Поляризация флюоресценции

Ценную информацию о молекулярной организации биообъектов и патологических изменениях в тканях, клетках и субклеточных частицах можно получить, измеряя поляризацию люминесценции. При освещении объекта поляризованным светом люминесценция оказывается тоже поляризованной. Степень поляризации флюоресценции (Р)— доля поляризованного света флюоресценции в общей суммарной интенсивности флюоресценции. Если за время жизни возбужденного состояния молекула не успевает повернуться (например, находится в замороженном растворе), то она испустит квант флюоресценции, поляризованный точно так же, как поглощенный квант. Степень поляризации при этом будет максимальной (Ро). В жидких растворах, однако, за время т ориентация молекул успевает измениться и происходит деполяризация. Молекула поворачивается тем быстрее (и тем больше деполяризация), чем меньше вязкость (т ) ее ближайшего окружения. Связь между Р и 11 установлена Перреном и Яблонским [c.40]

Несколько условно липидную фазу мембран можно рассматривать как жидкую среду с определенной вязкостью, от которой зависит скорость поступательного и вращательного движения молекул (в том числе мембранных белков и ионов) и которая поэтому регулирует проницаемость мембран и скорость протекающих в них ферментативных реакций. Предложено много методов оценки вязкости среды в липидной фазе мембран (так называемой микровязкости мембран). Один из наиболее доступных методов основан на измерении поляризации флюоресценции красителя (зонда), растворенного в липидной фазе. [c.113]

В оптических методах используют зависимость между составом вещества и его светопоглощением (абсорбцией света), светорассеянием, преломлением света (рефракцией), вращением плоскости поляризации плоскополяризованного света (оптически-активными веществами), люминесценцией (главным образом, флюоресценцией под влиянием ультрафиолетовых лучей). [c.449]

Величину дипольного момента Илг можно получить по величине диэлектрической проницаемости. Иногда можно определить дипольный момент возбужденного состояния, если полоса переноса заряда наблюдается при флюоресценции. При этом в принципе возможно применить два метода. В одном методе используется зависимость длины волны флюоресценции от полярности растворителя, в другом — влияние сильного электрического поля на поляризацию света. Эти методы более детально будут освещены в разд. 111-3 т. 1 и разд. П-5 т. 2. [c.146]

Флюоресцентный анализ дает возможность исследовать подвижность фосфолипидных молекул в мембране, оценить вязкость липидной фазы мембраны (так называемую микровязкость мембран). Микровязкость мембраны можно оценить по изменениям спектров флюоресценции, а также по степени поляризации Р флюоресцентного излучения при освещении мембраны поляризованным светом. Связь степени поляризации Р и микровязкости мембраны т] выражается формулой Перрена и Яблонского [c.17]

Поляризацию флюоресценции определяют, чтобы изучать микровязкость структур клетки. Если в мембранную систему поместить флюоресцентный зонд, например 4-диметиламинохалкон, 3-метоксибензантрон или 1-анили-нонафталин-8-сульфонат,- то он, как гидрофобная молекула, окажется внутри мембраны. Измерив Р для такого зонда, можно определять микровязкость мембраны (см. главу 5). [c.41]

В качестве светового микроскопа применяется исследовательский микроскоп — вариант прибора Zetopan, дающий возможность проводить исследования в проходящем или отраженном свете в светлом и темном поле, при фазовом контрасте, поляризации света и флюоресценции. С помощью прибора можно идентифицировать частицы, определить их количество, площадь и длину, про- [c.129]

Физико-химические методы анализа близко подходят к физическим методам, основанным на измерении только физических свойств вещества. И в физических и в физико-химических методах используют разнообразную аппаратуру, поэтому их объединяют под общим названием инструментальных методов. Измеряют такие свойства как теплопроводность, теплоты реакций, плотность, поверхностное натяжение, вязкость, показатели преломления, по-луэлектродные потенциалы, электрическую проводимость, флюоресценцию, вращение плоскости поляризации, помутнение, излучение радиации, поглощение лучистой энергии и др. [c.348]

Вопрос о применении флюоресцентной микроскопии для изучения коллоидных систем был рассмотрен Гаузером я Фрошем [27]. Эти авторы, между прочим, предложили для облегчения изучения коллоидных систем добавлять к последним флюоресцирующие вещества При исследовании ориентации мицелл и спиральной структуры ряда естественных и искусственных целлюлозных волокон использовалось явление поляризации и дихроизма флюоресценции сильно флюоресцирующих красителей прямого крашения, адсорбированных на текстильном волокне. Пригодными для этого метода оказались тиофлавин 8 и прочный диазо-желтый-26 [28]. [c.218]

Зависимость коэффициента поляризации Р от вязкости окружения т) описывается уравнением Перрена (2.12), приведенным в главе 2. Если известны другие параметры в этом уравнении, можно найти т), зная Р. Другой метод оценки микровязкости основан на измерении эксимериза-ции флюоресцентного зонда пирена (рис. 44). В достаточно концентрированном растворе этого зонда молекулы (А), перешедшие в возбужденное состояние (А ) в результате поглощения фотона, могут затем, сталкиваясь с невозбужденными молекулами зонда, образовывать коротко-живущие комплексы — эксимеры (АА ), максимум флюоресценции которых отличается от максимума мономерных молекул [c.113]