Высаливание при высокой концентрации соли

Одним из широко применяемых методов фракционирования белков является высаливание нейтральными солями. Впервые этим способом были отделены глобулины от альбуминов. Глобулины осаждаются при 50%-ном насыщении сернокислым аммонием, а альбумины — при более высокой концентрации. Сульфат натрия, обладая меньшей растворимостью, чем сернокислый аммоний, осаждает только глобулины. [c.59]

Неорганические электролиты (ионы солей) по своему эффекту могут быть разделены на три группы а) стабилизирующие нативную структуру б) снижающие устойчивость глобул и в) смешанного действия — усиливающие денатурацию в малых и средних концентрациях и ослабляющие ее при более высоких. Как мы установили, стабилизация является результатом эффекта, подобного высаливанию, при концентрациях солей, не приводящих, однако, к осаждению белка. Высаливающие соли стабилизируют белки с различной интенсивностью, соответствующей положению соли в лиотропном ряду Гофмейстера сульфат — фосфат — цитрат — тартрат — ацетат — хлорид — роданид. Это ряд высаливания. По силе стабилизирующего действия анионы располагаются в аналогичный ряд. Ионы солей, введенные в раствор, усиливают гидрофобные связи в молекуле белка и этим упрочняют его структуру. [c.166]

Диполи воды соединены с гидрофильными группами белков водородными связями. Учитывая явления гидратации, можно объяснить рассмотренный нами процесс высаливания белков из растворов. При прибавлении к раствору белка высоких концентраций солей или таких органических растворителей, как спирт или ацетон, возникает конкуренция за молекулы воды между солью или спиртом, с одной стороны, и молекулами белка — с другой. При определенных концентрациях ионы солей, молекулы спирта или ацетона связывают такое большое количество молекул воды, что несвязанной воды недостаточно для растворения белка, и он выпадает в осадок. [c.215]

В этом разделе описан один из наиболее широко применяемых способов очистки ферментов —высаливание белков при высокой концентрации солей. Этот способ отличается по своему результату от всаливания , описанного в разд. 3.2. Хотя белки типа глобулинов (т. е. белки, растворимость которых низка при низкой ионной силе вблизи их изоэлектрической точки) обычно характеризуются также относительно низкой растворимостью и при высокой концентрации соли, из этого правила есть много исключений. Так, сывороточные у глобулины, типичные белки, нерастворимые при низкой солевой концентрации, осаждаются сульфатом аммония (при относительно низкой его концентрации— около 1,5 М). С другой стороны, некоторые другие сывороточные глобулины (а и р) обладают более высокой растворимостью в сульфате аммония и осаждаются им при концентрации около 2,5—3,0 М. Процесс высаливания в основном зависит от гидрофобности белка, тогда как всаливание в большей степени определяется распределением зарядов на поверхности белковой глобулы и полярными взаимодействиями ее с растворителем. [c.61]

Приготовление пробы. Обычно препаративный электрофорез в полиакриламидном геле не используют в качестве одного из начальных этапов в очистке белков и нуклеиновых кислот. Для предварительного грубого фракционирования компонентов омесей применяют методы хроматографии, высаливания или осаждения. Чтобы провести электрофоретическое разделение, пробу необходимо сконцентрировать до 5 мл для однородной системы и до 10—20 мл для неоднородной. От избытка солей можно избавиться при помощи диализа или гель-фильтрации. Концентрация солей в исследуемом растворе должна быть такой же, как в буфере концентрирующего геля. Если же этот гель не попользуется, то пробу диализуют против буфера разделяющего геля, разведенного в 5 раз. Медленное вхождение пробы в гель во время электрофореза свидетельствует о слишком высокой концентрации солей. Любой осадок, присутствующий в пробе, следует удалять центрифугированием или фильтрованием через миллипоровый фильтр, так как он может закупорить разделяющий гель. [c.117]

Нейтральные соли выделяют высокомолекулярные соединения из растворов только при очень высокой концентрации соли, часто близкой к концентрации насыщения. Это явление настолько не похоже на коагуляцию, что обычно рассматривается как высаливание. [c.158]

Высаливание. Высокие концентрации сульфата аммония, а также солей щелочных металлов осаждают белки. Механизм осаждения связан со способностью солей разрушать гидратную оболочку растворенных белковых макромолекул, что приводит к их агрегации и последующему осаждению. Далее используют ряд методов концентрирования и тонкой очистки белков, причем наиболее эффективными являются различные хроматографические процедуры. К преимуществам хроматографических методов следует отнести [c.54]

Нарушение устойчивости растворов полимеров при понижении температуры, добавлении нерастворяющей жидкости или,высоких концентраций солей приводит к различным случаям расслоения на две фазы, выпадения полимеров, высаливания белков и др. Зависимость растворимости полимеров от молекулярного веса создает возможность их фракционирования путем дробного осаждения или растворения. Переход от полного смешения к ограниченной растворимости определяет также различные случаи коацервации. [c.175]

Температура оказывает необычное действие на растворимость белков при высокой концентрации соли из-за того, что, как было сказано выше, она влияет на гидрофобные взаимодействия. В области высаливания растворимость белков обычно снижается с повышением температуры. Мутный белковый раствор, приготовленный для кристаллизации при комнатной температуре (разд. 9.3), часто становится абсолютно прозрачным при температуре 4 С. [c.65]

Высокие концентрации солей выделяют белки из водных растворов. Этот процесс называется высаливанием. Высаливание существенно отличается от коагуляции не только тем, что оно протекает в значительно более концентрированных растворах, но и характером зависимости рт природы ионов. Правило Шульца-Гарди здесь неприменимо. По своему влиянию на высаливание анионы располагаются В лиотропный ряд (ряд Гоф- [c.188]

ВЫСАЛИВАНИЕ ПРИ ВЫСОКОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ СОЛИ [c.61]

При высоких концентрациях добавление соли оказывает другое действие, например понижает активность воды ири образовании гидратированных ионов. В этом случае, напоминающем эффект высаливания, большая часть полимеров может подвергаться осаждению. Подобное действие, приводящее к осаждению или разделению фаз, заставляет перемещаться молекулы иолимера по направлению к границе раздела кремнезем—вода задолго до того, как начинает происходить какое-либо разделение в системе, в которой отсутствует соль. [c.983]

Небольшие количества органического растворителя (например, до 10% по объему) практически не оказывают влияния на результаты фракционирования другими методами. Исключение составляют методы гидрофобной хроматографии (разд. 4.8) и аффинной адсорбции, зависящие от гидрофобных взаимодействий (разд. 4.5), а также часто фракционирование с помощью высаливания. Если фермент относительно стабилен к действию растворителя, фракционирование сульфатом аммония можно проводить в присутствии растворителя. Однако концентрация соли, необходимая для осаждения белка, будет при этом, вероятно, несколько выше, что обусловлено присутствием молекул органического растворителя, препятствующих гидрофобной агрегации белка при высокой концентрации соли. Излишки рас- [c.79]

При высаливании белка нейтральными солями щелочных или щелочноземельных металлов, а также сернокислым аммонием необходимо применять высокие концентрации этих солей. Р а з л и ч н ы е б е л к и высаливаются при неодинаковых концентрациях соле й. Эгим обстоятельством пользуются для разделения белков на различные фракции. Так, для высаливания так называемых глобул и н о в (например, из сыворотки крови) достаточно прибавлять сернокислый аммоний до иолунасыщеиия. Отделив глобулины фильтрованием, можно оставшуюся в фильтрате так называемую альбуминовую фрак ц и ю осадить добавлением сернокислого аммония до полного насыщения. Методом фракционирования белков путем высаливания широко пользуются для получения различных белковых препаратов. [c.17]

Хотя при низких концентрациях соли с короткими иммобилизованными алифатическими цепями связывается относительно мало белков, гидрофобную хроматографию можно распространить практически на все белки, поскольку гидрофобные взаимодействия усиливаются с повышением концентрации соли. В частности, соли, проявляющие наибольшую эффективность при высаливании (см. разд. 3.3), такие, как сульфат аммония, характеризуются наибольшим усилением гидрофобных взаимодействий. Это объясняется тем, что в основе обоих эффектов лежат одинаковые механизмы при высаливании основной причиной агрегации служит усиление гидрофобных взаимодействий между белками. Следовательно, при высоких концентрациях соли большинство белков можно адсорбировать на гидрофобных группах, связанных с инертной матрицей (однако сама матрица может и не быть инертной см. ниже). [c.183]

Хорошей растворимости многих неорганических солей ш достаточно высокой электропроводности их растворов удается достичь в основном при использовании растворителей с высокой диэлектрической проницаемостью. Наиболее широко применяемым растворителем является вода. В ней легко растворяются многие электролиты. Обычно в случае сильных электролитов (минеральных кисл-от и ИХ солей) максимальная удельная электропроводность наблюдается для 4—6 Н. растворов электролита. Однако в практике электрохимического синтеза часто применяют менее концентрированные растворы (но обычно не ниже 0,1 н.), так как в водных растворах содержащих неорганические фоновые электролиты в высоких концентрациях, происходит высаливание многих органических веществ. [c.40]

Влияние ионной силы на поведение белков обусловлено взаимодействием солей, воды и белков. Как правило, соли при относительно малой концентрации оказывают на белки действие, способствующее их растворению вследствие уменьшения электростатических взаимодействий между белками. Наоборот, при более высокой концентрации это явление имеет инверсный характер (высаливание), т. е. белки могут осаждаться при уменьшении количества воды, имеющейся для солюбилизации (перевода в растворимое состояние). [c.416]

В жидких удобрениях водных — растворах солей — в случае большой нх концентрации происходит высаливание, кристаллизация солей при понижении температуры 2. Применение же менее концентрированных растворов приводит к необходимости перевозить большие количества растворителя — воды. Поэтому стремятся найти такие композиции жидких удобрений, которые имели бы высокие концентрации и низкие температуры кристаллизации (замерзания). Для хранения жидких удобрений требуется сооружение резервуаров большой емкости, так как они используются лишь в течение относительно короткого времени. [c.627]

С ульфокислота получается сульфированием антрахинона олеумом (с добавкой поваренной соли) с использованием 50% исходного материала отделяется высаливанием в виде натриевой соли (так называемая серебристая соль ) от смеси дисульфокислот (2,6- и 2,7-) Может быть выделена и в виде свободной кислоты при достаточно высокой концентрации кислого раствора, полученного после отделения обратного антрахинона [c.117]

В отличие от лиофобных золей, растворы высокомолекулярных веществ являются термодинамически устойчивыми обратимыми истинными растворами. Они подчиняются правилу фаз и их устойчивость определяется соотношением энергетического (ДЯ) и энтропийного (ТД5) членов в уравнении (VIII. 1). Для растворов полярных полимеров, обычно обладающих жесткими цепями, основное значение имеют изменения ДЯ, в значительной мере зависящие от сольватации. Тепловые эффекты, изменения упругости пара, сжимаемости и других свойств растворов при сольватации указывают, что наиболее прочно связанная часть растворителя составляет около одного слоя молекул вокруг полярных групп полимера (табл. 15). Для растворов неполярных полимеров с гибкими цепями основное значение имеют изменения энтропии смешения, во много раз превышающие идеальные значения, и непосредственно связанные с гибкостью макромолекул в растворах. Различные соотношения ДЯ и Д5, приводящие к возможности самопроизвольного растворения полимеров (Д2<0) приведены в табл. 16. Нарушение устойчивости растворов полимеров при понижении температуры, добавлении нерастворяющей жидкости или высоких концентраций солей приводит к различным случаям расслоения на две фазы, выпадения полимеров, высаливания белков и др. Зависимость растворимости полимеров от молекулярного [c.196]

При малых концентрациях аммиака ошибку, вызываемую высаливанием аммиака, можно весьма приблизительно исключить применением среды с высокой и постоянной концентрацией нейтральной соли. Это труднее сделать в случае высоких концентраций аммиака, когда даже незначительная ошибка в определении концентрации свободного аммиака сильно сказывается на величине п. Однако при работе с растворами 2 н. по отношению к нитрату аммония можно значительно уменьшить ошибку, вызванную высаливанием. Поправка на высаливание была введена следующим образом пусть [МНз]—величина, которую вместо концентрации аммиака вычисляют по формуле [c.142]

При высаливании белка нейтральными солями щелочных или щелочноземельных металлов, а также сернокислым аммонием необходимо применять высокие концентрации этих солей. Различные белки высали в а ю т ся при неодинаковых концентрациях солей. Этим обстоятельством пользуются для разделения белков на различные фракции. Так, для высаливания так называемых глобулинов [c.17]

Понижение устойчивости растворов ВМС также связано с изменением величин АЯ и А5, согласно ур. (2). Факторами, уменьшающими устойчивость раствотов, является изменение состава среды и температуры. При добавлении к раствору жидкости, в которой полимер не растворяется, происходит выпадение осадка вследствие изменения АЯ—изменения условий взаимодействия между фазами аналогично действует понижение температуры, которое приводит иногда к расслоению на две фазы. Однако потеря устойчивости растворов ВМС в отличие от подобных явлений в лиофобных золях протекает в форме явлений высаливания и застудневания (образование гелей). Высаливание представляет собой процесс выделения белков под влиянием высоких концентраций солей (насыщенных или полуна-сыщенных растворов). Явление высаливания близко к явлению понижения растворимости в растворах низкомоле- [c.291]

Мы уже видели, что йз мышечной ткани некоторые белки можно извлечь лишь солевыми растворами (Ш. работу 1). Однако чаще с помощью солей о с а ж д а ю т белки из раствора — высаливание. Поскольку разныё белки осаждаются при разной концентрации соли, sTof метод используется для фракцибнирования белков. Для высаливания чаще всего используют сульфат аммония, отличающийся очень высокой растворимостью в воде (75,4 г в 100 мл). Иногда оказывается более удобным Использовать сульфат натрия, хлорид натрия и другие соли. [c.24]

Высаливание является обратимым процессом и проводится солями щелочных металлов высокой концентрации. [c.135]

Наряду с преимуществами, в производстве и применении жидких удобрений имеются известные трудности и недостатки. В жидких удобрениях — водных растворах солей — в случае большой их концентрации происходит высаливание, кристаллизация солей при понижении температуры. Применение же менее концентрированных растворов приводит к необходимости перевозить большие количества растворителя — воды. Поэтому стремятся найти такие композиции жидких удобрений, которые имели бы высокие концентрации и низкие температуры кристаллизации (замерзания). Требуется сооружение резервуаров большой емкости для хранения жидких удобрений, так как они расходуются в течение относительно короткого времени. Применение жидких удобрений требует капиталовложений на организацию распределительных пунктов вблизи районов потребления, создания специального оборудования для внесения удобрений в почву, а также парка цистерн (железнодорожных и автомобильных) для их- перевозки применение безводного аммиака в качестве удобрения требует специального оборудования, рассчитанного на повышенное давление. [c.257]

Растворы сернокислых солей титана обладают рядом специфических особенностей, которые отличают их от обычных растворов — истинных и коллоидных [ 4]. Их свойства зависят не только от химического состава, но также и от условий получения. При выпаривании растворов образуется аморфная стеклообразная масса, а не кристаллические соли. Эти растворы не коагулируют при высаливании кислотой, солями или спиртом, при диализе они равномерно распределяются по обе стороны мембраны способны к реакциям обменного разложения, образованию двойных солей, восстановлению титана до низшей валентности и к образованию перекисных соединений. Аномальное состояние титана в растворе проявляется также в возможности получения концентрированных растворов титанилсульфата, несмотря на его слабую растворимость в серной кислоте средней и высокой концентрации. [c.115]

Высаливание ведут в стальных футерованных котлах с ме шалками. Наличие в растворе высокой концентрации одноименны ионов приводит к уменьшению растворимости соли сульфокислоть и выпадению ее в осадок. [c.40]

В водных растворах белков выделение белков может быть осуществлено высокими концентрациями солей этот процесс называется высаливанием. Высаливание белков производится полунасышенными или насыщенными растворами солей N32804, (N114)3 SO4 и др. и совершенно отличается от коагуляции лиофобных коллоидов слабыми концентрациями электролитов, в частности к высаливанию неприменимо правило Шульце-Гарди. В явлениях высаливания по Дебаю основное значение имеет вытеснение молекул растворенных веществ из электрического поля ионов, которые сильнее связываются с дипольными молекулами растворителя. По своему влиянию на высаливание ионы располагаются в последовательности, называемой лиотропными рядами, или рядами Гофмейстера, в частности, для натриевых солей [c.258]

Твердая соль (или ее концентрированный раствор), попадая в водный раствор газа, ионизируется. При этом образовавшиеся ионы, имеющие как положительный, так и отрицательный заряды, притягивают к себе диполи воды, которые окружают ионы.-.С ростом концентрации раствора происходит перестройка структурных параметров воды. При высоких концентрациях соли молекулярная структура раствора постепенно приближается к структуре кристаллогидрата соли.Шзаимодействие между диполями воды и ионами ингибитора имеет электростатический характер, оно более сильное, чем взаимодействие между молекулами газа и воды. Одновременно квазикристаллическая структура воды, имеющая пустоты, нарушается. Растворимость газа падает. Для создания структурных ячеек из молекул воды при образовании гидрата требуются большие энергия и переохлаждение раствора. Описанное явление известно в физической химии под названием высаливание. Оно наблюдается в системе, когда полярности компонентов раствора отличаются. Особенно ярко высаливание проявляется в тех случаях, когда молекулы растворенного вещества имеют дипольный момент, являющийся мерой полярности, равный нулю, а молекулы растворителя сильно полярны. Водные растворы метана,этана, пропана, бутана, хлора, инертных газов, азота, углекислого газа чувствительны к ингибиторам. [c.96]

Разделение неэлектролитов (или слабых электролитов) посредством вымывания водным раствором соли, обычно умеренной или высокой концентрации, называется высаливающей хроматографией. Проведенное Секи [5] разделение фенола и трех крезолов с применением разбавленного карбонатного буфера не является примером метода высаливающей хроматографии, так как концентрация карбоната была слишком низка для э( ектив-ного высаливания кроме того, разделение зависело от буферного действия смешанных карбонатов. [c.238]

Иониая сила. Значение этой величины оказывает влияние на прочность связывания фермента с носителем. При высокой концентрации солей присутствующие в растворе ионы вытесняют с поверхности носителя связанные за счет электростатических взаимодействий белковые молекулы. Иными словами, возрастание ионной силы вызывает десорбцию фермента. Однако иногда эта закономерность не действует, и увеличение концентрации соли, наоборот, способствует адсорбции фермента на носителе. В таких случаях принято говорить об эффекте высаливания белка из раствора. ч- [c.50]

Как видно из табл. 66, наиболее обогащены органическим веществом щелочные воды, а наименее хлоридно-натриево-кальцие-вые и хлоридно-натриево-магниевые воды. Следовательно, высокие концентрации ионов кальция и магния снижают содержание органических веществ в водах. Это может быть связано с плохой растворимостью в воде кальциевых и магниевых солей органических кислот или с коагуляцией (высаливанием) органических соединений этими ионами. [c.157]

Знание свойств и поведения растворов электролитов при средних и высоких концентрациях имеет большое значение как для электрохимии, так и для целого ряда смежных областей науки. Известно, однако, что большинство существующих в настоящее время теорий надежны только для малых концентраций. Наличие больших и почти непреодолимых трудностей на пути создания теории, способной точно оценивать термодинамические и кинетические свойства ионов даже в растворах умеренных концентраций, заставило ученых уделить большее внимание экспериментальным исследованиям таких растворов с привлечением различных, в том числе и новейших, методов. Глава первая книги (Ж. Денуайе, К. Жоликер) посвящена обзору достижений и состоянию этой области знаний. В ней много внимания уделено различным аспектам взаимодействия ионов с молекулами воды, рассмотрению природы явления гидратации и термодинамическим свойствам отдельных ионов. Особый упор сделан на анализ данных, полученных разными спектральными методами, включая инфракрасную и ра-мановскую спектроскопию, ядерный магнитный резонанс и др. Некоторое внимание уделено теории эффекта высаливания и всаливания неэлектролитов солями. Сделана попытка найти влияние этих эффектов на термодинамические свойства электролитов при определенных концентрациях. Приведены последние, наиболее достоверные значения чисел гидратации, полученных при помощи различных, в том числе и кинетических, методов. В заключение [c.5]

Дегидратация достигается также прибавлением солей в больших количествах. Первые порции последних снимают заряд с коллоидальных частиц, а дальнейшие отнимают воду от их гидратных оболочек. Поэтому для высаливания лиофильного коллоида необходимы значительно более высокие концентрации электролита, чем для лиофобных. Примером применения высаливания на практике может служить высаливание ядрового мыла из коллоидального раствора триглицерида. В отсутствии избытка соли раствор застывает в гель с большим количеством воды. Ядровое мыло представляет значительно более плотный гель с сравнительно небольшим содержанием воды (10 — 257о)- [c.407]