Мембраны флюоресценция

Флюоресцентный анализ дает возможность исследовать подвижность фосфолипидных молекул в мембране, оценить вязкость липидной фазы мембраны (так называемую микровязкость мембран). Микровязкость мембраны можно оценить по изменениям спектров флюоресценции, а также по степени поляризации Р флюоресцентного излучения при освещении мембраны поляризованным светом. Связь степени поляризации Р и микровязкости мембраны т] выражается формулой Перрена и Яблонского [c.17]

Будет ли состояние данного бислоя жидким или твердым, зависит от химического состава липидов, формирующих бислой, числа заряженных групп, приходящихся на единицу поверхности мембраны, и температуры. Для изучения фазовых переходов в опыте обычно изменяют температуру образца и следят за изменением какой-либо характеристики, различающейся у твердой и жидкой мембраны. Такой характеристикой могут быть растворимость веществ в мембране, спектры комбинационного рассеяния, светорассеяние суспензии, форма сигналов ЭПР свободных радикалов в липидной фазе (спиновых зондов), интенсивность или спектр флюоресценции флюоресцентных зондов и т. д. [c.103]

Флюоресцентный зонд (рис. 42) представляет собой флюоресцирующую молекулу, которая находится в липидном слое мембраны или же адсорбируется на ее поверхности. Параметры флюоресценции зонда (см. с. 36) зависят от свойств непосредственного окружения молекул зонда в мембранах вязкости, полярности среды, близости заряженных групп, наличия различных молекул — акцепторов энергии электронного возбуждения, а также от диффузии молекул — тушителей флюоресценции, в частности воды. [c.109]

Поляризацию флюоресценции определяют, чтобы изучать микровязкость структур клетки. Если в мембранную систему поместить флюоресцентный зонд, например 4-диметиламинохалкон, 3-метоксибензантрон или 1-анили-нонафталин-8-сульфонат,- то он, как гидрофобная молекула, окажется внутри мембраны. Измерив Р для такого зонда, можно определять микровязкость мембраны (см. главу 5). [c.41]

В описанном Франциско и др. [77] первоначальном эпифлюоресцентном методе для подсчета водных бактерий применялись обычные мембраны черного цвета, которые, по-видимому, до сих пор являются наиболее удобными. Размеры многих водных бактерий весьма малы, поэтому следует применять мембраны с размером пор 0,2 мкм. Важно, чтобы мембраны сами не флюоресцировали. Для этого необходимо проверять каждую партию мембран, так как некоторые изготовители применяют красители, которые обнаруживают значительную авто-флюоресценцию. Вполне удовлетворительными были мембраны черного цвета, выпускаемые одно время фирмой Миллипор компани , но в 70-е гг. был заменен краситель, что привело к значительному увеличению фоновой флюоресценции [56]. В настоящее время наиболее подходящими являются нитро-целлюлозные мембраны черного цвета, производимые фирмой Сарториус [120]. Однако потребитель должен критически относиться к некоторым изделиям, поскольку технология производства нередко меняется, о чем потребителя не ставят в известность. [c.214]

В разд. 8.5 и 8.7 мы описали методы флюорохромного окрашивания микробных клеток, задержанных мембранными фильтрами. Для окрашивания клеток, содержащих антиген, комплементарный антителу, можно также использовать флюоресцирующие антитела. Эта процедура является очень простой. Клетки, задержанные на черной мембране (при этом нужно убедиться, что собственная флюоресценция мембраны незначительна), окрашивают, поместив на нее каплю соответствующего флюоресцирующего антитела, разбавленного до необходимой концентрации, чтобы исключить неспецифическое окрашивание. Мембрану, расположенную на предметном стекле, выдерживают во влажной атмосфере (например, в чашке Петри с влажным куском фильтровальной бумаги) около часа, затем мембрану промывают фосфатно-буферным солевым раствором и заключают под покровное стекло в глицерин с буферным раствором. Подсчет ведут с помощью эпифлюоресценции, как описано выше. [c.234]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология