Нуклеотидаза змеиного яда

В настоящее время для определения структуры нуклеотидов пользуются предпочтительно ферментами, избирательно гидролизующими 2 -, 3 - и 5 -фосфаты нуклеозидов. Так, 5 -нуклеотидаза змеиного яда обладает способностью гидролизовать исключительно 5 -фосфаты, не затрагивая 2 - и З -фосфаты 2 . Ферментативными методами возможно также различить 2 - и З -фосфаты. [c.365]

Вторая стадия. После охлаждения до 25—30°С в инкубационную среду добавляют 0,2 мг/мл змеиного яда, тщательно перемешивают и помещают в термостат при 29° С на 10 мин. 5 -нуклеотидаза, содержащаяся в яде змеи, катализирует реакцию, определенную уравнением (7). За указанное время гидролиз АМФ до аденозина проходит практически полностью. [c.381]

Ферментативные методы. В настоящее время известны ферменты, для которых достаточно четко различается скорость гидролиза 2 - или З -фосфатов от скорости гидролиза 5 -фосфатов. Успехи современной знзимологии позволяют подобрать высокоспецифические рибонуклеазы, избирательно расщепляющие либо только 5 -фосфаты, либо 2 - и З -фосфаты. Наиболее часто в аналитических целях используется высокоспецифическая 5 -нуклеотидаза змеиного яда, расщепляющая только 5 -фосфатную связь. Применение этого фермента позволяет чрезвычайно просто решить вопрос о месте фосфорного остатка если нуклеотид расщепляется нуклеотидазой змеиного яда, то он может Г,ыть только 5 -фосфатом если, напротив, он остается неизменным в этих условиях, то он является 2 - или З -фосфатом. Ферментативными методами возможно также определить различие между 2 - и З -фосфатной связью. [c.219]

Второй компонент козимазы — трифосфопиридиннуклеотид (ТПН) чрезвычайно близок по структуре к ДПН. Кислый и щелочной гидролиз. ТПН дает результаты, указывающие на то, что структура этого соединения соответствует ДПН, в молекуле которого находится один дополнительный остаток фосфорной кислоты. Для определения положения этого остатка ТПН подвергался ферментативному гидролизу, который привел к образованию дифосфата аденозина, не являющегося АДФ. Гидролиз этого дифосфата в присутствии нуклеотидазы змеиного яда дает аденозин-2-фосфат. Отсюда следует, что дополнительная фосфатная группа ТПН находится у С(2>—рибозного остатка аденозина и строение ТПН выражается формулой ( XVII). [c.236]

Ферментативное дес )осфорилирование нуклеотидов может быть осуществлено как неспецифическими моноэстеразами (например, выделенными из предстательной железы), так и моноэстеразами, специфичными для определенным образом расположенных фосфатных групп (например, 5 -нуклеотидаза змеиного яда). Специфичность может быть й более выраженной дезоксинуклеозид-З -фос- [c.175]

Из Diplo o us pneumoniae (тип И, штамм R 19) выделен уридин-дифосфодиоксиацетон. Кислотный гидролиз последнего дает ури-дин-5 -фосфат при обработке пирофосфатазой змеиного яда (содержащей 5 -нуклеотидазу) получаются уридин, неорганический фосфат и фосфат диоксиацетона [149]. [c.204]

Наконец, следует упомянуть о 5 -нуклеотидазе из змеиного яда. Этот фермент теперь доступен в довольно чистом виде [23] он весьма специфичен и действует только на 5 -мононуклеотиды. Его успешно используюг для идентификации 3 - и 5 -мононуклеотидов и количественного определения 5 -мононуклеотидов в смеси гетерогенных нуклеотидов. [c.14]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология