Градиентное элюирование чистота элюентов

Следует учитывать спектральные свойства элюента. Пептидная связь поглощает при 206—215 нм, поэтому можно количественно оценивать элюирование всех пептидов. При выборе состава подвижной фазы обязательно следует учитывать это обстоятельство. Органические кислоты довольно прозрачны при 206—215 нм, хотя при их высокой концентрации наблюдается подъем уровня базовой линии из-за поглощения света этими соединениями. Конкретный растворитель можно выбрать, пользуясь справочными таблицами, опубликованными в проспектах фирм или в учебниках. Чаще всего применяют ацетонитрил, метанол, -пропанол, этанол. Чистота растворителя влияет на смещение базовой линии, происходящее при градиентном элюировании. Выпускаются растворители, позволяющие работать при длине волны 200—215 им. [c.216]

Другой метод измерения основан на законе отражения света (закон Френеля), согласно которому интенсивность отраженного света, падающего на поверхность границы раздела жидкости и стекла, пропорциональна углу падения и разности показателей преломления двух сред. Преимуществом детекторов, работающих на этом принципе, является меньший объем ячеек (<3 мкл), в связи с чем они могут работать при небольших расходах элюента и с высокоэффективными колонками. Oднal 0 yв твитeль-ность таких детекторов в 50—100 раз ниже вствительности других типов РМД, поэтому они более пригодны для градиентного элюирования. Так как детектирование проиЬходит на границе раздела жидкости и стекла, для получения стабильной работы детектора необходимо следить за чистотой стекла. [c.273]

При градиентном элюировании особые требования предьявляются к чистоте элюентов. Например, рекомендуется очистка элюентов путем адсорбщюнной фильтрации через активную окись алюминия [c.148]

При анализе в режиме адсорбционной хроматографии необходима тщательная осущка растворителя, поскольку влага в подвижной фазе заметно изменяет фактор удерживания и степень разделения компонентов. При градиентном элюировании требования к чистоте растворителей сильно возрастают. Примеси в элюенте могут концентрироваться в начальном участке колонки и при увеличении полярности подвижной фазы элюироваться, что является причиной появления на хроматограмме ложных пиков. [c.177]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология