Комплексы сывороточного альбумина быка

Предложено много гипотез, касающихся роли ионов металла в ферментативных реакциях. Не рассматривая эти гипотезы подробно, отметим основные общие положения 1) металл способствует связыванию субстрата с ферментом и входит в состав активного центра 2) комплекс металла с субстратом является фактически активированным субстратом и 3) образование комплекса между металлом и функциональными группами белка способствует поддержанию третичной структуры белка в конформации, необходимой для выполнения каталитической функции. Клотц [187], основываясь на данных об участии ионов металлов в связывании ииркдпн-2-азо-л-диметиланилина сывороточным альбумином быка, предположил, что для пептидаз, требующих наличия нона Мп(П) — слабого комплексообразователя, роль иона металла состоит не в связывании субстрата в основном состоянии. Он полагал, что один из возможных механизмов катализа включает стабилизацию промежуточного тетраэдрического соединения по следующему механизму [c.125]

Были обнаружены также слаборастворимые комплексы, образованные белковыми катионами и анионами нуклеиновых кислот эти комплексы применялись для осаждения белковых компонентов смесей [95, 174]. Комплексы некоторых белков и природного полиэлектролита, гепарина, также применимы для осаждения белков [214] (3, 7, 4). Было показано, что деканол и ряд других веществ, особенно других спиртов, облегчают кристаллизацию сывороточных альбуминов человека и быка из водно-спиртовых смесей [33] предполагается, что при этом образуются комплексные соединения. [c.51]

Для гиалуроновой кислоты Огстон и сотр. [30—32] получили данные, свидетельствующие о том, что гиалуроновая кислота из синовиальной жидкости быка представляет собой комплекс с белком, содержание которого равно 26—30%. При выделении в мягких условиях (дифференциальное фильтрование, использование хлористого цетилпиридиния) гиалуроновую кислоту не удается освободить от этого белка. Белок не отделяется и при электродиализе. Огстон и Шерман [33] сообщили, что электродиализ синовиальной жидкости быка при 37 ма (5,6 ма/см , 0,025 М фосфат, pH 7,0, 2°) вызывает быстрое удаление белка через мембрану (миллипоровые мембраны с диаметром пор 0,4 мк), но даже после 36 час содержание белка в комплексе не уменьшается. Тот же результат был получен при электродиализе чистого комплекса белка с гиалуроновой кислотой при 37 ма в течение 12 час — времени, которое необходимо для удаления 90% общего белка синовиальной жидкости. Сывороточные альбумин и углобулин легко проходят через мембрану. Огстон и Шерман так объяснили свои результаты Поскольку есть основания считать, что присутствующий в комплексе белок обладает нормальным размером молекул, и, следовательно, в свободном виде он должен легко проходить через миллипоровую мембрану (как проходят все остальные белки синовиальной жидкости быка и два исследованных белка сыворотки), полученные данные указывают, что этот белок нельзя выделить из комплекса простым электрофорезом . [c.32]

Растворы уреазы (25 нМ) в воде (pH 6) обрабатывали ВЧ-ультразвуком в течение 1.5-2 ч при температуре 56°С в присутствии возрастаюшдх концентраций полимерного антиоксиданта по-ли(ДСГ) в диапазоне от l( до 10- М. В табл. 5 представлены константы скорости инактивации уреазы ин и ку в поле УЗ-кавитации в присутствии поли(ДСГ). Величины и уз снижаются в 2 и 3 раза в присутствии 1.0 нМ поли(ДСГ), т.е. полимерный антиоксидант сильно тормозит УЗ-инактивацию уреазы в присутствии ингибитора в концентрации, которая в 25 раз ниже концентрации белка. Увеличение концентрации по-ли(ДСГ) в пределах 10- -10- М вызывает рост всех трех констант скорости инактивации уреазы пропорционально содержанию ингибитора, что связано с его непосредственным взаимодействием с ферментом. В нашей лаборатории показано, что поли(ДСГ) в воде представляет собой полиэлектролит [30], способный взаимодействовать с белками - амфолитами, что подтверждено на примере сывороточных альбуминов человека и быка методами разностной спектрофотометрии и флуориметрии [31]. Прочные нековалентные комплексы поли(ДСГ) с уреазой характеризуются снижением активности фермента в них в условиях УЗ-кавитации (повышение уз и ) и при [c.129]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология