Альбумин агароза, хроматографи

РАЗДЕЛЕНИЕ О, Е-ТРИПТОФАНА АФФИННОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ НА КОЛОНКЕ С ИММОБИЛИЗОВАННЫМ НА АГАРОЗЕ БЫЧЬИМ СЫВОРОТОЧНЫМ АЛЬБУМИНОМ [c.367]

Количество цельной сыворотки, которое удается разделить в препаративном ИЭФ, весьма незначительно из-за избытка альбумина. Не следует наносить более 10—20 мг сывороточных белков при фокусировании в широком диапазоне pH и 80—100 мг — в узком диапазоне. Поэтому лучше предварительно очистить антитела, например, путем осаждения сульфатом аммония, препаративным электрофорезом в блоке агарозы, аффинной хроматографией или комбинацией этих методов (см. гл. 2). [c.141]

Хроматография на альбумин — агарозе проводилась на колонках (20X0,9 см), уравиовешенных фосфатным буфером (0,02 М фосфат натрия, pH 7,4, 0,15 М хлорид натрия) яри комнатной температуре. Образец интерферона (5 мл), содержащий 125000 интерфероновых единиц (14 000 ед. в 1 мл образца), наносился на колонку и колонка промывалась уравновешивающим буфером. В первом пике элюировалась большая часть белка, но небольшая часть ин-терфероновой активности. Активность элюировалась только при подаче на колонку 0,02 М раствора фосфата натрия (pH 7,4), содержащего 1 моль/л хлорида [c.377]

Считается, что сефароза устойчива в области pH 4—9 с ней не рекомендуется работать при температурах иже 0°С или выше 40 °С. Сефароза устойчива к действию концентрированных растворов солей или мочевины. Куатреказас [14] указывает,, что на частицы агарозы существенно не влияет продолжительное воздействие 6М раствора гуанидинхлорида или 7М раствора мочевины. Поэтому агарозные аффинные сорбенты можно отмывать от белков этими денатурирующими растворами. В течение 2—3 ч при комнатной температуре на агарозу не действуют 0,1М гидроксид натрия или 1М хлорная кислота. Ни 50%-ный (по объему) водный диметилформамид, ни 50%-ный (по объему) водный этиленгликоль не меняют структуру агарозы. Эти растворители полезны при аффинной хроматографии относительно плохо растворимых в воде соединений, например тироксина и стероидов. Аффинные сорбенты на основе сефарозы можно хранить при 4° С в виде водной суспензии с до бавкой антибактериального агента. Длительность хранения определяется лишь стабильностью связанного аффинного лиганда. Однако агарозные аффинные сорбенты полностью разрушаются при высушивании или замораживании. Согласно данным Аксена и Эрнбека )[3], эти сорбенты можно лиофилизовать, если добавить к ним декстран, глюкозу и сывороточный альбумин. Химическая стабильность биогеля А такая же, как у сефарозы. [c.16]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология