Антисыворотка поликлональные, свойства

Специфичность моноклональных антител. Основным свойством, на котором основано применение моноклональных антител в иммуноанализе, является высокая специфичность взаимодействия. Поликлональные антисыворотки часто имеют высокую перекрестную реактивность, что делает затруднительным и даже невозможным [c.170]

Используя специфические связывающие свойства антител, исследователь может выбирать между двумя различными формами реагента, приготовленного на их основе это обычные поликлональные антисыворотки (или иммуноглобулиновые фракции, полученные из сыворотки) и моноклональные антитела (МКА). Препараты и тех, и других получают различными путями с различной целью выбор между ними осуществляется зачастую не произвольно, а в большой степени зависит от соответствия специфических свойств антител требованиям теста. [c.21]

Для получения поликлональных антисывороток, используемых в повседневных иммунологических методах исследования, особенно в реакциях преципитации, применяют более крупных животных, в частности лабораторных кроликов. Кроликов можно содержать в клетках, они хорошо размножаются в неволе, выносливы и долго живут. Уход, иммунизация и взятие Крови у этих животных не представляют труда. Полученные от кроликов антисыворотки обладают хорошими преципитиру-ющими свойствами и стабильны при хранении, иммуноглобулиновая фракция легко поддается очистке. Кроме того, такие антисыворотки, обладая высокой авидностью/аффинностью пригодны для использования в чувствительных иммунологических тестах. В течение нескольких месяцев в период максимального ответа можно получить не менее 100 мл антисыворотки и еще 150 мл при аутопсии. Аутбредные кролики отвечают на иммуноген по-разному, поэтому следует использовать для иммунизации несколько животных, протитровать их сыворотки по отдельности, затем смешать отобранные пробы, если требуется максимальное разнообразие антител. Кролики достаточно хорошо отвечают на широкий спектр ммуногенов в сочетании с адъювантом Фрейнда образованием IgG. [c.41]

До настоящего момента мы рассматривали главным образом преимущества замены поликлональных антител моноклональными для целей иммунометрического анализа. Повышение чувствительности, специфичности и воспроизводимости результатов (для различных партий антител) является безусловным вкладом в арсенал существующих методов. Однако этим дело не исчерпывается. Становится все более очевидным, что моноклональные антитела обладают рядом уникальных свойств, которые невозможно было выявить при работе с поликлональными антисыворотками. Для моноклональных антител удалось изучить, как это делается обычно для любых других белков, зависимость их функциональной активности от таких параметров окружающей среды, как pH, ионная сила, температура, присутствие детергентов. Несомненно, компонентам поликлональной антисьшо-ротки присущи подобные свойства, которые, однако, из-за гетерогенности популяции молекул в таких,препаратах не поддаются четкому выявлению. Наблюдать влияние указанных факторов можно только при работе с химически однородной популяцией антител. В качестве примера можно рассмотреть влияние pH на связывание моноклональных антител с гормоном роста человека (ГРЧ) (рис. 24-5). При pH 7 наблюдается образование прочного комплекса антител с ГРЧ, который при pH 4 и ниже разрушается с высвобождением молекул гормона (Bartholomew et al., 1983). Другие моноклональные антитела к этому же гормону не обнаруживают подобных свойств, прочность их связывания с ГРЧ при изменении pH в указанном дйа- [c.395]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология