Справочник химика 21

Химия и химическая технология

Статьи Рисунки Таблицы О сайте English

хст выявление микоплазмы

    Микоплазма. Источником заражения микоплазмой при культивировании клеток могут быть культуральная среда, сыворотка, трипсин или сам исследователь. Заражение не выявляется невооруженным глазом, и, поскольку оно не приводит к изменению роста культуры, заражение микоплазмой часто остается незамеченным. Следует регулярно (один раз каждые 1—3 мес) проверять культуры на наличие в них микоплазмы, поскольку такое заражение существенно изменяет биохимию клеток, их антигенные свойства и параметры роста культуры. Предложено несколько методов выявления микоплазмы, но наибольшее распространение получил метод флуоресцентного окрашивания ДНК по методу Чена (см. гл. 4). [c.25]


    При изучении клеток эукариот, культивируемых вне организма, важно использовать биологически чистые системы. Прежде всего исследуемые клетки или клетки, используемые в биотехнологии, не должны содержать неконтролируемых вирусов и микоплазм. 8 статье описаны наиболее часто встречающиеся контаминанты, методики их выявления и даны рекомендации по предупреждению заражения клеточных культур микоплазмамн. Библиогр. 86 назв. 1. [c.316]

    Ж. Выявление заражения микоплазмой и ее ликвидация [c.291]

    Заражение культуры клеток микоплазмой создает значительно более сложные проблемы, чем заражение бактериями и грибами. Присутствие некоторых видов микоплазмы в культуре может быть обнаружено по вызываемым ими дегенеративным эффектам. Однако другие виды микоплазмы могут активно метаболизировать и пролиферировать в культуре, не вызывая каких-либо заметных морфологических изменений в линии клеток, которую они загрязняют. При этом, если в задачу исследователя входит изучение метаболизма клеток, свойств поверхностных рецепторов, взаимодействия вирусов с хозяином и тому подобное, присутствие микоплазмы в культуре может приводить к неточной или вовсе неправильной интерпретации результатов. В настоящее время существует 9 основных методов выявления микоплазмы [5, 6], из которых в АТСС постоянно применяются прямые культуральные испытания и непрямые исследования с использованием бисбензимидазольного флуорохрома (Хехст 33258) для окраски ДНК- Контролю на микоплазму подвергаются все приходящие в коллекцию линии клеток, а также все клетки, предназначенные для распределения [16]. [c.128]

    Все работы по качественному выявлению микоплазмы в неизвестных культурах следует проводить в вертикальных ламийар-ных боксах, по возможности освобожденных от работы с другими культурами. Нужно постоянно помнить о возможности зара- [c.132]

    Методы выявления микоплазм в культурах клетак [c.112]

    При получении препаратов сыворотки требуется сводить гемолиз к минимуму и проводить обработку только подходящих партий сыворотки. Обработка включает в себя пропускание сыворотки через серию фильтров с диаметром пор до 0,1 мкм, после чего проводятся различные тесты на выявление возможных загрязнений бактериями, микоплазмой и вирусами. Кроме-того, для каждой партии сыворотки следует определять ее способность поддерживать рост первичных культур, а также дипло-идных iT установившихся линий клетОК, Используя как тест на серииное пассирование, так и тест на эффективность посева. [c.82]

    Серодиагностика пневмонии, вызванной миконлазмой. Осуществляется постановкой РСК с диагностикумом, приготовленным из микоплазмы пневмонии, или РПГА, в которой используют эритроциты барана с адсорбированным на них микоплазменным антигеном. Диагностическое значение имеет нарастание титра антител в 4 раза и более в парных сыворотках крови, взятых от больного на 7—8-й день и в Конце 2-й недели болезни. Высокий титр антител, выявленный в этих реакциях при однократном исследовании, не является доказательством наличия болезни, так как положи- [c.155]


    Биохимические методы. Методы основаны на выявлении актив-эсти ферментов, характерных для микоплазм, или на выявлении вменений в метаболизме клеток, возникающих вследствие мико-пазменной инфекции. Первичная диагностика, позволяющая разли-г1ть микоплазмы, способные разлагать глюкозу или аргинин и ответственно сдвигать pH среды в кислую или щелочную область, зстоит в простом добавлении к среде цветного индикатора [54]. [c.117]

    Плазмидйые зонды для выявления контаминации клеточных культур микоплазмами сконструированы уже несколькими исследовательскими группами [67—71]. Применение гибридизационного метода в описанной нами модификации ограничено теми лабораториями, где возможна работа с радиоактивными изотопами. Развитие этого метода и его более широкое распространение связывают с заменой радиоактивной метки на ферментную, т. е. с использованием щелочной фосфатазы или пероксидазы хрена, которые могут быть пришиты к плазмидным зондам с помощью биотин-авидиновых комплексов. [c.120]


Библиография для хст выявление микоплазмы: [c.125]   
Смотреть страницы где упоминается термин хст выявление микоплазмы: [c.118]    [c.321]    [c.251]    [c.300]    [c.350]    [c.114]    [c.117]    [c.251]   
Культура животных клеток Методы (1989) -- [ c.128 ]




ПОИСК







© 2025 chem21.info Реклама на сайте