Радиоактивные метки в изучении метаболизма

Пристальное внимание к проблеме получения меченых тритием органических соединений определяется несколькими объективными предпосылками достоинствами трития как радиоактивной метки (удобный период полураспада, высокая молярная радиоактивность и т.д.) наличием в настоящее время методов разделения сложных смесей с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) существенным преимуществом меченых тритием препаратов в исследованиях по лиганд-рецепторному связыванию высокими молярными радиоактивностями практическим отсутствием изотопных эффектов при специфическом связывании с рецепторами, что необходимо для изучения механизма действия биологически активных препаратов частым использованием меченых тритием соединений при фармакокинетических исследованиях для определения органа-мишени, где преимущественно накапливается лекарственный препарат, или скорости выведения этого препарата из живых организмов необходимостью тритиевых соединений для исследования метаболизма, изучения субстратной специфичности ферментов, а также использования их для поиска новых эффективных ингибиторов ферментов. Если при этом учесть, что тритиевые препараты как минимум в десять раз дешевле аналогичных С-меченых, то становится понятным большой интерес ко всему, что связано с получением тритиевых аналогов биологически активных соединений. [c.484]

Участие гликозидов в процессе метаболизма подтверждается при изучении биогенеза кумарина с использованием радиоактивной метки. Если глюкозид о-кумаровой кислоты является предшественником кумарина, то, следовательно, а) это не конечный продукт метаболизма, б) сахарный остаток этого гликозида может быть субстратом в процессах дыхания. Дальнейшие исследования метаболической последовательности, ведущей к синтезу последующему гидролизу кумарина, будут интересны как с физиологической, так и биохимической точек зрения. [c.215]

Клеточные культуры обладают многими преимуществами перед интактными животными, когда речь идет о включении радиоактивной метки и изучении действия лекарственных препаратов и гормонов. При использовании культур метка или лекарственный препарат могут быть добавлены и удалены в определенное время, их внеклеточная концентрация и удельная активность могут поддерживаться постоянными и, кроме того, на их метаболизм не будут влиять клетки других органов. Это не означает, конечно, что использование изотопов в культурах клеток лишено своих собственных подводных камней. [c.163]

Результаты измерений могут выражаться несколькими способами. В большинстве методик определяется общее число распадов (в единицу времени) в образце, которое умножается на коэффициент, характеризующий эффективность счетчика таким путем получают общую радиоактивность, выраженную в числе распадов в минуту. Деление последней величины на массу образца дает удельную радиоактивность] в некоторых случаях, например, при изучении процессов расщепления, мольная удельная активность может быть разделена на число меченых положений в молекуле. Результаты эксперимента по введению метки выражаются далее либо как включение (общая активность в продукте реакции как часть общей введенной активности), либо как разбавление (отношение удельной активности предшественника к удельной активности продукта реакции), либо как удельное включение (величина, обратная разбавлению). Когда по условиям эксперимента реальный выход продукта превращения низок, предпочтительнее определение удельной активности. Любому из способов выражения результатов свойственен — часто в скрытом виде — ряд трудностей, связанных с количествами эндогенных предшественников и промежуточных соединений ( метаболического пула ), а также с соотношением между скоростью изучаемого процесса и скоростями общих процессов метаболизма [96—98]. Включение меченого ацетата в типичный поликетид в микроорганизмах обычно составляет 1 —10% в растениях эта величина на один — два по- [c.470]

Гидроксильная группа в обеих этих кислотах находится у углеродного атома, не несущего радиоактивной метки. Это указывало на то, что гидроксил возникает не из карбоксильной группы ацетата, а образуется в результате вторичных процессов, например лри гидратации двойной связи. Изучение состава метаболитов базидиомицета В-841, культивируемого в присутствии этилового спирта, позволило подтвердить изложенные выше выводы и дать общую схему метаболизма углерода в этом грибе [8, 9]. Опыты с добавлением 1-С -сукцината показали, что радиоактивность последнего распределяется между С - и С4-углеродными атомами немотиновой кислоты в отношении 1 2. Этот факт указывал на возможность превращений одной из карбоксильных групп сукци-ната в карбоксильную группу ацетата, которая и используется в биосинтезе немотиновой кислоты [5]. [c.338]

Разумеется, введение радиоактивной метки in vivo незаменимо при изучении физиологических аспектов метаболизма на клеточном и организменном уровне. Нередко для этой цели используют так называемую импульсную метку , т. е. быстрое введение изотопа в организм животного (обычно путем инъекции) или в питательную среду клеток на относительно корот- [c.261]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология