Иммобилизованные лиганды антитела

Моделью для многих приборов на основе описанных в этой главе реакций может служить рассматриваемое ниже устройство, в котором используется оптическое волокно диаметром 3,3 мм [12] (см. также тл. 30). В этом приборе, измеряющем концентрацию пероксида водорода в буферном растворе, пероксидазу иммобилизуют в прозрачном полиакриламидном геле и вводят люминол как в гель, так и в раствор. С помощью фотоумножителя, помещенного на другом конце волокна длиной 61 см, можно детектировать концентрации до 10 М. Указывается, что в отличие от других ферментных электродов нет необходимости в том, чтобы продукт ферментативной реакции диффундировал к поверхности электрода. Таким образом, время отклика прибора очень мало-около 4 с. При этом, однако, возникает проблема, связанная с тем, что сигнал лимитируется массопереносом. Использование световода простой формы позволяет сделать конструкцию приборов удобной и работоспособной [4]. Так что эта идея заслуживает внимания. При реализации такого подхода основные проблемы, вероятно, связаны с иммобилизацией фермента. В случае иммуносенсоров, конечно, возникают трудности, обуславливаемые крайне низкой скоростью установления равновесия при связывании лиганда с антителом. Тем не менее благодаря высокой чувствительности детектирования света и независимости от процессов на электроде дальнейшие исследования в этой области представляются перспективными. [c.500]

Большой интерес представляет тот факт, что значительная часть сывороточных / -белков способна формировать комплексы с сывороточными у-глобулинами. Комплекс формируется за счет нековалентных взаимодействий, и для отделения / -белка достаточно обработать препараты таким детергентом, как дезоксихо-лат натрия (А. Я. Кульберг, И. А. Елистратова, 1985). Изолированный в указанных условиях / -белок сохраняет свои лиганд-связывающие свойства. В качестве иммуноглобулинов, связывающих / -белки, выступают IgG и IgA (А. Я. Кульберг с соавт., 1986) Для того чтобы оценить общее количество комплекса / -белок — иммуноглобулины в различных препаратах иммуноглобулинов (включая коммерческие), был использован следующий методический прием. Поскольку в отличие от / -белков собственно иммуноглобулины имеют вариотипические детерминанты в скрытой форме, антитела к этим детерминантам были иммобилизованы на сефарозе, и через колонки с таким иммуносорбентом пропускали препараты иммуногл булинов. Последние в комплексе с / -белками связывались иммуносорбентом за счет / -белков, а иммуноглобулины, не содержащие / -белка, прохо дили через колонку с иммуносорбентом. Таким способом удалось уста овить, что комплекс иммуноглобулинов с / -белками составляет в средь ем около 5 от общего количества иммуноглобулинов. [c.84]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология