Карнуа фиксатор

Фиксатор Карнуа (6 3 1) широко используют в цитологической и эмбриологической практике для изготовления по- [c.63]

Исследуемый материал распределяется тонким слоем на чистой обезжиренной поверхности предметного стекла. Затем мазок, высушенный на воздухе, 20 мин обрабатывается фиксатором Карнуа (состав фиксатора ледяная уксусная кислота —10 частей, хлороформ — 30 частей и этиловый спирт — 60 частей). [c.25]

Реактивы 1) спирт этиловый — 100, 96, 75, 50, 25%-ный, 2) фиксаторы— Карнуа, метанол или спирт, 3) О-ксилол, 4) фуксин основной для приготовления фуксинсернистой кислоты, 5) 1 н. НС1, 6) серный эфир, 7) бальзам, 8) Парафин, 9) метабисульфит натрия или калия. [c.145]

Микроскопические препараты готовят как из фиксированных, так и нефиксированных (живых) объектов. Хорошими фиксаторами являются жидкость Карнуа для приготовления парафиновых блоков и 96%-ный этанол для фиксации свежих срезов и мазков клеточных структур, а также смесь Беккера. [c.180]

Многие исследователи меняют в фиксаторе Карнуа соотношение между хлороформом и уксусной кислотой или совершенно исключают хлороформ Наиболее часто используется упрощенный фиксатор Карнуа без хлороформа спирт (100 или 96%-ный)—3 части и ледяная уксусная кислота —1 часть. [c.184]

Фиксатор Карнуа 96°-ный спирт — 60 мл хлороформ — 30 мл, ледяная уксусная кислоты — 10 мл время фиксации — 15 мин. [c.213]

Известно много фиксаторов, ио каждый из них имеет определенное назначение. Очень важно выбрать такой фиксатор, который, убивая клетку, несильно искажает ее прижизненную структуру и отвечает целям исследования. Для цитологических и эмбриологических исследований обычно используют ядерные фиксаторы (фиксатор С. Г. Навашина, Карнуа и др.), хорошо фиксирующие ядр о. Некоторые реактивы хорошо фиксируют митохондрии и пластиды (фиксатор Г. А. Левитского) и др. [c.61]

Микроорганизмы под микроскопом можно наблюдать в жи вом виде и окрашенными различными растворами красок. Препарат для окрашивания готовят следующим образом на чистое обезжиренное стекло наносят тонкий слой (мазок) исследуемой культуры и высушивают его. Для закрепления клеток культуры на стекле мазок фиксируют, т. е. опускают в специальную жидкость или трижды проводят через пламя горелки. В результате фиксации убитые бактерии прилипают к стеклу. В качестве фиксатора обычно применяют жидкость Карнуа — 6 частей 90°-ного этилового спирта, 3 части хлороформа и 1 часть ледяной уксусной кислоты. После фиксации мазок подсушивают и окрашивают в течение 3—5 мин 0,1%-ным раствором метиленовой синьки в дистиллированной воде. Окрашенный мазок промывают водой, подсушивают и микроскопируют. [c.21]

Для фиксации используют измененные формы фиксатора Карнуа спирт — ледяная уксусная кислота (3 1), спирт — пропионовая кислота (3 1) или метиловый спирт — пропионовая кислота (3 1). Объекты находятся в фиксирующей жидкости 30 минут. [c.191]

Действует подобно фиксатору Карнуа. Уксусную кислоту иногда заменяют пропионовой. На основе последней разработан состав нескольких фиксаторов для растительных объектов [c.64]

Фиксатор Карнуа (абсолютный спирт, хлороформ и ледяная уксусная кислота, взятые в отношении 6 3 1) быстро проникает в ткани растения и обеспечивает хорошее окрашивание препаратов ядерными красителями. Готовить его нужно непосредственно перед употреблением. Объекты выдерживают в фиксаторе Карнуа от 2 до 24 часов, затем трижды промывают 70%-ным спиртом и хранят в нем до исследования. [c.184]

К видоизменениям жидкости. Карнуа относятся также так называемые пятиминутные фиксаторы, которые имеют высокую проникающую способность, размягчают ткани и сообщают препаратам хорошую окрашиваемость ядерными красителями. [c.184]

Фиксация с одновременным протравливанием в жидкости Карнуа (6 3 1), к которой добавляют насыщенный раствор уксуснокислого железа в 45%-ной уксусной кислоте (5 мл на 100 мл фиксатора). Объекты остаются в фиксирующей жидкости 24 часа и могут сохраняться без порчи в течение двух месяцев в холодильнике. [c.190]

II этап. Спустя некоторый срок после введения изотопа, определяемый задачами исследования, кусочки тканей или мазки клеточных суспензий фиксируют. В качестве фиксатора для кусочков тканей чаще всего употребляют жидкость Карнуа (спирт хлороформ ледяная уксусная кислота — 6 3 1 длительность фиксации 2—3 ч), а для мазков клеточных суспензий — смесь спирта с ледяной уксусной кислотой (3 1 10—15 мин). Кусочки, тканей заливают в парафин и приготавливают из них срезы толщиной в 5—7 мкм. [c.345]

Состав этиловый спирт, 50—70%-й раствор — 90 ч. формалин— 5 ч. ледяная уксусная кислота — 5 ч. По действию занимает промежуточное положение между фиксаторами Карнуа и Навашина. [c.65]

Материал из 70%-го раствора спирта сначала переносят на несколько секунд в холодный раствор 1 и. НС1, затем на несколько минут в раствор 1 н. H I с температурой 60°С для горячего гидролиза (6—8 мин — для фиксатора Карнуа или уксусного алкоголя). [c.101]

При изучении картин двойного оплодотворения нередко испытывают затруднения в выборе фиксатора и способов окрашивания препаратов. Наиболее распространены фиксации по Навашину или Карнуа или предварительная фиксация — несколько минут по Карнуа, а затем по Навашину. [c.245]

Метод Романовского-Гимза. Этим методом в клетках микроорганизмов одновременно выявляют ядерные вещества и волю-тин. Препарат фиксируют 5 мин метиловым спиртом или фиксатором Карнуа. В последнем случае для удаления следов уксусной кислоты препарат промывают спиртом и тщательно высушивают на воздухе. Окрашивают, препарат красителем Романовского-Гимза в течение суток, затем ополаскивают слабощелочной (pH 7,2) водой, высушивают и микроскопируют. Ядерные вещества окрашиваются в красно-фиолетовый цвет, цитоплазма - в слабо-розовый. [c.35]

Препараты бактерий обрабатывают фиксатором Карнуа 5 мин, промывают абсолютным спиртом, гидролизуют 7 мин в растворе 1 н. H l, подогретой до 60 °С, погружают на 1...2 мин в холодную 1 н. H l и переносят в фуксинсернистую кислоту (реактив Шиффа) на 3...4 ч. Препараты последовательно промывают в трех кюветах с сернистой водой по 20 мин в каждой, затем ополаскивают дистиллированной водой, высушивают и микроскопируют. Ядерное вещество окрашивается в фиолетовый цвет. [c.35]

Препараты бактерий обрабатывают фиксатором Карнуа 5 мин, промывают абсолютным спиртом, гидролизуют в течение 7 мин в растворе 1 н. НС1, подогретой до 60°С, погружают на 1—2 мин в холодную 1 н. НС1и переносят в фуксинсернистую кислоту (реактив Шиф-фа) на 3—4 ч. [c.50]

Для гистологического исследования семенник фиксируют в 15% нейтральном формалине или фиксаторе Карнуа (Г. А. Меркулов, 1961 Б. Ромейс, 1953 Г. И. Роскин), заливают в парафин, режут тонкие срезы (до 10 мк), окрашивают гематоксилин-эозином (рис. 54). [c.247]

Цитохимич.еские исследования НК в основном ведутся на фиксированных препаратах. Назначение фиксатора — приостановить ферментативные процессы, сохранить клеточные структуры и локализовать их химические компоненты. Фиксатор не должен изменять химические свойства или вызывать грубую, деформацию макромолекул НК. Ни один из существующих фиксаторов полностью не удовлетворяет этим требованиям. Лучщими, однако, следует признать спиртовые фиксаторы, спирто-ацетатные смеси, жидкость Карнуа, Серра, Беккера. [c.127]

Реактивы 1) фиксатор Карнуа (этанол хлороформ ледяная уксусная кислота — 6 3 1), 2) фиксатор Беккера (дистиллированная вода нейтральный формалин 10%-ный водный раствор СаС1г — 8 1 1), 3) спирт этиловый (25, 50, 75, 90, 100%-ный), 4) О-ксилол, 5) смеси этанола и ксилола (3 1 1 1 1 3), 6) 1 н. H IO4, 7) 5%-ная ТХУ, 8) раствор РНК-азы (1 мг фермента в 1 мл 0,2 М ацетатного буфера pH 5,в), 9) хромово-калиевые квасцы, 10) галлоцианин, 11) 1 к. NaOH, 12) 1 н. НС , [c.157]

Реактивы к методам определения состояния РНК в клетке 1) фиксатор Карнуа (этанол, хлороформ и ледяная уксусная кислота в соотношении 6 3 0,5), 2) фиксатор Беккера, 3) спирт этиловый (25, 50, 75, 96, 100%). 4) спирт н-бутиловый, 5) О-ксилол, 6) смеси О-ксилола и этанола (в оотно-шении 3 1, 1 1, 1 3), 7) 1 и. НС1, 8) хлорамин Т (0,5 — 5%-ные водные растворы), 9) уксусный ангидрид, 10) смесь метанола и хлороформа (1 1), II) смесь этанола и эфира этилового (3 1), 12) ЫаМОг (для приготовления азотистой кислоты), 13) 26%-ная уксусная кислота, 14) 1 н. H IO4, 15) 5%-ная ТХУ, 16) а-нафтол, 17) 0,2 М ацетатный буфер pH 4,6, 5,8, 18) 0,05 М фосфатный буфер pH 6,0, 19) КагСОз, 20) глицерин, 21) глицерин-желатина, 22) растворы ферментов (способ приготовления см. на стр. 161)—РНК-аза, трипсин, 23) красители (способ приготовления см. на стр. 165—173, 190) —пиронин Ж, прочный зеленый, акридиновый оранжевый, Судан III, судак черный Б. [c.173]

Очевидно также, что важное значение имеет длительность гидролиза. Если фиксатором служит жидкость Карнуа, то при оптимальном 10-минутном гидролизе удаляется половина всех оснований, по-видимому пуринов [12]. Более продолжительный гидролиз приводит к постепенному удалению из препарата ДНК, а следовательно, и к ослаблению окрашивания по Фёльгену. Слишком длительный гидролиз вызывает не только распад молекул ДНК до диффундирующих продуктов, но и превращение части дезоксипентозы в са-оксифруктоальдегид (НОСНг СО СНг СНг СНО), который образует с реактивом Фёльгена растворимый и диффундирующий краситель [11]. [c.118]

Фиксатором бутонов служили жидкость Карнуа (6 3 1) и ее некоторые модификации. Мейоз исследовали на препаратах давленой ткани, окрашенных уксуснокислым кармином или орсеином. Соматические хромосомы считали на препаратах давленой ткани молодых листочков. Материал фиксировали видоизмененной жидкостью Карнуа (3 1) с предварительной обработкой холодом или оксихинолином, препараты окрашивали уксуснокислым кармином или орсеином. [c.15]

В ряде случаев при исследовании мейоза уксусную кислоту заменяют пропионовой, а кармин — орсеином. Хорошие результаты дает окращивание материнских клеток пыльцы лактопро-пионовым орсеином при раздавливании свежих пыльников в капле красителя на предметном стекле. Бутоны некоторых растений необходимо фиксировать в горячем фиксаторе (в жидкости Карнуа или в ее видоизменениях) и при окрашивании материала на предметном стекле подогревать его на пламени. [c.192]

Для выяснения влияния дополнительной обработки на семена, облученные у-лучамп, изучали частоту аберраций хромосом в корешках апафазным методом в первом митозе. Корешки фиксировали в измененном фиксаторе Карнуа (уксусный алкоголь, 3 1) через каждые 4 часа, начиная с 40—50 до 68—80 час. после замачивания. Окрашивали фуксином но Фельгену. [c.130]

Ткани лучше всего фиксировать сразу после их получения, однако этот момент не является ключевым. Можно проводить амплификацию ДНК и в том случае, если ткани получены через семь (а возможно, и более) дней после смерти. Приемлемой матрицей для ПЦР является ДНК тканей, фиксированных в 10% забуференном формалине и залитых в парафиновые блоки. Вполне пригодным для ПЦР материалом являются ткани, фиксированные в этаноле или ацетоне и залитые в парафин. Несколько худшие результаты получаются при фиксации тканей фиксаторами Кларка и Замбони, параформальдегидом, формалином/этанолом/уксусной кислотой и совсем непригодны фиксаторы Зенкера, Карнуа, Буэна. Обработка препаратов кислыми растворами, декальцинирующими костную ткань, обычно приводит к деградации ДНК и тем самым препятствует амплификации. [c.174]

При оценке результатов фиксации следует учитывать, что нуклеиновые кислоты существуют в различных полимерных формах. Очевидно, что каждое фиксирующее вещество вызывает изменения как в степени полимеризации, так и в способности вступать в химические реакции. Не рекомендуется применять фиксаторы, блокирующие реакционноспособные хруппы и таким образом ослабляющие окрашиваемость нуклеиновых кислот (например, формальдегид). Хорошую сохранность структур обеспечивают кислые фиксирующие смеси, такие, как этанол-уксусная кислота и смесь Карнуа. Они, кроме того, постепенно разрывают связи между нуклеиновыми кислотами и белками и таким образом увеличивают число реакционноспособных кислых групп, что способствует хорошей окраши-ваемости основными красителями. Следует, однако, учитывать, что длительная фиксация в кислых смесях ведет постепенно к экстрагированию сначала РНК, а затем ДНК. В критических случаях (например, при цитофотоме-трическом количественном определении нуклеиновых кислот) следует согласовывать продолжительность фиксации с величиной объекта и температурой. Наиболее рацио- [c.46]

Материал фиксируют неразведенным этиловым спиртом, фиксатором Карнуа, ацетоформолом (100 мл 50%-го раствора этилового спирта, 7 мл формалина, 7 мл ледяной уксусной кислоты) и др. После фиксации его промывают 96%-м раствором спирта н хранят в крепком спирте. [c.134]

Молодые колосья пшеницы до выколашивания (когда до выхода колоса из листового влагалища остается около 3 см) или бутончики других культур фиксируют по Карнуа или уксусным алкоголем в течение 10—12 ч. Материал промывают и хранят в 70— 80%-м растворе этилового спирта или оставляют в фиксаторе, но помещают его в холодильник. Можно использовать для тех же целей фиксатор Ньюкомера. В этом случае фиксированный материал через сутки нужно перенести в свежий фиксатор и хранить в холодильнике. [c.202]

Ацетокарминовый метод. Фиксируют соцветия со зрелой пыльцой в фиксаторе Карнуа. Продоллсительность фиксации колеблется от 30 мии до нескольких часов. Материал промывают ихранят Б 80%-м растворе этилового спирта. После хранения пыльник выкладывают на предметное стекло и раздавливают Б капле ацетокармина. Убрав лишние ткани, препарат накрывают покровным стеклом и осторожно подогревают на спиртовке. [c.208]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология