Микоплазма, заражение культуры

Микоплазма. Источником заражения микоплазмой при культивировании клеток могут быть культуральная среда, сыворотка, трипсин или сам исследователь. Заражение не выявляется невооруженным глазом, и, поскольку оно не приводит к изменению роста культуры, заражение микоплазмой часто остается незамеченным. Следует регулярно (один раз каждые 1—3 мес) проверять культуры на наличие в них микоплазмы, поскольку такое заражение существенно изменяет биохимию клеток, их антигенные свойства и параметры роста культуры. Предложено несколько методов выявления микоплазмы, но наибольшее распространение получил метод флуоресцентного окрашивания ДНК по методу Чена (см. гл. 4). [c.25]

При изучении клеток эукариот, культивируемых вне организма, важно использовать биологически чистые системы. Прежде всего исследуемые клетки или клетки, используемые в биотехнологии, не должны содержать неконтролируемых вирусов и микоплазм. 8 статье описаны наиболее часто встречающиеся контаминанты, методики их выявления и даны рекомендации по предупреждению заражения клеточных культур микоплазмамн. Библиогр. 86 назв. 1. [c.316]

II. снижение риска заражения культуры вирусами, грибами, микоплазмой [c.40]

Аликвоты клеточных суспензий можно замораживать (см. ниже) и проверять на зависимость от экзогенных факторов роста, инкубируя их в КС-А или КС-Б при 37 °С. В отсутствие ИЛ-3 клетки, зависимые от этого фактора роста, погибают в течение 24—36 ч (они просто распадаются ). Для того чтобы предотвратить заражение культур, в особенности микоплазмой, мы регулярно принимаем следующие меры предосторожности. [c.311]

Заражение культуры клеток микоплазмой создает значительно более сложные проблемы, чем заражение бактериями и грибами. Присутствие некоторых видов микоплазмы в культуре может быть обнаружено по вызываемым ими дегенеративным эффектам. Однако другие виды микоплазмы могут активно метаболизировать и пролиферировать в культуре, не вызывая каких-либо заметных морфологических изменений в линии клеток, которую они загрязняют. При этом, если в задачу исследователя входит изучение метаболизма клеток, свойств поверхностных рецепторов, взаимодействия вирусов с хозяином и тому подобное, присутствие микоплазмы в культуре может приводить к неточной или вовсе неправильной интерпретации результатов. В настоящее время существует 9 основных методов выявления микоплазмы [5, 6], из которых в АТСС постоянно применяются прямые культуральные испытания и непрямые исследования с использованием бисбензимидазольного флуорохрома (Хехст 33258) для окраски ДНК- Контролю на микоплазму подвергаются все приходящие в коллекцию линии клеток, а также все клетки, предназначенные для распределения [16]. [c.128]

Производные 1,8-нафтиридонкарбоновых кислот 12 пригодны для применения в животноводстве в качестве добавок к кормам [12, 18, 19, 23-29] и питьевой воде животных [19], как консерванты органических и неорганических материалов - кожи, древесины, бумаги, волокон, полимеров, смазочных масел, красителей, продтоваров и воды [12, 13, 19, 27-34]. В сельском хозяйстве их используют в качестве активных ингредиентов средств борьбы с болезнями растений, вызываемыми фитопатогенными бактериями [10, 13, 35-37]. Эффективное фунгицидное действие нафтиридииов 12 [30, 38], связанное с ингибированием ДНК-гидразы, позволяет применять их для дезактивации зараженных микоплазмой культур клеток [39-41]. [c.170]

Используемые при этом питательные среды весьма сложные и дорогие (см специальную часть книги), обычно содержащие антибиотик и сыворотку животных (от 5 до 20%) К сожалению, сыворотки могут выступать источником заражения (загрязнения) культуры животных клеток бактериями, вирусами, микоплазмами, или какими-либо ингибиторами Поэтому синтетические сре-№1 представляются более удобными и выгодными с экономической точки зрения На IV этапе клетки переносят в биореактор бол1,шо5о объема Биоре торы для культур животных клеток считают большими, начиная с объема 10 литров, а если имеются 100—200-литровые биореакторы, то это исключительно большие аппараты Они отчасти напоминают биореакторы, применяемые в промышленной микробио- [c.344]

Метод флюоресцирующих антител дает возможность выявить респираторные вирусы в зараженных клеточных культурах в более ннш сроки, чем их индикация по ЦПД или по гемадсорбции, и при весьма малой инфицирующей дозе. С помощью иммунофлюоресцентного метода проводится не только индикация, но и идентификация вирусов парагриппа, РСВ, аденовирусов и микоплазм в зараженных клеточных культурах. Кроме того, после накопления в клеточных культурах можно идентифицировать аденовирусы—в РСК, вирусы парагриппа—в РТГА, РСК и в реакции нейтрализации со специфическими антисыворотками. [c.234]

Используемые красители, связываясь с ДНК, начинают флуоресцировать (свободный краситель не флуоресцирует) и, таким образом, хорошо окрашивают ядра. Микоплазма обнаруживается в виде характерных флуоресцирующих гранул в цитоплазме и на плазматических мембранах зараженных клеток. Кроме того, для тестирования микоплазмы могут быть использованы стандартные культуры с PPLO-агаром [c.259]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология