Культуры клеток высших организмов

Микроскопы и использование эффективных методов микроскопии определяют основы микробиологии как одного из разделов биологической науки. Бактериология, в частности описательная, вобрала все достигнутое в области совершенствования микроскопических методов как простых, так и сложных, потому что вездесущие прокариотические организмы, с которыми она имеет дело, представляют собой действительно маленькие клетки. В настоящее время, когда клеточные компоненты можно изучать на уровне макромолекул и отдельных функциональных элементов, а некоторые процессы, происходящие в клетке, могут быть исследованы в клеточных фракциях, значительно возросли роль и частота применения методов анализа с высоким разрешением, в частности электронной микроскопии. Однако микроскопия, на каком бы уровне она ни осуществлялась, естественно, не исчерпывает всех возможностей исследования бактерий (или их компонентов) в природных местообитаниях или лабораторных культурах. [c.14]

Наивысшие концентрации хлорофилла (1,7% от сырого веса ж 5% от сухого) были найдены у одноЕлеточной зеленой водоросли СЫогеИа, особенно в культурах, выраш,енных на слабом свету. Это-является результатом отсутствия разведения бесцветными клетками и структурами, что неизбежно для многоклеточных организмов. Следует указать, что концентрация хлорофилла в отдельных палисадных клетках зеленых листьев может быть так же высока, как у hlorella. [c.414]

При определении влияния температуры на прокариотные организмы следует различать два момента способность организмов к выживанию после длительного нахождения в экстремальных температурных условиях и способность их к росту в этих условиях. Приспособления, сформированные у прокариот для перенесения неблагоприятных условий, в том числе и температурных, — это споры, цисты. Характеристика их устойчивости к высоким температурам приведена в табл. 8. Устойчивость вегетативных клеток и различных покоящихся форм больше в условиях воздействия низкими температурами. Так, вегетативные клетки и покоящиеся формы сохраняли жизнеспособность после длительного выдерживания при температуре, близкой к абсолютному нулю. Последнее используется в качестве одного из способов, обеспечивающих длительное хранение культур прокариот. [c.132]

Ферментеры, или биореакторы, представляют собой камеры, в которых в жидкой или на твердой среде выращивают микроорганизмы. Процесс, происходящий в ферментере, называется ферментацией. Термин ферментация первоначально применялся только к анаэробным процессам, однако сейчас он используется более щироко и включает все процессы, как аэробные, так и анаэробные. На рис. 12.16 изображен типичный ферментер. Это довольно сложное техническое сооружение, поэтому необходимо потратить некоторое время для изучения его устройства. Не забывайте также о проблемах, возникающих при расщирении масштабов производства, которые бьши перечислены в предыдущем разделе. Содержимое ферментеров во время работы, как правило, тем или иным способом перемещивается. Например, при производстве белка одноклеточных прутина компанией I I перемещивание достигается с помощью воздуха, подаваемого с высокой скоростью со дна сосуда. Продуктом являются либо сами клетки (биомасса), либо какой-то полезный клеточный метаболит. Все операции должны проводиться в стерильных условиях, чтобы избежать загрязнения культуры. Кроме того, необходимо обеспечить возможность поддержания в стерильном состоянии всех вводных и выводных отверстий ферментера. Ферментер и среду стерилизуют перед использованием вместе или раздельно. Исходные культуры организма, который должен использоваться в процессе ферментации, хранят в неактивной форме (например, в замороженном состоянии). Пробу активируют, наращивают в достаточном объеме с использованием асептических методов (наращивание) и затем добавляют в ферментер (инокуляция). В ферментере организм растет и размножается, используя питательную среду. [c.66]

Обычно популяции клеток культивируют в жидкой среде. Питательный бульон готовят, растворяя необходимые питательные вещества в воде, доводят pH среды до нужного значения, и стерилизуют среду в автоклаве паром высокого давления. В зависимости от объемов используемой среды применяют самые различные емкости — от пробирок с ватными пробками до колб, бутылей разного размера и громадных чанов на десятки тысяч литров (используемых в пивоварении и фармакологической промышленности). В питательную среду вносят небольшое число клеток и инкубируют при постоянной температуре. Если для организмов необходим кислород (а он необходим почти всегда), то культуру инкубируют на механической качалке или через нее пропускают стерильный воздух. Клетки выращивают также на поверхности агара изолированными колониями или, если они посеяны достаточно густо, единым слоем. [c.87]

По наблюдениям Ц. И. Роговской [12], Protozoa, пропуская через свой организм миллионы бактерий, являются активным фактором микробной изменчивости это подтверждается также и другими данными [13]. Клетки Ps. fluores ens адаптируются в смешанной культуре к высоким концентрациям фенолов, тогда как в чистой культуре подобное явление не отмечалось [15]. [c.192]

Одним из преимушеств метода НВЧ является возможность его использования в отсутствие способа культивирования бактерий на твердой среде. Второе преимущество заключается в том, что он удобен в случае высокой вариабельности кинетики роста. Предположим, что некоторые клетки из смешанной культуры растут быстро, образуя на агаре крупные колонии, которые, распространяясь по поверхности, маскируют появляющиеся позже мелкие колонии интересующего нас микроорганизма. Хотя количество таких мелких колоний может быть больше, их невозможно учесть на чашках из-за присутствия колоний более подвижных или быстрее растущих бактерий. Третье преимущество метода НВЧ состоит в том, что в присутствии не представляющих интереса организмов и в отсутствие подходящего метода селекции его можно использовать для выявления легко обнаруживаемых продуктов (например, пигментов или антибиотиков), продуцируемых изучаемыми микроорганизмами. В этом случае, несмотря на более выраженный рост контаминирующих микроорганизмов, количество исследуемых батерий определяют по числу пробирок, где образование характерных продуктов отсутствует. И наконец, метод НВЧ используют в случае, если агар или другие отвердители содержат некоторые факторы (например, тяжелые металлы), которые изменяют достоверность подсчета или взаимодействуют с изучаемыми бактериями. [c.467]

Предположим, изучают ДНК такого размера, как ДНК Е. oli (мол. масса 2 10 ). Ее контур четко определит тысяча точек распада, равномерно распределенных по длине молекулы. Если используют время полураспада которого равно 14 дням, и если экспозиция длится 14 дней, то в молекулу ДНК должно быть включено 2000 атомов Это соответствует удельной радиоактивности 2,5 Ки (ммоль Р) (1 Ки = 2,2 10 расп./мии). Это достаточно высокая плотность излучения. Для приготовления образца культуру Е. соИ выращивают в феде с При этом возникает опасность радиационных нарушений не только в растущей клетке, но и в самой ДНК, в которой могут появиться разрывы. Радиоавтография молекул высших организмов еще более затруднена из-за большей чувствительности к радиации. [c.185]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология