Клеточные суспензия, фиксация

Клеточная суспензия может быть использована как в виде живых интактных клеток, так и в фиксированном состоянии. Фиксированные клетки используются для дальнейшего окрашивания и последующего анализа проточной цитометрией. Наиболее часто используется фиксация этанолом. [c.201]

II этап. Спустя некоторый срок после введения изотопа, определяемый задачами исследования, кусочки тканей или мазки клеточных суспензий фиксируют. В качестве фиксатора для кусочков тканей чаще всего употребляют жидкость Карнуа (спирт хлороформ ледяная уксусная кислота — 6 3 1 длительность фиксации 2—3 ч), а для мазков клеточных суспензий — смесь спирта с ледяной уксусной кислотой (3 1 10—15 мин). Кусочки, тканей заливают в парафин и приготавливают из них срезы толщиной в 5—7 мкм. [c.345]

Белки и липиды различаются по многим физическим и биохимическим свойствам, что дает возможность простыми методами определить принадлежность изучаемого антигена к тому или иному классу соединений. Белковые антигены быстро разрушаются при мягкой обработке проназой, в то время как липидные антигены не подвержены действию протеолитических ферментов. В отличие от большинства белковых антигенов антигены липидной природы устойчивы к фиксации формальдегидом с последующим нагреванием до 80 °С. Эту процедуру можно проводить как с суспензиями отдельных клеток, так и со срезами тканей. Экстракция нативных или фиксированных формальдегидом клеток кипящим метанолом в течение 1 мин приводит к растворению части клеточных липидов, и метанольный экстракт в ряде случаев можно использовать без дальнейшей очистки для твердофазного радиоиммунологического анализа (РИА). Использование РИА описано в разд. IV. [c.160]

Метод полярографического определения скорости утилизации кислорода с помощью твердых электродов первоначально был развит применительно к суспензиям изолированных митохондрий. Измерение скорости дЫхайЯя клеточно т каневь1Х 11рШаратов требует внесения некоторых дополнений в конструкцию измерительных ячеек из-за необходимости предусмотреть возможность введения и фиксации специального держателя для тканевых срезов и кусочков. Регистрация дыхания срезов, как правило, проводится нри температурах 35—37 С. Поэтому необходимо термостатирование ячейки. Объем ячейки определяется размерами срезов либо количеством изолированных клеток. Скорость потребления кислорода клеточно-тканевыми препаратами колеблется в пределах 0,5—5 нмолей-мин мг (см. табл. 9). [c.221]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология