Спот-тест

Эти два штамма различаются лишь по способности к репарации с вырезанием участков ДНК. Сравнение зон торможения роста, вызываемого различными соединениями в спот-тесте (капельном тесте), позволяет оценить летальное действие, обусловленное повреждениями в ДНК. [c.48]

При интерпретации результатов нужно учитывать, что метод нанесения исследуемого вещества на поверхность агара (спот-тест), будучи полезным при обследовании большого числа изучаемых мутагенов, дает только качественные данные. Он мало приемлем для таких химических агентов, которые, как большинство водонерастворимых полициклических углеводородов, не диффундируют в агар. Даже при использовании более чув- [c.53]

Спот-тест на комплементацию мутантов фага ( или Р22) [c.78]

Результаты спот-теста являются лишь ориентиром. В большинстве случаев, чтобы подтвердить наличие комплементации, на самом деле необходимо следить за размножением фага после совместного заражения клеток в жидкой культуре. [c.79]

Мутагенный эффект испытываемых соединений определяется в так называемом спот-тесте, для чего на чашки Петри без гистидина, засеянные тест-штаммом, наносится исследуемое вещество вместе с микросомной фракцией гомогената печени мыши для активации мутагенов. Появление His -ревертантов свидетельствует о генетической активности испытываемого агента. [c.533]

Как индуцировать мутации в фаге К гидроксиламином in vitro указано в методике 8. Это весьма обычный метод мутаге-низирования как фага, так и выделенной в очищенном виде ДНК. Его преимущество заключается в высокой специфичности (индуцируются транзиции G—>-А) и большой эффективности. При работе с умеренным фагом контролировать эффективность мутагенеза очень просто — достаточно следить за появлением среди выжившего фага мутаций, приводящих к образованию прозрачных бляшек. По этой методике можно выделить амбер-мутантов фага К. С помощью спот-теста на комплементацию (методика 10) их можно охарактеризовать по их комплементации с амбер-мутациями в большинстве известных генов фага Л. Комплементационный анализ позволит определить положение полученных мутаций на карте. Мутации по ТЕМ-р-лактамазе можно использовать для картирования делеционных мутантов в этой модели клонированного фрагмента (эксперимент 6). [c.36]

Можно быстро проверить попарно мутантов фага на комплементацию, проведя спот-тест на чашках, засеянных непермис-сивной клеткой-хозяином. Удобно проводить адсорбцию одного из фагов, тестируемых на комплементацию,-на непермиссивных клетках в верхнем агаре, дать агару застыть на чашке, а затем сверху нанести капли другого фага (фагов). Достоверность спот-теста сильно возрастает, если по очереди адсорбировать на клетках каждый из исследуемых мутантов, так что для каждой пары мутантов проводят реципрокные пары тестов. Часто бывает полезно тестировать несколько разведений каждого фага. [c.78]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология