Ферменты глубинный метод культивирования

В последние 15 лет для выращивания продуцентов ферментов чаще используют более экономный — глубинный метод культивирования (рис. 4.1). В промышленных условиях для этих целей применяют ферментеры из нержавеющей стали, снабженные приспособлениями для перемешивания и подачи в жидкую питательную среду стерильного воздуха. Сначала ферментер заполняют питательной средой, автоклавируют, а затем засевают чистой культурой, подаваемой из специального генератора. Для предотвращения инфекции в ферментере поддерживают повышенное давле- [c.76]

В микробиологической промышленности широко применяются глубинные методы культивирования микроорганизмов. Независимо от того, содержится целевой продукт в клеточной массе или в нативном растворе, стадия отделения биомассы от культуральной жидкости в большинстве случаев является обязательной. Характерная особенность культуральных жидкостей, поступающих на переработку, - невысокое (от 0,1 до 10 %) содержание целевого продукта - клеток, ферментов, антибиотиков. Таким образом, технология выделения продуктов микробного синтеза связана с переработкой больших объемов культуральных жидкостей. [c.3]

Глубинный метод культивирования продуцентов ферментов [c.110]

Культуральную жидкость (после глубинного метода) или экстракт (после поверхностного культивирования) концентрируют в вакуум-выпарных установках (при этом может происходить инактивация ферментов). Концентрирование растворов ферментов осуществляют также с помощью ультрафильтрации (на полых волокнах или на мембранных фильтрах), что существенно уменьшает потери по сравнению с выпарными методами. Из водных растворов ферменты осаждаются с помощью органических растворителей или солей. Сухие ферментные препараты получают в результате распылительного высушивания (что также сопровождается инактивацией). [c.111]

Биотехнологии присущи свои специфические методы — это крупномасштабное глубинное культивирование биообъектов в периодическом, полунепрерывном или непрерывном режиме, выращивание клеток растительных и животных тканей в особых условиях Биотехнологические методы культивирования биообъектов выполняются в специальном оборудовании, например, в ферментаторах выращивают бактерии и грибы при получении антибиотиков, ферментов, органических кислот, некоторых витаминов (рис 6), [c.41]

В России в микробиологической промышленности используют два метода культивирования микроорганизмов — поверхностный (твердофазный) и глубинный. Поверхностный метцд культивирования продуцентов ферментов имеет некоторые преимущества перед глубинным активность ферментов, как правило, на порядок вьш1е, чем при глубинном методе культивирования одного и того же штамма микроорганизма, для выращивания продуцентов при твердофазном методе в большинстве случаев используются недорогие, недефицитные питательные среды, компоненты которых являются отходами пищевой и микробиологической промышленности, а также сельского хозяйства [3]. [c.107]

После экстрагирования ферментов из культур плесневых грибов, выращенных поверхностным способом, или после культивирования микроорганизмов глубинным методом раствор ферментов или культуральную жидкость предварительно подвергают очистке. [c.59]

Скорость роста грибов зависит от условий выращивания и от применяемого метода. При выращивании в виде поверхностной пленки на жидкой среде развитие мицелия заканчивается за 5—7 суток к этому же времени отмечается и обильное образование конидий на поверхности пленки. На увлажненных твердых естественных средах рост грибов заканчивается быстрее и обычно к 30—36 часам от момента посева достигается максимальная ферментативная активность, а к концу третьих суток культура начинает обильно плодоносить. При засеве конидиями жидкой питательной среды полное развитие гриба и максимальное образование ферментов в глубинных условиях культивирования достигается обычно за 3 суток. [c.138]

Концентрация фермента в среде при глубинном культивировании обычно значительно ниже, чем в водных экстрактах поверхностной культуры. Фильтраты культуральных жидкостей содержат не более 3% сухих веществ. Это вызывает необходимость предварительного концентрирования фильтратов перед тем, как выделять ферменты любым методом. [c.111]

Для получения ферментных препаратов используют как микроскопические грибы, так и бактерии и дрожжи. Иногда получение технического ферментного препарата кончается проведением процесса ферментации, например в спиртовой промышленности для осахаривания крахмала используют жидкую культуру Aspergillus niger, выращенную глубинным методом культивирования на спиртовой барде с добавками крахмала (1%) и различных солей. Впоследствии ее добавляют в жидком виде в количестве 10—127о к осахариваемому затору. Однако активность ферментов в культуральной жидкости быстро снижается. Поэтому широко практикуют получение сухих технических ферментных препаратов. [c.193]

Таким образом, как и при глубинном методе, изменяя состав среды, учитывая физиологические особенности продуцента и индуцибельность синтезируемых им ферментов, удается в известных пределах управлять процессом культивирования. [c.120]

Проблема обеспечения культур микроорганизмов кислородом воздуха при глубинном выращивании биомассы приобрела особое значение с 40-х годов. С ее решением связана практическая необходимость получения в промышленном масштабе микробной биомассы, антибиотиков и ферментов. Отъемно-доливной метод культивирования, примененный к дрожжам, лишь частично решил эту проблему путем регулирования потребности культуры в кислороде за счет отбора биомассы и долива свежей среды. Разработанный в СССР на базе установки типа АНКУМ метод продленной периодической культуры дрожжей с дискретной аьтоматической добавкой элементов питания по мере кх потребления, названный квази-непрерывным, совмещающий в себе особенности периодического и хемостатного культивирования (Работнова, [c.38]

Для всестороннего изучения морфолого-физиологических свойств и продуктов обмена, прежде всего, микробов все ранее предложенные способы их выращивания оказались малопригодными Более того, накопление однородной по возрасту большой массы клеток оставалось исключительно трудоемким процессом Вот почему требовался принципиально иной подход для решения многих задач в области биотехнологии В 1933 году А. Клюйвер и Л X Ц Перкин опубликовали работу "Методы изучения обмена веществ у плесневых грибов", в которой изложили основные технические приемы, а также подходы к оценке и интерпретации получаемых результатов при глубинном культивировании грибов С этого времени начинается третий период в развитии биологической технологии — биотехнический Началось внедрение в биотехнологию крупномасштабного герметизированного оборудования, обеспечившего проведение процессов в стерильных условиях Особенно мощный толчок в развитии промышленного биотехнологического оборудования был отмечен в период становления и развития производства антибиотиков (время второй мировой войны 1939 — 1945 гг, когда возникла острая необходимость в противомикробных препаратах для лечения больных с инфицированными ранами) Все прогрессивное в области биологических и технических дисциплин, достигнутое к тому времени, нашло свое отражение в биотехнологии Следует отметить, что уже в 1869 г Ф Мишер получил "нуклеин (ДНК) из гнойных телец (лейкоцитов), В Оствальд в 1893 г установил каталитическую функцию ферментов, Т Леб в 1897 г установил способность к выживанию вне организма (в пробирках с плазмой или сывороткой крови) клеток крови и соединительной ткани, Г Хаберланд в 1902 г показал возможность культивирования клеток различных тканей растений в простых питательных растворах, Ц Нейберг В 1912 г раскрыл механизм процессов брожения, Л Михаэлис и М Л Ментен в 1913 г разработали кинетику ферментативных реакций, а А Каррел усовершенствовал способ выращивания клеток тканей животных и человека и впервые применил экстракт эмбрионов для ускорения их роста, Г А Надсон и Г С Филлипов в 1925 г доказали мутагенное действие рентгеновских лучей на дрожжи, а в 1937 г Г Кребс открыл цикл трикарбоновых кислот (ЦТК), в 1960 [c.16]

Культура микроорганизмов, выращенная поверхностным методом, и культуральная жидкость после глубинного культивирования содержат большое количество балластных веществ биомассу продуцента, непотребленные компоненты среды, продукты метаболизма. Доля собственно ферментов — активных белков — составляет около 1% для поверхностных и не более 0,1% — для глубинных культур. [c.125]