Щелочные условия инкубации

Прямое присоединение пептидов к носителю происходит по бимолекулярному механизму. При конденсации очень малых количеств пептида высокий выход реакции возможен только при очень высокой эффективной концентрации нуклеофильных групп носителя (обычно это аминогруппы). Поскольку последние присутствуют в большом молекулярном избытке, то кинетически возможна реакция псевдопервого порядка. Однако концентрация аминогрупп пептида мала, и поэтому не требуется их защита в ходе присоединения (за исключением особых случаев [64]). Аминогруппы следует блокировать в тех случаях, когда перед добавлением носителя пептид предварительно активируется. При одностадийных присоединениях редко нужна защита N-концевых групп. Если же она все-таки необходима, то при помощи 2-гр г-бутилоксикарбонилоксиимино-2-фенил-ацетонитрила [1] вводят 2-т/ вг-бутилоксикарбонил (БОК) группу [1]. Аналогичная защита аминогруппы нужна и перед активацией карбоксильных групп карбодиимидом при конденсации по С-концевому карбоксилу [85], когда при последующей инкубации в щелочных условиях карбоксильные функции боковых цепей аминокислот превращаются в стабильные N-ацилмочевины, а часть активированных С-концевых аминокислот— в реакционноспособные оксазолиноны. [c.444]

Щелочные условия инкубации для получения культур вибрионов [37] [c.296]

Как оказалось, НК при 37° практически полностью извлекаются из ткани уже в течение первого часа инкубации даже 0,3 н. КОН. Некоторый прирост экстинкции в последующие часы инкубации происходит за счет экстрагирования белков [ 16], [28], [30]. На этом основании Р. Волгин и Партье [30] предложили щелочную инкубацию сократить до 1 часа и вести ее в 0,3—0,5 н. щелочи. В этих условиях извлекается минимальное количество белка и других примесей, поглощающих УФ в зоне 230—300 ммк. [c.34]

После инкубации отбирают по две аликвоты объемом 5 мкл для анализа с помощью электрофореза. Одну из аликвот подвергают электрофорезу в 1,5%-ном агарозном геле, приготовленном на IX ТБЭ- или 1Х ТА-буфере. В качестве маркеров молекулярной массы используют, например, гидролизат ДНК фага Я, полученный с помощью рестриктазы HindWl и меченный по концам з Р. По завершении электрофореза гель высушивают и получают радиоавтограф. Другую аликвоту анализируют в щелочном агарозном геле (1—1,5%) в соответствии с условиями, описанными Мак-Донеллом и др. (M Donnell et al., 1977). После электрофореза гель высушивают и получают радиоавтограф. [c.64]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология