а именно введением метки радиоактивным изотопом, краской или каким-нибудь другим способом. [c.13]

Существуют три основных методических подхода для решения этой задачи. Первый способ — избирательное окрашивание нейронов, выделяющих определенный нейромедиатор, может осуществляться с помощью преобразования естественного медиатора в его флуоресцирующее производное. В этом случае флуоресценция определенных групп клеток поможет выявить специфические связи в структурах мозга. Второй экспериментальный подход связан с введением молекул медиатора, предварительно меченного радиоактивным изотопом. Нейронные окончания, содержащие исследуемый медиатор, способны избирательно захватывать метку. Затем их легко выявить методом авторадиографии. Третий способ обнаружения специфических связей в нервной системе состоит в использовании высоко специфичной способности узнавать либо антигенные детерминанты медиатора, либо определенные ферментные белки, участвующие в метаболизме нейромедиаторов, либо нейрорецептор-ные компоненты на мембране клетки. Последние считаются наиболее убедительным свидетельством в пользу существования конкретных нейрохимических взаимодействий межцу клетками и зонами мозга. Обычно для иммунохимической идентификации используют флуоресцентный краситель или изотоп, который маркирует антитела. В последние годы широко распространились методы, использующие антитела, меченные частицами тяжелых металлов, например коллоидного золота, железа и др. [c.224]

МОЖНО обнаружить методом электрофореза в полиакриламидном геле с ДСН. Среди многочисленных способов введения радиоактивной метки [55, 418, 997, 1091] наиболее широко используется иодирование с помощью ла ктопероксидазы [265, 588, [c.320]

Возможны два способа прямого определения скорости коррозионного процесса с помощью радиометрического метода. Первый из них предусматривает предварительное введение радиоактивной метки в исследуемый образец. Далее образец помещают в соответствующую среду (обычно в раствор электролита) и подвергают коррозионноэлектрохимическому испытанию, в процессе которого измеряют уровень радиоактивности среды. По скорости накопления радиоактивности в коррозионной среде судят о парциальной скорости растворения меченого компонента образца. Если продукты реакции нерастворимы или летучи, то радиометрический анализ проводят соответственно после их удаления с поверхности радиоактивного образца или поглощения из газовой фазы. [c.202]

При введении радиоактивного изотопа в виде простого химического соединения в живой организм образуются более сложные продукты, содержащие радиоактивный атом. Биосинтетический способ получения меченых соединений применяют в тех случаях, когда химический синтез этих веществ слишком сложен. Этот способ был использован для метки многих природных соединений, например белков, полисахаридов, нуклеиновых кислот, пуринов, пиримидинов, витаминов, гормонов, стероидов, алкалоидов, терпенов, карбоновых кислот, аминокислот, жиров и жирных кислот из радиоизотопов чаще всего применяют и Р -. Биосинтезы приводят обычно к неспецифически меченным соединениям с низким выходом требуемого продукта. Однако, если большая часть образующихся меченых соединений может быть использована для различных целей, то их биосинтез экономически выгоден. [c.683]

Сравнительно новым методом маркировки редуцирующих концов углеводных цепей является восстановление альдегидных групп бортри-тидом натрия (ЫаВШ4). Введенная таким способом радиоактивная метка дает возможность по радиоавтографам хроматограмм определять положение фрагментов, отщепленных от редуцирующих концов. [c.177]

Они интересны с точки зрения способа участия введенного углеродного атома в стадии расширения цикла. Эти соединения хорошо изучены, в том числе определены положения атомов кислорода, введенных на стадии действия оксигеназы [42]. Полученные данные свидетельствуют о том, что превращение вероятнее всего осуществляется путем перегруппировки эпоксидированного в боковой цепи о-хинометида (схема 12). Детали механизма отдельных реакций, однако, не выяснены неизвестно, например, происходит ли окисление до ангидрида после расширения цикла или до него, как это показано на схеме. Не ясно также, когда разделяются пути, ведущие к соединениям (54) и (55). Интересно отметить, что локализация радиоактивной метки в этих трополонах из различных предщественников (ацетата, малоната, метионина) оказалась особенно затруднительной из-за недостаточной специфичности химических методов деградации. Напротив, применение методик с использованием позволило довольно быстро установить, что общий механизм биосинтеза трополонов (54) и (55) аналогичен механизму биосинтеза сепедонина (56) (схема 13) с той разницей, что в последнем случае исходным соединением является С-метилированный пентакетид (см. схему 12 и разд. 29.1.3.3). [c.435]

Аналогичным образом можно показать, что катализируемый имидазолом гидролиз трифторэтилацетата ингибируется трифторэтанолом, однако имидазол не оказывает ингибирующего действия на реакцию гидролиза ацетилимидазола в присутствии ацетат-ионов. Непосредственный метод проверки состоит во введении радиоактивной (или какой-либо другой) метки в молекулу исходного вещества посредством общего иона. Этот способ был также использован для изучения катализируемого пиридином гидролиза уксусного ангидрида, и полученные результаты подтвердили вывод о том, что в данном случае имеет место не общий основной, а нуклеофильный катализ. [c.113]

Можно выделить три основных направления использования метода меченых атомов. 1. Применение меченых атомов для изучения перемещения веществ в различных объектах. Меченые вещества вводят в ту или иную систему или организм и через определенные промежутки времени устанавливают наличие меченого соединения в определенных точках системы. Например, по перемещению меченых атомов в металлах можно определить коэффициенты диффузии и самодиффузии. 2. Метод меченых атомов используют для выяснения механиз1ма различных процессов и превращений, изучения химического строения веществ, подвижности атомов и групп. Введение изотопной метки устраняет химическую неразличимость атомов, благодаря чему появляется возможность однозначного выбора механизма процесса, для которого химические методы могут дать только начальное и конечное состояния. При помощи метода меченых атомов намечаются широкие перспективы в области изучения важнейших химических превращений и способы управления ими. Например, с помощью меченых атомов решены основные проблемы процесса фотосинтеза. 3. Использование метода меченых атолюв для определения количества вещества. Применение радиоактивных индикаторов дало принципиально новые методы количественного определения веществ, К ним относятся метод изотопного разбавления, активационный анализ, радиометрическое титрование и др. При высокой чувствительности и точности эти методы позволяют выполнять определения быстро и точно, осуществлять автоматическую регистрацию, что особенно важно при массовых анализах. [c.9]

Другим способом введения метки в ДНК in vitro, который находит все более широкое применение, является ник-трансляция [15, 37, 48, 50]. В этом случае сначала ДНК инкубируют с панкреатической ДНКазой I, под действием которой в ДНК образуются одноцепочечные разрывы. Затем ДНКазу инактивируют, а ДНК инкубируют с полимеразой I Е. oli и натриевыми солями четырех дезоксирибонуклеозидтрифосфатов (один из которых является радиоактивным, обычно с меткой Н). [c.135]

Первое затруднение связано с обезличенностью радиоактивного излучения. Например, если в результате некоего эксперимента мы регистрируем излучение радиоактивного изотопа углерода, то само это излучение никоим образом не информирует нас о том, находятся ли атомы радиоактивного углерода в молекулах интересующего нас белка или в каких-то посторонних для данного эксперимента примесях. Природа этих примесей зависит не только от способа очистки препарата, но и от метода введения радиоактивности в интересующие нас биополимеры. Если оно осуществляется естественным путем биосинтеза в организме животного, которому с диетой или в виде инъекции ввели низкомолекулярные радиоактивные предшественники , то не во власти экспериментатора проконтролировать все процессы метаболизма, в которых эти предшественники могут быть использованы. Если же радиоактивная метка вводится в уже очищенный биологический препарат in vitro химическим или энзиматическим путем, то, помимо возможности побочных реакций, всегда существует проблема полного отделения продукта от использованных в реакции исходных радиоактивных соединений. В связи с этим методам введения радиоактивных изотопов в молекулы биополимеров и способам очистки продуктов такого введения от радиоактивных загрязнений будет уделено значительное внимание. [c.155]

Важнейшей особенностью радиосинтеза является необходимость введения метки в определенное место молекулы. Выбор синтеза должен обеспечить введение метки в нужное положение, и тем не менее синтезированный продукт всегда необходимо проанализировать, чтобы убедиться, что метка содержится только в выбранном месте молекулы. Анализ осуществляется расщеплением части полученного продукта обычными химическими способами с последующим измерением радиоактивности в отдельных осколках молекулы. [c.171]