Продукты ферментативных реакций

Скорость ферментативной реакции, которая определяется количеством субстрата, прореагировавшего в единицу времени, находится в зависимости от количества субстрата, количества фермента и ряда других факторов (температуры, [Н+], присутствия продуктов ферментативной реакции, активаторов и ингибиторов, степени чистоты ферментного препарата). При малых количествах субстрата скорость ферментативной реакции возрастает пропорционально количеству субстрата при избыточных количествах субстрата — постепенно падает. При оптимальных или избыточных количествах субстрата скорость ферментативной реакции обычно прямо пропорциональна количеству фермента, таким образом скорость реакции возрастает вдвое при увеличе- [c.39]

При определенных условиях расщепления рибонуклеиновых кислот образуются циклические фосфаты, представляющие собой д -эфиры ортофосфорной кислоты с 2 - и З -гидроксильными группами рибозы. Они называются нуклеозид-2, З -циклофосфатами и обозначаются N > р (например, адеиозин-2, З -циклофосфат, или А> р). Циклофосфаты типа (а) N(1 , 5 ) > р не образуются при расщеплении нуклеиновых кислот. Некоторые из иих, иапример аденозин-3 , 5 -циклофосфат (см. с. 240), являются продуктами ферментативных реакций, протекающих в клетке, и играют важную биологическую роль. [c.301]

Использование ферментного электрода не ограничивается определением продуктов ферментативной реакции. В принципе возможно определение любого вещества, участвующего в этой реакции, в том числе и активности самого фермента, концентраций активаторов и ингибиторов и т.д. [c.58]

В том случае, когда в распоряжении экспериментатора имеется полная кинетическая кривая (рис. 101), более удобным представляется метод обработки, в котором вместо абсолютных значений параметров реакции (начальной концентрации субстрата, начального времени реакции, абсолютной концентрации продукта реакции и т. д.) используются относительные величины [23]. Это значительно повышает точность результатов эксперимента. Рассмотрим в качестве примера кинетическую кривую накопления продукта ферментативной реакции, удовлетворяющую уравнению (6.134). Откладываемая на оси ординат величина О может соответствовать различным характеристикам системы, которые удобны для прямого измерения (величина оптической плотности количество щелочи, идущей на титрование продукта реакции проводимость раствора и т. д.). В общем случае Р]о = (О — Од), где а. — коэффициент пересчета Од и О— значения, соответствующие началь- [c.248]

Кинетический анализ (6.143) приводит к следующей зависимости концентрации продукта ферментативной реакции от времени [c.252]

Для опред( ления константы ингибирования продуктом ферментативной реакции был предложен метод Фостера — Ниманна [25]. Согласно этому методу прямая, проведенная из начала координат [c.252]

Фермент, в свою очередь, оказывает значительное влияние на субстрат. Под влиянием фермента структура субстрата изменяется сначала образуется переходное состояние, а затем продукты ферментативной реакции. Оказалось, что для фермента каталитически выгодно комплементарное соответствие не основному, а переходному состоянию субстрата. Это также было доказано при помощи синтетических аналогов переходного состояния субстрата. Л. Полинг и Дж. Холдейн предложили концепцию деформации субстрата, связанную с его модификацией под действием фермента. Однако главным является то, что субстрат в переходном состоянии взаимодействует с ферментом многократно [c.69]

Кинетическая обработка схемы (8.8) приводит к зависимости концентрации продукта ферментативной реакции от времени [c.168]

Если продукт ферментативной реакции является конкурентным ингибитором [c.179]

Подставляя выражение для [ES] в уравнение (9.15) и интегрируя его в пределах (О, Р), (О, i). получаем уравнение, описывающее зависимость концентрации продукта ферментативной реакции от времени реакции [c.203]

В связи с этим основная ценность картирования активных центров заключается не в нахождении абсолютных значений показателей сродства Аг, гидролитических коэффициентов ко или инкрементов свободной энергии активации ферментативной реакции при переходе от сайта к сайту АСа, а, по-видимому, в практической демонстрации следующего положения количественный состав продуктов ферментативной реакции в любой момент времени в ходе гидролиза, а также зависимость скорости реакции от степени полимеризации субстрата могут определяться небольшим числом параметров активного центра (числом сайтов, положением каталитического участка) и эффективностью взаимодействия мономерных остатков субстрата с отдельными участками активного центра. [c.75]

Активность фосфофруктокиназы можно измерить двумя методами по скорости образования фруктозо-1,6-дифосфата (I) или АДФ (И). В обоих случаях количество продукта ферментативной реакции определяется по окислению НАДН. [c.239]

Конструктивно потенциометрические ферментные редокс-электроды весьма просты. Однако в системах, в которых в реакцию вступает большое количество субстрата, могут возникнуть проблемы, связанные с загрязнением поверхности электрода продуктами ферментативной реакции и отсутствием механизма регенерации фермента. Величина сигнала зависит также от способа предварительной обработки поверхности электрода. Вероятно, потребуются значительные усилия ученых и специалистов, прежде чем ферментные редокс-электроды можно будет рекомендовать для использования в практических целях. [c.217]

В оптических измерениях возможно использование пероксида вс орода или других продуктов ферментативных реакций таким же образом, как е злектро-химических сенсорах. [c.549]

Изложенное выше, по-видимому, применимо и к отщеплению продуктов ферментативной реакции из связи с активным центром и регенерации свободного фермента. Видимо, и в этом случае происходит последовательный разрыв связей, в ходе которого может освобождаться функциональная группа активного центра, способная к реакции с ингибитором (например, гидроксил серина). Другие группировки, оказывающие влияние на реакционноспособность этой группы, могут оказаться в момент реакции с ингибитором еще занятыми. Очевидно, что при этом фосфорорганический ингибитор будет реагировать с ферментом с иной скоростью, чем при полностью свободном активном центре. Такое явление особенно должно сказываться на кинетике ингибирования при концентрациях субстрата, значительно превышающих величину константы Михаэлиса, т. е. тогда, когда активные центры насыщены молекулами субстрата и для реакции с фосфорорганическим ингибитором доступны лишь те, которые освобождаются в ходе ферментативной реакции. При этом, естественно, скорость ингибирования фермента будет зависеть от соотношения констант скорости к+х (реакция с субстратом) и к1 (реакция с ингибитором). Это соотношение будет неизменным, если реакция идет с полностью свободным активным центром. Оно будет изменяться (при избытке субстрата), если ингибитор будет взаимодействовать с неполностью освобожденным активным центром. Если эти соображения выразить языком кинетики, то можно получить уравнение, вполне аналогичное уравнению (Х.8). Для этого достаточно считать, что с ингибитором реагирует не ацилированный фермент, а продукт его превращения, в котором гидроксил серина уже свободен, но фермент еще не принял исходного структурного состояния. Такое предположение в равной мере объясняет различие соотношения констант скорости ингибирования в отсутствие и в присутствии субстрата для разных по структуре ингибиторов. [c.231]

Известны химические соединения, которые задерживают действие ферментов, снижают их активность. Такие соединения получили название парализаторов. В больших количествах они останавливают действие ферментов, в небольших — действуют угнетающим образом. Если действие парализатора продолжительно, то активность фермента не восстанавливается. Известны следующие парализаторы ферментов соли тяжелых металлов — меди, свинца, ртути кислоты и соли синильной и пирофосфорной кислот, а также сернистый водород, фтористый натрий сильные окислители—хлор, бром, йод органические основания—анилин алкалоидные соединения продукты ферментативной реакции. Последние являются сильными парализаторами ферментов. Если удалить их из сферы реакции, то ферменты возобновляют свою деятельность. Но механизм действия парализаторов [c.521]

АВ + К, где К — катализатор (фермент), А + В — реагирующие вещества. Таким образом, каталитическое действие ферментов складывается из двух стадий. Во-первых, фермент соединяется с реагирующим веществом в силу определенного сродства между ними. Затем образовавшееся нестойкое промежуточное соединение при каталитическом действии фермента распадается с образованием конечных продуктов ферментативной реакции, причем катализатор непрерывно регенерируется, и количество его с течением времени не изменяется. Согласно представлениям П. В. Афанасьева вначале образуется неактивное промежуточное [c.522]

Установлено [3] также, что витамины в ряде случаев являются участниками ферментативных процессов или продуктами ферментативной реакции. [c.7]

В ходе ферментативного процесса субстраты претерпевают химические превращения с образованием конечных продуктов, которые освобождаются от связи с ферментом и выходят из сферы реакции. Число продуктов реакции, так же, как и число исходных субстратов, определяет кинетическую характеристику процесса. По числу образующихся продуктов ферментативные реакции, как правило, делятся на реакции с одним продуктом и двумя продуктами. Значительно реже встречаются процессы с образованием трех продуктов реакции или более. [c.35]

На основании изложенного нам представляется, что название фермент-субстратный комплекс (комплекс Михаэлиса) правильнее оставить за первичным продуктом, получающимся при взаимодействии фермента и субстрата. Образующиеся в ходе дальнейших этапов реакции вещества лучше называть промежуточными продуктами ферментативной реакции или продуктами превращения фермент-субстратного комплекса. [c.50]

В последнее время появились экспериментальные возможности выделения и изучения некоторых промежуточных продуктов ферментативных реакций, например ацильных производных ферментов гидролиза сложных эфиров (трипсин, химотрипсин и пр.) и некоторых других. Однако в области исследования фермент-субстратных комплексов кинетический метод пока, пожалуй, единственно реальный. [c.50]

В основе всякого количественного определения ферментативного действия или активности действия фермента лежат те изменения, которые происходят с субстратом соответствующей ферментативной реакции. Об этих изменениях и об их скорости можно судить либо по исчезновению исходных веществ, подвергающихся ферментативному воздействию, либо по образовани и накоплению продуктов ферментативной реакции. [c.67]

При таком механизме процесса ингибирующее влияние продуктов реакции может рассматриваться как частный случай действия конкурентных обратимых ингибиторов. Следовательно, и количественная оценка ингибирующего действия продуктов реакции может быть дана на основе измерения константы диссоциации комплекса продукт — фермент (ее можно, по аналогии с константой ингибитора назвать константой продукта). Не исключено, однако, что продукт ферментативной реакции имеет возможность взаимодействовать, помимо того, с функциональными группами вне активного центра и, таким образом, влиять на активность фермента по принципу неконкурентного ингибитора. [c.99]

После образования комплекса Михаэлиса (Е5) происходит его распад с выделением первого продукта реакции — спирта — и образованием ацилированного фермента Е5. Последний в результате реакции с водой образует второй продукт ферментативной реакции — кислоту — и превращается в исходный фермент. Определяемая экспериментально Кт для холинэстераз представляет собой функцию четырех констант скорости к+х, к х, к+2 и к+ . При этом стационарная скорость реакции определяется уравнением Михаэлиса [78] [c.161]

Как видно из рис. 1, скорость ферментативной реакции во всех случаях одинакова. При выдерживании полифенолов с мочевой кислотой спектрофотометрических изменений в системе не наблюдается. Это означает, что либо торможение обусловлено взаимодействием ингибитора с ферментом, причем такое взаимодействие происходит за время меньше 30 сек (время от внесения ингибитора в реакционную смесь до первого отсчета), либо ингибитор взаимодействует с промежуточным продуктом ферментативной реакции. [c.148]

Г/,е Епеапт И Еапт —фермент в активном и неактивном состоянии 5 — субстрат (Е5) — субстрат-ферментный комплекс (комплекс Михаэлиса) Р —продукт ферментативной реакции. [c.197]

Образующийся меркаптид ртути восстанавливается в боратных буферных растворах при -0,55 В, что проявляется на вольтамперограммах в виде острого пика Чувствительность сигнала к изменению концентрации тиола достаточно высока, поскольку в этом случае по существу используется принцип инверсионной вольтамперометрии. Применение электронакоиления одного из продуктов ферментативной реакции позволяет значительно снизить нижнюю границу определяемых концентраций ингибиторов холинэстераз В некоторых случаях эта величина на несколько порядков меньше, чем в других электрохимических методах. [c.295]

В целях упрощения обработки кинетики квазиравновесных ферментативных реакций с помощью метода графов, М. В. Воль-кенштейн с сотрудниками разработали так называемый диаграммный метод анализа ферментативной кинетики [5—8]. Согласно данному методу, дальнейшее упрощение анализа графов достигается тем, что для обратимых стадий ферментативного процесса выписываются не константы скорости, а константы равновесия. В этом случае линии, соединяющие вершины графа, называют дугами (аналоги ветвей в графах стационарных реакций). Величина дуги равна отношению констант скоростей прямой и обратной реакции (по отношению к ориентации дуги). Дуги ориентируются от входа, за который обычно принимают состояние свободного фермента. Наконец, выходом диаграммы называют вершину, из которой получается продукт ферментативной реакции и свободный фермент. В этом случае из выхода ведет не дуга, а ветвь, величина которой равна константе скорости стадии образования продукта. [c.292]

Исследования в области структуры и функции карбогидраз к началу прошлого десятилетия позволили сделать следующий вывод состав продуктов ферментативной реакции в ходе гидролиза и зависимость скорости реакции от длины цепи олигомерного субстрата представляют собой индивидуальные характеристики фермента. В этом отношении наиболее ярко различия в характеристиках проявляются у деполпмераз эндо- и экзодействия. Однако среди [c.37]

В некоторых случаях действие того или иного фермента регулируется не субстратом или продуктами ферментативной реакции, а веществом, отличным от них. Такие ферменты называют аллостертескими ферментами. Участок в молекуле фермента, который реагирует с алло-стерически действующей молекулой, не совпадает с активным центром фермента. Несовпадение места присоединения аллостерических молекул и активного центра фермента удалось наблюдать при рентгеноструктурном анализе аспартаттранскарбамилазы— фермента, молекула которого состоит из шести субъединиц и имеет массу 310000. [c.400]

Ферменты локализованы во всех компартментах клеток. Ядерные ферменты катализируют синтез информационных макромолекул, а также процессы их созревания, функционирования и распада. В митохондриях действуют ферменты энергетического обмена, в аппарате Гольджи — ферменты, катализирующие созревание белков, в лизосомах — гидролитические ферменты. Значительное число ферментов ассоциировано с внешней и внутренними мембранами. Так, ферменты, защищающие клетку от действия чужеродных химических веществ, локализованы в эндоплазматическом рети1сулуме. Распределение ферментов в клетках определяют методом дифференциального центрифугирования гомогената тканей. Локализация некоторых ферментов идентифицирована гистохимическими методами in situ. Для этого при помощи микротома получают срезы ткани и обрабатывают их раствором субстрата. Идентификация продуктов ферментативной реакции облегчена, если последние окрашены. [c.65]

В случае изменения pH, связанного с фд)ментом, конечный отклик рН-сенсора зависит от баланса всех равновесий, включающих Н" " реакций протонирования и депротонирования продуктов ферментативной реакции, буферной емкости и т. и. Если рассматривать только прямой выход ферментативной реакции, без равновесий,-связанных с буферной емкостью н т. д., и предпола- [c.543]

Не менее удивительна и специфичность ферментов к данному типу реакции. Довольно часто превращения субстрата могут идти по разным путям. Фермент катализирует только один путь, практически не влияя на другие реакции. Сопоставляя ферментативную реакцию с некатали-знруемой органической реакцией, поражаешься, что в то время как в ходе последней образуется большое количество побочных продуктов, ферментативная реакция протекает исключительно чисто . [c.41]

В белковой части фермента может находиться и аллостери-ческий центр, имеющий большое значение в регуляции ферментной активности. После присоединения к этому центру соответствующих веществ — эффекторов активность фермента изменяется. Конечные продукты ферментативных реакций обычно являются негативными эффекторами — присоединение их к ал-лостерическому центру фермента уменьшает его активность. Вещества, присоединение которых к аллостерическому центру молекулы фермента вызывают увеличение активности, называют позитивными эффекторами. [c.29]

Среди продуктов реакции открыты также моно- и динуклеотиды. Типичными представителями этих ферментов являются ДНКазы поджелудочной железы. Одна из них (ДНКаза I) была получена в чистом виде, расшифрована последовательность всех ее 257 аминокислотных остатков. Фермент наиболее активен при pH 6,8-8,0, активируется двухвалентными ионами Mg и Мп и ингибируется конечными продуктами ферментативной реакции - олигонуклеотидами. [c.499]

Доскональное обсуждение механизмов переноса энергии в живых системах не входит в задачу данной главы. Мы отсылаем читателя к подробному изложению общих принципов этого вопроса, приведенному А. Л. Ленинджером [3], и к детальному обзору Г. А. Кребса и Г. Л. Корнберга [4]. Здесь же достаточно указать, что одним из продуктов ферментативных реакций, ведущих к высвобождению энергии, является аденозинтрифосфат (АТФ). Это — высокореакционноспособное, или богатое энергией , соединение, служащее источником свободной энергии, необходимой для полного завершения тех биохимических реакций, в которых это соединение принимает участие. Если сравнивать задачу, которая стоит перед клеткой и хнашком-органиком, то окажется следующее. Химик-органик при выборе реагентов, поставляющих необходимую для определенного синтеза энергию, может основываться на своем опыте, а не на теоретических рассуждениях. У клетки же выбор ограничен теми реагентами, которые образуются при распаде пищевых продуктов. Наиболее важ- [c.12]

В течение многих лет методы исследования обмена веществ у микробов сводились к тщательному анализу продуктов ферментативных реакций. Так, было получено много ценных данных, особенно при изучении спиртового брожения глюкозы, в результате которого были выяснены основные этапы гликолиза. К наиболее важным работам этого периода относятся работы Г. Вуда и К. Веркмана [44], установивших, что пропионовокислые бактерии, растущие на глицерине, действительно поглощали значительное количество СОг в качестве субстрата. Эта работа показала, что гетеротрофные, как и аутотрофные, организмы могут фиксировать двуокись углерода. Этот факт, хотя и не был безоговорочно принят, явился в то время по меньшей мере пора- [c.29]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология