Адъювант Фрейнда

В настоящее время для целей иммунизации широко применяется коммерческий препарат полного адъюванта Фрейнда, в состав которого входят смесь минеральных масел, эмульгатор и [c.150]

Полный адъювант Фрейнда ПАФ] [c.38]

Схема иммунизации. Для получения антисывороток к мышиным IgG животным внутримышечно (в бедро) и подкожно (в области живота) в нескольких точках вводят 2 мл эмульсии из растворенного в физиологическом растворе IgG (1 мг/мл) и 1 мл адъюванта Фрейнда. Через месяц иммунизацию повторяют, вводя 500 мкг lgG в виде эмульсии с равным объемом адъюванта Фрейнда. Затем каждую вторую неделю в течение 6—8 нед вводят по 200 мкг IgG с адъювантом. Через 2 нед после последней иммунизации из краевой вены уха берут пробы крови и определяют титры антител методом иммуноферментно- [c.307]

Неполный адъювант Фрейнда (НАФ) [c.38]

В продаже имеются готовые препараты полного и неполного адъюванта Фрейнда. Весьма хорошо себя зарекомендовала следующая схема иммунизации белковыми антигенами. 0,1—1,0 мг антигена растворяют в 0,25—0,5 мл физиологического раствора хлористого натрия и гомогенизируют с равным объемом полного адъюванта Фрейнда. Эмульсию вводят внутримышечно в четыре места. Спустя 3—4 нед у животного берут кровь и определяют активность антисыворотки в иммуноэлектрофорезе. При необходимости эту процедуру повторяют. Если через 2—3 нед после повторной имму- [c.118]

ПАФ + 10 Неполный адъювант Фрейнда То же [c.102]

Подкожные инъекции. До 0,5 мл может быть введено под легко смещаемую кожу области лопаток или боковых отделов туловища с помощью 25-мм иглы № 20. Шерсть в области инъекции выстригают изогнутыми ножницами и протирают кожу спиртом. Таким образом обычно проводят бустерные иммунизации с адъювантами Фрейнда. [c.72]

Растворимые белковые антигены (50—100 мкг), смешанные с равным объемом адъюванта Фрейнда, вводят внутрибрюшинно. Через 2— [c.309]

Для получения антисывороток морских свинок к инсулину свиньи (крупного рогатого скота) проводят многоточечные инъекции инсулина подкожно, внутримышечно и внутрибрюшинно по следующей схеме 1, 8, 15-й день — 200 мкг инсулина в 0,5 мл физиологического раствора смешивают с 0,5 мл полного адъюванта Фрейнда и вводят животному. После 30 дней отдыха животному в течение 3 дней ежедневно вводят антиген путем многоточечных инъекций по схеме 45, 46, 47-й день — 150 мкг инсулина в 0,7 мл физиологического раствора. Отбор крови проводят через 7—9 дней из сердца. [c.152]

Конкретная схема иммунизации сильно зависит от природы антигена и его иммуногенности. Антигены клеточной поверхности являются сильными иммуногенами, тогда как большинство растворимых белков — слабые иммуногены. В последнем случае необходимо применять различные адъюванты, усиливающие иммунный ответ. Среди адъювантов наибольшее распространение получил полный адъювант Фрейнда (ПАФ). Помимо этого используют введение антигена, преципитироваиного на квасцах, и введение вместе с антигеном убитых клеток Bordetella Pertussis. Обычно антиген вводят неоднократно, что необходимо для развития сильного иммунного ответа, хотя чрезмерная иммунизация [c.100]

Вторая инъекция (через 4 недели) 1 мг антигена в смеси с полным адъювантом Фрейнда вводится подкожно в несколько точек иа спине животного. [c.277]

При использовании антигенов, полученных с помощью хроматографических методов и поэтому, по крайней мере частично, растворимых, смешайте 0,2—2,0 мг интактного гибридного белка, растворенного в 1 мл физиологического раствора или PBS с 1,25 мл полного адъюванта Фрейнда и получите гомогенную эмульсию, как описано выше. Сделайте зафиксированному кролику подкожные инъекции в несколько мест. Повторите инъекции 0,2—1,0 мг антигена в неполном адъюванте Фрейнда на 14-й и 21-й день и с 28-го дня начинайте брать кровь. Для определения титра антител берите кровь еженедельно и повторите введение 0,2—1,0 мг антигена, когда титр антител начнет уменьшаться. После получения достаточного количества антисыворотки, пока титр антител остается достаточно высоким, возьмите под анестезией кровь из сердца кролика. [c.163]

Третья инъекция (через 2 недели) 1 мг вируса в смеси с адъювантом Фрейнда вводят подкожно в несколько точек на спине животного или в мышцы обеих задних ног. [c.277]

Внутримышечные инъекции. В положении животного стоя выстригают шерсть на участке задней поверхности бедра и с помощью стеклянного 1-мл шприца и 50-мм иглы № 19 вводят глубоко в толщу мышц бедра до 1 мл эмульсии адъюванта Фрейнда. [c.73]

Многие растворимые белки, ферменты в том числе, выделенные из различных тканей животных, обладают антигенными свойствами, т. е. при введении в организм вызывают в нем образование антител. Однако их антигенные свойства (иммуногенность) различаются, что проявляется в разной способности стимулировать продукцию антител. В известных пределах иммуногенность коррелирует с молекулярной массой антигена. Иммунохимически чистые антигены применяются обычно в виде 0,01 — 1,0%-ных растворов, тогда как неочищенные антигены и смеси антигенов приходится вводить в большей концентрации. Слабоиммуногенные антигены необходимо вводить со стимуляторами иммуногенеза, из которых наиболее часто используют адъювант Фрейнда. Антисыворотки против растворимых нативных белков можно получить повторными инъекциями (внутримышечно, подкожно, внут-рикожно) эмульсии раствора белка с адъювантом или внутривенными инъекциями раствора белка без адъюванта. [c.307]

ГИИ стали проводить с динитрофенильными соединениями. ДНХБ и его аналоги использовали для эпикутанной сенсибилизации, а комплексные антигены, состоящие из протеина, пептида или аминокислоты с ДНФ-группой, вводили в подушечки лапок морских свинок с адъювантом Фрейнда [147]. Эти исследования представляют большую ценность для изучения аллергии к химическим веществам в целом, так как именно на модели сенсибилизации к ДНФ-группам была начата разработка таких важных вопросов, как изучение первичных механизмов контактной аллергии, роли гаптена и носителя в индукции и подавлении аллергических реакций, механизма образования комплексных антигенов, толерантности к химическим веществам, иммунологической характеристики антигаптенных антител, морфологии кожных реакций замедленного типа, генетического контроля иммунного ответа и т.д. Динитрофенильные антигены широко используются в теоретических иммунологических исследованиях и в настоящее время наряду с искусственными полимерными антигенами из аминокислотных остатков. [c.90]

Попытка получить антитела против а -кислого гликопротеипа была предпринята с целью разработки метода определения этого соединения при различных заболеваниях, однако она не имела большого успеха, так как (-кислый гликопротеин обладает очень слабой антигенностью при введении его кроликам совместно с цельной сывороткой [64]. Преципитирующие антитела на него вырабатываются только в том случае, если он вводится совместно с адъювантом Фрейнда, как часть фракции VI Кона [65]. Он также проявляет очень небольшую антигенность при введении цыплятам, а образуемый им комплекс антиген — антитело, по-видимому, состоит из единственного антигена и специфичного по отношению к нему антитела [66]. Обработка нейраминидазой вызывает увеличение антигенности а(-кислого гликопротеина, что было показано в опытах на кроликах [67]. [c.76]

При использовании денатурированных ДСН антигенов элюируемых из геля, необходимо, чтобы гель содержал макси мально возможное количество белка. Это количество колеб лется от 0,1 до 1 мг/мл в зависимости от стабильности гибрид ного белка и того, насколько он был очищен до электрофореза Животные плохо переносят акриламид, и поэтому антиген еле дует вводить в минимальном объеме. Измельчите срез геля пропустив его несколько раз через шприц. Смешайте пять объ емов полного адъюванта Фрейнда (Gib o) с четырьмя объема ми геля с помощью двух шприцов, соединенных переходником из нержавеющей стали. (Такой переходник можно сделать, спаяв вблизи оснований две стальные иглы № 18 для инъекций.) Полностью эмульгируйте антиген так, чтобы суспензия имела стабильную консистенцию, и сделайте инъекцию зафиксированному или находящемуся под анестезией кролику (весом 2,2— 2,7 кг) внутримышечно в несколько участков тела. Через 14 и 21 день повторите инъекции раствором антигена в неполном адъюванте Фрейнда. На 28-й день возьмите у животного кровь из ушной вены ( -(20 мл, что не представляет опасности для жизни животного). Кровь можно брать еженедельно до тех пор, пока животное остается здоровым, а дополнительные введения антигена можно проводить примерно каждые шесть — восемь недель. [c.163]

Для получения поликлональных антисывороток, используемых в повседневных иммунологических методах исследования, особенно в реакциях преципитации, применяют более крупных животных, в частности лабораторных кроликов. Кроликов можно содержать в клетках, они хорошо размножаются в неволе, выносливы и долго живут. Уход, иммунизация и взятие Крови у этих животных не представляют труда. Полученные от кроликов антисыворотки обладают хорошими преципитиру-ющими свойствами и стабильны при хранении, иммуноглобулиновая фракция легко поддается очистке. Кроме того, такие антисыворотки, обладая высокой авидностью/аффинностью пригодны для использования в чувствительных иммунологических тестах. В течение нескольких месяцев в период максимального ответа можно получить не менее 100 мл антисыворотки и еще 150 мл при аутопсии. Аутбредные кролики отвечают на иммуноген по-разному, поэтому следует использовать для иммунизации несколько животных, протитровать их сыворотки по отдельности, затем смешать отобранные пробы, если требуется максимальное разнообразие антител. Кролики достаточно хорошо отвечают на широкий спектр ммуногенов в сочетании с адъювантом Фрейнда образованием IgG. [c.41]

Более редко используются такие способы иммунизации, как введение иммуногепа в подушечки лап или в конъюнктиву глаза, которые вызывают сильные болевые ощущения у животного. Иммунизацию начинают введением животному иммуногена в смеси с полным адъювантом Фрейнда, а для повторных инъекций применяют неполный адъювант Фрейнда. Перед отбором крови за 7— [c.152]

П/к и в/м способы используют для иммуногенов, введенных в адъювант Фрейнда, поскольку они приводят к образованию гранулом вокруг депо и медленному высвобождению им муногена в регионарные лимфоузлы. [c.69]

При наличии практических навыков и тщательной работе прн выращивании клеток в планшетах содержимое лунок не должно подвергаться бактериальному заражению. Совершенно необходимо не переполнять лунки, поэтому никогда не вносите в лунку более 100 мкл среды. В случае если зароет обнаружен в лунке планшета, содержащего важные для работы гибридные клоны, осторожно внесите в лунку 100 мкл 70%-ного этанола, затем отберите из нее все жидкое содержимое и оставьте в сухом месте. При загрязнении лунки с клетками, секретирую-щкми антитела, ее содержимое можно спасти пассированием клеток in vivo. Введите содержимое лунки мыши BALB/ , которой за 2—10 дней до этого было внутрибрюшинно введено 200 мкл полного адъюванта Фрейнда. При удачном стечении [c.195]

Таким образом, гипотеза об иммунохимических механизмах долговременной памяти имеет целый ряд преимуществ и обоснований. Однако для ее окончательного доказательства требуется прежде всего строгое экспериментальное подтверждение способности клеток глии вести себя подобно лимфоцитам в отношении иммунных реакций. Кроме того, пока нет прямых сведений об образовании антителоподобных факторов при консолидации, что, возможно, связано с чрезвычайной методической трудностью их вьшвления. Пока имеются лишь косвенные данные, указывающие на связь иммунных процессов с механизмами памяти. Согласно этим данным, введение адъюванта Фрейнда —стимулятора иммунных процессов — способно в значительной мере изменять скорость выработки различных поведенческих навыков у экспериментальных животных. [c.396]

Ключевым экспериментом послужило открьггие возможности вызывать аллергический энцефалит у разнообразных экспериментальных животных, если вводить им периферически собственный катионный белок миелина (КБМ) с иммуностиму-л ггором — адъювантом Фрейнда. [c.435]

Тч — БСА в 0,7 мл физиологического раствора смешивают с 0,7 мл адъюванта Фрейнда и полученную эмульсию вводят животному 31, 32, 33 или 45, 46, 47-й дни — виутривенно вводят 0,7—1 мл физиологического раствора, содержащего 1—2 мг Т4—БСА. [c.153]

Иммунизация мышей. 30—50 мкг инсулина растворяют в 0,1 мл 0,15 М раствора Na l, pH 7,4 смешивают с равным объемом адъюванта Фрейнда и вводят мышам внутрибрюшинно. Через 4—5 недель повторно вводят 30 мкг инсулина в неполном адъюванте Фрейнда внутрибрюшинно. За 3—4 дня до слияния вводят 20 мкл инсулина без адъюванта внутрибрюшинно и 10 мкг внутривенно. [c.167]

Кровь собирают в период между 2-й и 4-й неделями, считая от последней-инъекции. Через 4 недели проводят реиммуиизацию. Для этого 1 мг вируса в смеси с полным адъювантом Фрейнда вводят подкожно в несколько точек нли внутримышечно в две точки. [c.277]

Некоторые исследователи предпочитают избегать применения адъюванта Фрейнда. Действительно, он может стимулировать развитие гранулом, клетки которых повышают фоновый рост в культурах после гибридизации. Предпочтительнее использовать адсорбированный на квасцах антиген в смеси с убитыми клетками Bordetella pertussis в качестве адъюванта [9]. Другой способ, который был успешно применен в случае иммуноглобулинов, заключается в связывании антигена с частичками пластика [10] с последующим осуществлением иммунизации в/б, без адъюванта. Относительно небольшие пептиды иногда необходимо конъюгировать с белком-носипелем, но они могут приобрести иммуногенность при введении в полный адъювант Фрейнда. [c.123]

Внутримышечные инъекции. Кролика держат на коленях п оператор вытягивает в сторону заднюю лапу, обхватив колено снпзу, шерсть на поверхности бедра над коленом выстригают. Протирая кожу спиртом, выявляют поверхностные кро-ьеносиые сосуды. Иглу (40 мм, №21) вводят глубоко в бедро под углом вперед впрыскивают до 0,5 мл раствора антигена, убедившись, что игла не находится в просвете глубоко лежащего сосуда. Затем иглу извлекают и место инъекции тщательно протирают для удаления вытекающей жидкости. Данный способ обычно используют для введения адъюванта Фрейнда. [c.72]

Для растворимых антигенов известны разнообразные схемы иммунизации. Например, первую инъекцию 100 мкг антигена, эмульгированного в полном или неполном адъюванте Фрейнда, осуществляют подкожно (в 0,1 мл), а последующие инъекции (оо 100 мкг в PBS объемом 0,5 мл) проводят в/б с интервалом в месяц. Отбирают пробу крови, чтобы убедиться в наличии адекватного титра антител в сыворотке, а затем осуществляют последние инъекции антигена (в/б утром и в/в днем), за 3—4 дня до гибридизации. [c.123]

Вводят четырем кроликам внутримышечно по 0,5—1 мг мышиных IgG в полном адъюванте Фрейнда (см. гл. 2) в левое, а затем через неделю в правое бедро. [c.169]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология