Иодацетат, реакция с белками

Наиболее подходит для этой цели меркаптоэтанол. Поскольку свободные сульфгидрильные группы весьма реакционноспособны и легко подвергаются реокислению до дисульфидных групп, их обычно блокируют, прежде чем продолжать деградацию пептидной цепи. Раньше для этого пользовались иодацетамидом или иодацетатом, которые алкилируют сульфгидрильные группы. Однако позднее было показано, что лучшие результаты дает акри-лонитрил. Цианэтилирование сульфгидрильных групп белка акрилонитрилом протекает количественно и без побочных реакций [c.89]

Некоторые из скрытых —SH-групп нативного яичного альбумина реагируют с иодацетамидом, хотя с другими реагентами они не взаимодействуют. Заслуживает упоминания тот факт, что при реакции с иодацетатом образуется заряженный остаток, а при реакции с иодацетамидом — незаряженный. Это, повидимому, и является причиной того, почему иодацетат ингибирует, а иод-ацетамид не ингибирует термическую коагуляцию белков сыворотки. На указанном явлении основан широко распространенный метод анализа крови на рак [74а]. [c.294]

Затруднение первого типа связано с тем, что реакционноспособность группировки в глобулярном белке зависит от ее химического окружения, так что она может быть замаскирована в отношении потенциального инактивирующего реагента, хотя и доступна действию с5уб-страта или какого-либо другого реагента. Таким образом, неспособность реагента инактивировать фермент может служить основанием для тех или иных выводов лишь в том случае, если показано, что сама реакция с ферментом произошла. Трудности второго типа возникают вследствие повышения реакционноспособности некоторых группировок, которые в результате начинают взаимодействовать с данным реагентом, хотя в нормальном случае они с ним не взаимодействуют. В качестве примера можно привести недавнюю работу Такахаси и др. [9], показавшую, что карбоксильная группа рибонуклеазы Т] реагирует с иодацетатом, который известен как реагент на более сильные нуклеофильные группы типа сульфгидрильной или имидазольной. Можно сослаться также на другую работу [10], в которой показано, что Ы-этилмалеимид может реагировать с е-аминогруп-пой лизина, а не с сульфгидрильной группой, в отношении которой он, как принято считать, специфичен. [c.220]

Со времени открытия Лундсгардом иодацетатного отравления мышц и ингибирования ферментативных процессов в дрожжах применение этого реагента в физиологических экспериментах вызывает значительный интерес. Несмотря на то, что ранее иодацетат считался специфическим реагентом на сульфгидриль-ную группу, в настоящее время известно, что, за исключением случая проведения реакции в мягких условиях [73а], его действие не ограничивается группами —SH [736]. Как сама иодуксусная кислота, так и ее амид могут в щелочной среде вступать в реакцию с амино-, фенольными и индольными группами в рекомендуемых авторами условиях эти реагенты, однако, можно применять для количественного определения —SH-rpynn белка путем сравнения содержания цистеина в гидролизатах исходного и алки-лированного белков. Помимо своей неспецифичности указанные реагенты характеризуются еще и тем, что они соединяются (необратимо) лишь с одной группой —SH. [c.294]

Прежде чем приступить к использованию этих общих приемов, важно провести модификацию остатков цистина и цистеина в белке, поскольку эти остатки очень реакционноспособны по отношению к некоторым применяемым в структурном анализе реагентам они подвержены взаимному дисульфидному обмену и плохо поддаются количественному анализу. Такая модификация легко осуществляется нес1солькими методами, включая восстановление меркап-тоэтанолом и затем реакцию с иодацетатом с образованием S-кар- [c.178]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология