Инокуляция в ферментер

Обычно ход глубинного периодического культивирования выглядит следующим образом. На начальной стадии культивирования сразу после инокуляции продуцент адаптируется к новым условиям. В этот период биомасса почти не образуется и источник углерода (суспензия целлюлозы или измельченного подходящего целлюлозосодержащего материала, например, свекловичного жома) почти не расходуется. Затем наступает логарифмическая, или экспоненциальная, фаза роста культуры, когда количество биомассы в ферментере растет по экспоненциальному закону, а содержание источника углерода быстро снижается. После этого образование биомассы замедляется и культура переходит в стационарную фазу, когда число вновь возникающих клеток равно числу отмирающих. Наконец, последняя фаза - отмирание, когда происходит автолиз клеток под действием собственных ферментов и количество биомассы снижается. [c.110]

Материал из инокуляционного резервуара через 20—23 часа ферментации при аэрировании (0,5 объема воздуха в минуту) и при 200 оборотах качалки в минуту используется для инокуляции среды в больших ферментерах, обычно на 3000—30 000 л среды, из расчета 1 л инокулюма на 10 л среды. [c.207]

Посевной материал выращивают из спор гриба. Для инокуляции ферментера обьемом 50 ООО дм требуется 3—5 тонн мицелия. Поскольку пенициллин необходим в огромных количествах, для его производства построен ферментер объемом до 200 ООО дм . Ежедневно потребляется около 500 кг глюкозы. Выход пенициллина сильно зависит от температуры, которая может подниматься до 2 °С в час, поэтому нужно внимательно следить за этим фактором. Необходимо также контролировать значение pH и поддерживать его между 6,5 и 7,0. Процесс продолжается примерно 15 сут. [c.70]

Если для проведения процесса ферментации культуру пересевают в жидкую среду, то инокулят может состоять из вегетативных (растущих) клеток или спор (остаточные клетки, в какой-то степени аналогичные посевному материалу). Вегетативные клетки обычно, как уже описывалось выше, соскребают с помощью петли со среды в культуральной пробирке в стерильную жидкую среду, помещенную в соответствующим образом закрытую культуральную колбу. По другому способу в культуральную пробирку наливают стерилизованную воду, полученную взвесь перемешивают стерильной петлей, а затем стерильной пипеткой или простой декантацией получившуюся жидкость пересевают в приемиик или ферментер. При этом, естественно, все операции должны быть проведены с соблюдением полной асептики, включая и обработку пламенем горлышек всех сосудов. Пересев в виде взвеси в жидкости обычно используют в случае микроорганизмов, легко дающих обильное спорообразование, поскольку споры могут быть легко пересеяны и без применения петли, причем их можно достаточно быстро с помощью пипетки иноку-лировать сразу в нескольких колбах. В большинстве случаев ферментация протекает лучше (и с минимальным риском загрязнения) при обильной инокуляции, т. е. при условии внесения в новую колбу или ферментер сразу большого числа необходимых для роста клеток. Для осуществления такого рода обильной инокуляции необходимо накопить достаточно большое количество организма это требует неоднократной инокуляции, поэтому обычно необходимо иметь хорошо растущие клетки свежей культуры в количестве до 5—10% от ферментационного объема. [c.217]

Ферментеры, или биореакторы, представляют собой камеры, в которых в жидкой или на твердой среде выращивают микроорганизмы. Процесс, происходящий в ферментере, называется ферментацией. Термин ферментация первоначально применялся только к анаэробным процессам, однако сейчас он используется более щироко и включает все процессы, как аэробные, так и анаэробные. На рис. 12.16 изображен типичный ферментер. Это довольно сложное техническое сооружение, поэтому необходимо потратить некоторое время для изучения его устройства. Не забывайте также о проблемах, возникающих при расщирении масштабов производства, которые бьши перечислены в предыдущем разделе. Содержимое ферментеров во время работы, как правило, тем или иным способом перемещивается. Например, при производстве белка одноклеточных прутина компанией I I перемещивание достигается с помощью воздуха, подаваемого с высокой скоростью со дна сосуда. Продуктом являются либо сами клетки (биомасса), либо какой-то полезный клеточный метаболит. Все операции должны проводиться в стерильных условиях, чтобы избежать загрязнения культуры. Кроме того, необходимо обеспечить возможность поддержания в стерильном состоянии всех вводных и выводных отверстий ферментера. Ферментер и среду стерилизуют перед использованием вместе или раздельно. Исходные культуры организма, который должен использоваться в процессе ферментации, хранят в неактивной форме (например, в замороженном состоянии). Пробу активируют, наращивают в достаточном объеме с использованием асептических методов (наращивание) и затем добавляют в ферментер (инокуляция). В ферментере организм растет и размножается, используя питательную среду. [c.66]

Для производства нитрагина заготавливают хорошо окультуренную почву с большим содержанием органического вещества и pH не ниже 6,0, к которой добавляют до 30% песка и мел (доведение pH до 6,6— 7,0). Почву увлажняют до 35—45% от полной влагоемкости, расфасовывают по 400—500 г. в поллитровые молочные бутылки и стерилизуют в течение 2 час. при 2 атм. На заводах бактериальных препаратов вы-ращиваяие бактерий проводят глубинным методом в ферментерах в 100—1000 л жидких сред с растительными экстрактами и мелассой. Через 12—24 часа культуру можно использовать для инокуляции почвы. [c.205]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология