Центрифугирование в градиенте плотности, теория

При сопоставлении экспериментально найденных параметров композиционной неоднородности с величинами, рассчитанными на основе теории сополимеризации, обнаруживаются значительные расхождения. Так, для сополимера стирола с метилметакрилатом с теоретическим значением дисперсии композиционного распределения л 10 центрифугирование в градиенте плотности дает величину дисперсии 10 а светорассеяние — в зависимости от методики измерений — от 10"3 до 10 [142]. [c.152]

Теория седиментации применительно к клеткам подробно рассмотрена в недавно опубликованном обзоре [4]. Равновесное центрифугирование в градиенте плотности требует достаточно высокой скорости вращения и/нли достаточно продолжительного времени, чтобы клетки смогли перераспределиться вдоль градиента в соответствии с их плавучей плотностью. Этот метод имеет известные ограничения, поскольку разделение клеток производится в соответствии с их плотностью, а плавучие плотности многих типов клеток частично перекрываются [5]. Другими недостатками этого метода являются необходимость приложения больших центробежных сил и возможная токсичность материалов, используемых для создания [c.166]

Теория седиментационного равновесия в градиенте плотности усложняется тем, что 1) для создания градиента обычно применяют очень высокую концентрацию соли (5—7 М), что не позволяет рассматривать систему как двухкомпонентную, 2) положительно и отрицательно заряженные ионы соли распределяются в объеме неодинаково, так как они обладают разными молекулярными массами и коэффициентами диффузии, а это приводит к созданию градиента электрического потенциала, и 3) скорости центрифугирования настолько высоки, что уже нельзя пренебрегать влиянием давления. По этой причине данный метод обычно не используется для определения молекулярных масс, однако, так как его можно применять, если данные обрабатываются соответствующим образом, приведем краткое его описание. [c.331]

Наиболее эффективными методами являются хроматография (колоночная, бумажная, тонкослойная), электрофорез (на бумаге, Б геле) и центрифугирование (в линейном градиенте плотности, при постоянной плотности). Обшая теория и экспериментальные детали хроматографии приведены в многочисленных книгах и обзорных статьях. Однако некоторые особенности этих методов следует специально отметить в ходе настоящего изложения, так как они служат неотъемлемыми частями многих подкодов к выяснению первичной структуры. [c.48]

Описанные до сих пор методы были в основном препаративными, причем градиент плотности устанавливали заранее. Как уже упоминалось, градиент плотности может быть получен с помощью самого поля центрифуги. Это имеет место при центрифугировании смеси двух или более жидкостей, отличающихся по плотности, молекулярному весу или по обоим показателям. При растворении макромолекулярного компонента в этой смеси растворителей он будет собираться в области, где плотность близка к плотности полимера в растворе. Мезельсон, Шталь и Виноград [8] первыми применили этот принцип к системе дезоксирибонуклеиновая кислота (ДИК)— водный раствор хлористого цезия. Они получили основные соотрюшения для распределения концентрации полимера в предположении об идеалыюсти раствора и показали, что для единичного полимерного ко.мпопента имеет место гауссово распределение концентрации (ср. нижеследующие разделы). Это предсказание теории было подтверждено опытами с ДНК, полученной из бактериофага Т4, что указывало на высокую степень монодисперсности этого полимера. Для других образцов ДНК были обнаружены несимметричные полосы вследствие композиционной неоднородности препаратов (см. раздел Ж)- [c.419]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология