Альбумин сывороточный показатель преломления

Рис. 124. Диаграмма градиента показателя преломления при электрофорезе нормальной плазмы крови человека при рН=8,6, когда все молекулы белков заряжены отрицательно. Два самых высоких пика представляют сывороточный альбумин аз, р и 7 являются смесями сывороточных глобулинов р представляет фибриноген. Два необозначенных пика являются неподвижными пиками вблизи положений первоначальной границы .

В рефракционных системах для перехода от показателя преломления к концентрации раствора необходимо знать удельный инкремент преломления (уравнение (П1. 1)). Значение этой константы для различных белков варьирует незначительно. Например, для бычьего сывороточного альбумина удельный инкремент преломления равен 0,00187, тогда как для р-липопротеида, содержащего больщое количество липидного материала, он составляет 0,00171. С длиной волны эта величина несколько изменяется, так что, например, для бычьего сывороточного альбумина удельный инкремент преломления возрастает от 0,00187 при 578 нм до 0,00195 при 436 нм. Увеличение температуры на 20° С приводит к изменению лищь шестого знака величины инкремента [1]. Для ультрацентрифугирования точность определения удельного инкремента преломления не имеет такого значения, как при исследовании светорассеяния. Зависимость между показателем преломления и концентрацией, дающая величину удельного инкремента преломления, обычно линейна. В то время как показатель преломления может быть измерен с большой точностью, расчет точной концентрации белка, используемого в опыте, вызывает затруднения. В большинстве случаев нет возможности очень точно измерить площадь под пиком или смещение полосы. Максимальная известная точность определения смещения составляет 0,02 ширины полосы, однако далеко не все исследователи достигают [c.151]

При рассмотрении вопросов, касающихся электрофореза белков, уже указывалось, что водные растворы белков обладают большим показателем преломления, чем вода, и что это обстоятельство может служить для определения положения подвижной границы при электрофорезе. Показатель преломления растворов белка линейно возрастает по мере увеличения концентрации белка в растворе. Разница между показателем преломления 1-процентного раствора белка и показателем преломления воды получила название удельного прироста преломления. Этот прирост слегка варьирует в зависимости от характера белка. Так, например, для сывороточного альбумина быка он равен 0,001901, для сывороточного альбумина человека — 0,001887, для яичного альбумина — 0,001876, для у-глобулинов человека — 0,001875 [106]. Температура и наличие в растворе солей не влияют заметным образом на удельный прирост преломления, поэтому концентрация белка в растворе может быть определена весьма быстро путем измерения показателя преломления раствора и вычитания из него показателя преломления диализата. Необходимо, однако, помнить, что прирост показателя прелом-. ления липопротеидов, равный 0,00171, значительно меньше, чем соответствующая величина для белков, не содержащих жиров [107]. [c.139]

Инкубируя митохондрии в аэробных условиях, мы наблюдали, подобно другим авторам, спонтанное набухание и индуцированное сокращение митохондрий. На печеночных митохондриях нами исследовалось действие различных веществ, из которых одни стабилизируют структуру, а другие усиливают спонтанное набухание [17, 18]. Изменения структуры определяли по методу Клиленда 119], основанному на снижении светорассеяния в результате уменьшения показателя преломления митохондрий при набухании. Изменение светорассеяния регистрируется по изменению оптической плотности в области 520 тмк. Определялось как спонтанное набухание, так и сокращение митохондрий под действием только АТФ или под действием АТФ в присутствии Mg++ сывороточного альбумина и С-фактора Ленинжера [20]. [c.113]