Этилмалеимид

Vogt et ai. (1970) считают, что литическая активность МАП не зависит от их детергентных свойств, т. к. при восстановлении—S—S—связей лнтическая активность снижалась без изменения поверхностно-активных свойств. Кроме того, синтетические SH-реагенты—такие, как р-хлормеркуриобеизоат и а-этилмалеимид, лишенные детергентных свойств, имитируют действие ПЛФ при их комбинации с фосфолипазой А. [c.78]

Реакция синтеза (или гидролиза) АТФ в митохондриях осушест-вляется при участии трех ферментных систем собственно АТФ-синтетазного комплекса, транслоказы адениннуклеотидов и переносчика неорганического фосфата. Последний катализирует реакцию электро-нейтрального переноса неорганического фосфата в митохондрии и из них. Активность переносчика ингибируется SH-модификаторами, такими как N-этилмалеимид и п-хлормеркурибензоат. Следствием этого является ингибирование SH-реагентами реакций окислительного фосфорилирования и гидролиза АТФ, катализируемых митохондриями. [c.459]

N-этилмалеимид — 10 мМ раствор (готовят в день опыта). [c.460]

К 200 мкл густой суспензии митохондрий ( 50 мг/мл), стоящей на льду, добавляют N-этилмалеимид до конечной концентрации 0,5 мМ и инкубируют 30 мин. Измеряют АТФазную активность в суспензии, как описано выще. Наблюдают инактивацию ферментативной реакции, измеренной в присутствии динитрофенола, вызванную модификацией фосфатного переносчика. Добавление по ходу реакции тритона Х-100 в оптимальной концентрации, определенной ранее, приводит к снятию барьера проницаемости для фосфата и восстановлению активности. [c.460]

Из неферментативных методов здесь стоит упомянуть только метод мечения сульфгидрильных групп. Ионный 8Н-реагент /г-хлоромеркурибензоат не проникает через мембрану и поэтому реагирует с белком только на той поверхности бислоя, со стороны которой он действует. Другие, менее полярные реагенты, такие, как Ы-этилмалеимид, реагируют с 5Н-группами как на поверхности, так и в глубине мембраны. [c.78]

Концентрационная зависимость вытеснения стрихнина из его связывающего центра глицином имеет сигмоидальный характер, что предполагает модель двух состояний для глицинового рецептора, подобную той, которая принята для других ранее описанных рецепторов. Коэффициент Хилла для вытеснения стрихнина глицином равен 1,7. Глицин и стрихнин, видимо, не конкурируют, а действуют кооперативно, взаимодействуя с дву1мя разными участками рецептора. Взаимодействие между агонистом и антагонистом снимается N-этилмалеимидам (NEM). Полагают, что стрихнин связывается с С1 -каналом. В растворе глициновый рецептор может быть стабилизирован фосфолипидами, его коэффициент седиментации в детергенте составляет 8,3. GABA имеет низкое сродство к глициновому рецептору. [c.295]

Свидетельство в пользу того, что скорее образуется комплекс одоранта с белками, чем с каротиноидами, получено при использовании специфического реагента М-этилмалеимида [c.209]

Поэтому скорость реакции повышается при добавлении меркаптанов и уменьшается при добавлении соединений, которые блокируют меркаптогруппы (например, N-этилмалеимида или -хлормеркурбензоата) [1887]. В кислых средах первой стадией процесса является протонирование дисульфидной связи и обра- [c.306]

Затруднение первого типа связано с тем, что реакционноспособность группировки в глобулярном белке зависит от ее химического окружения, так что она может быть замаскирована в отношении потенциального инактивирующего реагента, хотя и доступна действию с5уб-страта или какого-либо другого реагента. Таким образом, неспособность реагента инактивировать фермент может служить основанием для тех или иных выводов лишь в том случае, если показано, что сама реакция с ферментом произошла. Трудности второго типа возникают вследствие повышения реакционноспособности некоторых группировок, которые в результате начинают взаимодействовать с данным реагентом, хотя в нормальном случае они с ним не взаимодействуют. В качестве примера можно привести недавнюю работу Такахаси и др. [9], показавшую, что карбоксильная группа рибонуклеазы Т] реагирует с иодацетатом, который известен как реагент на более сильные нуклеофильные группы типа сульфгидрильной или имидазольной. Можно сослаться также на другую работу [10], в которой показано, что Ы-этилмалеимид может реагировать с е-аминогруп-пой лизина, а не с сульфгидрильной группой, в отношении которой он, как принято считать, специфичен. [c.220]

Всегда, когда это возможно, необходимо попытаться восстановить активность фермента с помощью какого-либо подходящего специфического воздействия. Это единственный эффективный метод контроля, позволяющий исключить вероятность того, что утрата активности обусловлена общей денатурацией фермента. Так, ацетилирование гидроксильной группы, тирозина ацетил-имидазолом следует предпочесть иодированию бензольного кольца тирозина, поскольку замещающая ацетильная группа может быть отщеплена с помощью. реакции спонтанного гидролиза при слабощелочном значении pH. Аналогично инактивация фермента путем образования смешанного дисульфида при реакции с тиоловым соединением служит более подходящим способом доказательства участия 5Н-групп в катализе, чем реакция алкилирования сульфгидрильных групп иодацетатом или Ы-этилмалеимидом. Использование первого метода позволяет реактивировать фермент с помощью простой реакции восстановления, тогда как необратимая потеря активности в последнем случае может быть следствием либо специфического алкилирования ЗН-групп, либо вторичных конформационных изменений. Разумеется, оба типа экспериментов дополняют друг друга. [c.222]

После фотоокисления цистеина в присутствии метиленового синего отбирают пробы и спектрофотометрически титруют Ы-этилмалеимидом. Рассчитайте из приведенных ниже данных время полупревращения цистеина в этой реакции. Начальная концентрация цистеина 0,01 М. [c.373]

С-Ы-этилмалеимид. Ниже приведены химические реакции, протекающие в присутствии этих агентов [c.480]

Идентификация с хроматомасс-спектрометра ГХ метилвинилмалеимида и формил-этилмалеимида, полученных при окислении гема и хлорофиллов "а" и "в". [c.247]

Другая возможность местоположения рентгеновской мутации в бактериях постулирована Bridges [б]. В своей работе он использовал штамм Е. соИ, требующий для роста триптофан, и исследовал влияние кислорода и Л/ -этилмалеимида (НЭМ) — вещества, которое, по данным его работы [11], увеличивает летальный эффект радиации. [c.151]

НЭМ (Л —этилмалеимид). Это вещество оказывает сенсибилизирующее действие в комбинации с сульфгидрильными соединениями. [c.319]

Почему аноксия в отсутствие сульфгидрильных соединений не оказывает защитного действия на свободный фаг7 Ответ, данный Howard-Flanders и др. [з], заключается в том, что сульфгидрильные соединения обычно присутствуют внутри бактериальных клеток, но их нет в суспензии свободного фага. Графическое изображение результатов экспериментов этих авторов приведено на рис. 3. Добавление меркаптоэтанола к суспензии свободного фага делает результаты облучения сходными с теми, которые наблюдаются при облучении фага внутри бактерий. Предварительная инкубация зараженных фагом бактерий N-этилмалеимидом частично истощала сульфгидрильные соединения в клетках. Схема инактивации ДНК приведена в табл. 9. [c.325]

Г — 5Н — в присутствии меркаптоэтанола НЭМ — после предварительной инкубации бактерий с Ы-этилмалеимидом. [c.326]

В последних работах установлено, что использование цистеами-на, N-этилмалеимида и цистеина при облучении приводит не только к снижению повреждающего эффекта радиаций на соматические ткани, но и к увеличению в данном случае выхода мутаций у таких растений, как рис и ячмень. [c.107]

Гидролиз АТФ — сложная реакция, она состоит из различных этапов, в которых фермент претерпевает переход из одной формы в другую во время фосфорилирования и дефосфорилирования, образуя фосфорилированные интермедиаты с различными свойствами. В реакции необходимо участие ионов Mg, Ма и К. N3, К-АТФаза специфически ингибируется сердечными гликозидами и в первую очередь уабаином (строфантином С). Ингибиторами являются также сульфгидрильные реагенты М-этилмалеимид, динитробен-зойная кислота, тимерозал, а также олигомицин и ванадат. [c.10]

Рис. 13.16. Транспортные системы митохондриальной мембраны. 1—переносчик фосфата, 2—симпорт пирувата, 3 — переносчик дикарбоксилатов, 4—переносчик трикар-боксилатов, 5—переносчик а-кетоглутарата, 6— переносчик адениновых нуклеотидов. Н-Этилмалеимид, гидроксициннамат и атрактилозид ингибируют ( ) указанные системы. Имеются также (на рисунке не показаны) системы переноса аспартата и глутамата (см. рис. 13.15), глутамина, орнитина, карнитина (см. рис. 23.1)

М-сторона Сторона внутренней мембраны митохондрий, контактирующая с матриксом N-ЭМ N-этилмалеимид [c.180]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология