Кролик взятие проб крови

Для получения поликлональных антисывороток, используемых в повседневных иммунологических методах исследования, особенно в реакциях преципитации, применяют более крупных животных, в частности лабораторных кроликов. Кроликов можно содержать в клетках, они хорошо размножаются в неволе, выносливы и долго живут. Уход, иммунизация и взятие Крови у этих животных не представляют труда. Полученные от кроликов антисыворотки обладают хорошими преципитиру-ющими свойствами и стабильны при хранении, иммуноглобулиновая фракция легко поддается очистке. Кроме того, такие антисыворотки, обладая высокой авидностью/аффинностью пригодны для использования в чувствительных иммунологических тестах. В течение нескольких месяцев в период максимального ответа можно получить не менее 100 мл антисыворотки и еще 150 мл при аутопсии. Аутбредные кролики отвечают на иммуноген по-разному, поэтому следует использовать для иммунизации несколько животных, протитровать их сыворотки по отдельности, затем смешать отобранные пробы, если требуется максимальное разнообразие антител. Кролики достаточно хорошо отвечают на широкий спектр ммуногенов в сочетании с адъювантом Фрейнда образованием IgG. [c.41]

Для получения преципитирующей антисыворотки с высоким титром и преобладанием IgG, например к гетерологично-1му сывороточному белку, 100—200 мкг белка эмульгируют в ПАФ и 0,5 мл вводят кролику в/м в бедро. Повторное введение проводят через 10—14 дней в другое бедро. Через 10 дней после второй инъекции можно взять пробу крови. Обычно для получения антисыворотки с высоким титром необходимы бустерные инъекции. Для этого разработаны несколько режимов иммунизации, и все они предусматривают период отдыха в течение 2—3 мес. [c.77]

Пробы крови, взятые у различных лиц, при одинаковом разведении их водой обнаруживают в большинстве случаев различную интенсивность окраски и различное пероксидазное действие. Колебания в пероксидазных действиях могут быть отнесены или за счет различного содержания оксигемоглобина в пробах или, если допустить, что в крови наряду с оксигемоглобином существует особая пероксидаза, за счет различного содержания этого фермента. Если последнее допущение правильно, то дол кны быть растворы крови, которые при одинаковой интенсивности окраски проявляют различные пероксидазные свойства. Опыты с кровью людей и кроликов не подтвердили этого предположения. Кровь набиралась у людей из кончика пальца, у кроликов—из вены уха пипетко в 20 кубических миллиметров. Тотчас же после взятия пробы крови гемолизировались в 20 см дестиллированпой воды и полученные растворы (1 1000) располагались в 4 ряда по степени интенсивности их окраски. В каждом ряду неодинаково окрашенные растворы доводились соответственным разведением водой до интенсивности окраски самой слабой пробы (№ 1 каждого ряда). В неодинаково окрашенных растворах определялся показатель пероксидазы по методу Баха и Зубковой. [c.580]

После повторного введения через 1 нед у кролика следует взять пробу крови. Это необходимо сделать и в том случае, когда после в/к инъекции развивается сильная реакция Артюса. [c.78]

Поликлональные антитела против GGT почек быка или GGT почек крысы (легкие формы) могут быть получены иммунизацией кроликов (самки, возраст 6—8 нед) путем инъекций в подушечки задних лап эмульсии, состоящей из 50 мкг фермента в 0,5 мл Na l-натрийфосфатного буфера с 0,5 мл полного стимулятора Фрейнда на животное. Через 2 нед вводят то же количество антигена (50 мкг GGT в 0,5 мл того же буфера), хорошо эмульгированного неполным стимулятором Фрейнда, подкожно в несколько мест шеи. Целесообразно повторить последнее введение еще через 2 нед. Через 10—15 сут берут пробы крови кролика инкубируют взятые пробы при 37 Х в течение 2 ч, затем оставляют на ночь при 4 °С и отделяют антисыворотку центрифугированием при 3000 g в течение 30 мин. В анализах методом двойной иммунодиффузии антисыворотка при разбавлении 1 128 (Na l-фосфатным буфером) все еще дает дуги преципи тации с разбавленной GGT (0,025 мг/мл). [c.153]

В сыворотке крови 25 здоровых людей Холл и Люкас [12] обнаружили колебания в активности холинэстеразы в пределах от 2,7 до 7,24 единицы. Различия между отдельными пробами, взятыми у одного и того же индивида, были незначительны [13]. Те же ав- оры нашли подобные же индивидуальные различия и у других видов животных — у лошадей, собак, морских свинок, кошек, кроликов и цыплят. Межвидовые различия проявляются также четко пределы колебаний в активности холинэстеразы для кошек составляют, например, 1,84—2,80, а для кроликов — 0,35—0,70 единицы. [c.99]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология