Непермиссивные клетки

Для изучения комплементации между различными мутациями у фагов часто определяют разницу в их урожае в пермиссивных и непермиссивных клетках при смешанной инфекции. Проанализируйте таблицу и распределите мутации по комплементационным группам. [c.224]

Вырастите ночную культуру непермиссивной клетки-хозяина в бульоне ЬВ. [c.78]

Вирусы ПОЛИОМЫ и 8У40 ( Обезьяний вирус 40 ) относятся к группе паповавирусов. Они содержат двухцепочечные кольцевые молекулы ДНК. В эксперименте вирус можно перенести для размножения в клетки тканевой культуры. Размножаясь в некоторых (так называемых пер-миссивных) клетках, вирус вызывает их лизис, и по мере его размножения клетки гибнут. В других (непермиссивных) клетках вирус ведет себя иначе. В этом случае размножение вируса подавляется, и примерно в одной из 10 клеток вирусная ДНК интегрируется в клеточную ДНК. Такое включение вирусной ДНК в геном клетки-хозяина может приводить к опухолевой трансформации. В трансформированной клетке образуется белок (Т-антиген), который запускает репликацию клеточной ДНК, и в результате начинается размножение клеток. Инъекция такого рода трансформированных клеток животным приводит к быстрому образованию опухолей. [c.153]

Такой порядок был установлен на основании появления фрагментов в непермиссивных клетках Е. oli, зараженных каждым из 1 О ат-мутантов по гену 23, обозначенных на фиг. 224. В верхней час-ти диаграммы показано положение этих 10 мутаций на карте фрагменты карты, заключенные между мутациями, обозначены римскими цифрами. Стрелки показывают длину полипептидных цепей белка головки, которые синтезируются в клетках, зараженных соответствующими мутантами. В случае трех мутантов — В17, С140 и Н11 — не удается обнаружить ни одного из восьми нормальных пептидных фрагментов выявляются лишь более короткие варианты фрагмента Цис. [c.455]

В животных клетках, как и у бактерий, для размножения вирусов существует помимо литического еще и другой путь. Те животные клетки, в которых ДНК-вирусы размножаются литическим путем, ведущим к гибели клетки, принято называть пермиссивными. Клетки, в которых размножение вирусов блокируется, называются непермиссивными вирусная хромосома в таких случаях либо включается в геном клетки-хозяина и в дальнейшем размножается вместе с ним, либо образует плазмиду - кольцевую молекулу ДНК, репликация которой регулируется и не ведет к гибели клетки. Иногда это вызывает в непермиссивных клетках определенное генетическое изменение, в результате которого начинается их неконтролируемый рост, т.е. нормальные клетки превращаются в раковые. Соответствующий ДНК-вирус называют в гаких случаях опухолевым ДНК-вирусом, а превращение, о котором идет речь, - вирусной неопластической трансформацией. Среди опухолевых ДНК-вирусов наиболее полно изучены два представителя паповавирусов, а именно SV40 и вирус полиомы. Выяснилось, что их трансформирующая способность зависггг от нескольких вирусных белков, кооперативное действие которых переводит покоящиеся клетки из Go-фазы в S-фаз) (см. разд. 3.3). В пермиссивных клетках этот переход в S-фазу делает доступными вирусу все репликационные ферменты клетки-хозяина, необходимые для синтеза вирусной ДНК В непермиссивной клетке синтез провирусом этих вирусных белков подавляет часть нормальных регуляторных механизмов и самой клетки, и всего ее потомства. [c.320]

Можно быстро проверить попарно мутантов фага на комплементацию, проведя спот-тест на чашках, засеянных непермис-сивной клеткой-хозяином. Удобно проводить адсорбцию одного из фагов, тестируемых на комплементацию,-на непермиссивных клетках в верхнем агаре, дать агару застыть на чашке, а затем сверху нанести капли другого фага (фагов). Достоверность спот-теста сильно возрастает, если по очереди адсорбировать на клетках каждый из исследуемых мутантов, так что для каждой пары мутантов проводят реципрокные пары тестов. Часто бывает полезно тестировать несколько разведений каждого фага. [c.78]

К третьему основному классу индукторов интерферона относятся вирусы, не способные реплицироваться, такие, например, как вирусы в непермиссивных клетках или инактивированные вирусы. Примерами первых являются вирус ньюкаслской болезни в клетках L [57(], реовирус у рыб [172] или в куриных клетках [281] и вирус синего языка овец у мышей [114]. Примерами вторых служат вирусы, убитые УФ-облучением, такие как вирус ньюкаслской болезни [280], вирус колорадской клещевой лихорадки [61], реовирус [ 37] и инактивированный нагреванием вирус гриппа, который был индуктором интерферона в первых опытах Айзекса и Линденмана [НО]. При этом дело осложня- [c.49]

Причина, по которой вирусы в непермиссивных клетках или инактивированные вирусы могут индуцировать интерферон, вероятно, заключается в том, что они содержат двухцепочечную РНК, способную из них высвобождаться. По-видимому, именно поэтому в клетках грызунов инактивированный ультрафиолетом реовирус в 200 раз более эффективен как индуктор, чем неинактивированный, поскольку первый распадается в зараженной клетке с освобождением двухцепочечной РНК [96], тогда как во втором двухцепочечная РНК всегда находится в составе вирусных частиц, а не в свободном состоянии [79]. Кинетика индукции интерферона инфекционным реовирусом сходна с его индукцией другими вирусами при 37°С синтез интерферона достигает максимума между 12 и 16 ч после заражения. В отличие от этого облученный ультрафиолетом реовирус индуцирует максимальную продукцию интерферона через 2—4 ч после заражения. Индукцию интерферона облученными ультрафиолетом или инактивированными прогреванием миксо-вирусами и парамиксовирусами объясняют следующим образом. Известно, что нормальные миксовирусы и парамиксовирусы содержат негативную РНК, но, по-видимому, некоторые вирусные частицы, количество которых не превышает 1—2%, содержат позитивную РНК, способную при высокой множественности заражения (которая используется при синтезе интерферона) гибридизоваться с негативной РНК. Образующаяся при этом в небольших количествах двухцепочечная РНК и действует как индуктор интерферона. [c.50]

В непермиссивных клетках происходит экспрессия ранней области генома 8У-40, ПОЗДНЯЯ же область не реплицируется и не транскрибируется. Небольшая часть этих клеток трансформируется в результате интеграции генома 8У-40 с клеточной ДНК. В отличие от интеграции ДНК фага Л в механизме интеграции ДНК 8У-40, но-види-мому, не участвуют специфические участки ни вирусной, ни клеточной ДНК. Для трансформации, а также, по всей вероятности, для поддержания трансформированного состояния необходимы оба вирусных антигена (Т и I). Введение таких трансформированных клеток чувствительным животным приводит к быстрому образованию опухолей. Основная цель ведущихся в настоящее время исследований вируса 8У-40 состоит в том, чтобы выяснить, как экспрессия ранней области интегрированной формы этого вируса делает клетку раковой. [c.189]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология