Фосфатаза синтез методом EPL

Если же метод анализа базируется на измерении скорости образования продукта реакции, то отличительными спектральными свойствами должен обладать именно продукт. Такому требованию удовлетворяют многие гидролазы, особенно те из них, которые не обладают строгой специфичностью к некоторым элементам структуры субстрата. Синтез хромогенных субстратов некоторых протеаз и фосфатаз, например, позволил использовать метод остановленного потока для изучения этих ферментов. Ионные реакции, особенно протонирование, протекают, к счастью, очень быстро. Поэтому для изучения струйным методом реакций, протекающих с образованием или потреблением протона, во многих случаях можно использовать индикаторные красители. Потенциальные возможности этого метода значительно расширяет так называемый метод закалки реакции в потоке . В этом методе растворы фермента и субстрата смешиваются так же, как и при использовании других струйных методов, но реакционная смесь поступает затем во второй смеситель (а не в фотометрическую ячейку), где она смешивается с химическим закаливающим реагентом (часто им служит сильная кислота),который очень быстро останавливает реакцию. При постоянной скорости потока время реакции в этом случае зависит только от расстояния между двумя смесителями. Закаленную реакционную смесь можно далее проанализировать любым подходящим методом. Этот способ [8—10] дает возможность изучать многие ферментативные реакции, для которых другие струйные методы оказываются неприменимыми. [c.184]

Синтез конъюгатов с применением глутарового альдегида разработан в основном для пероксидазы хрена, щелочной фосфатазы и глюкоамилазы. Недостатком метода является невысокий выход конъюгата (1—10%) и поляризация белков, в результате чего теряется иммунологическая активность. К достоинствам метода относится его простота и то, что качество получаемого конъюгата удовлетворяет необходимым требованиям. [c.184]

Синтез конъюгата IgG с щелочной фосфатазой с помощью глутарового альдегида (одностадийный метод). [c.184]

Ньше для установления генетической карты пользуются скрещиванием нрототрофных мужских штаммов Hfr и ауксотрофных женских штаммов F , что сильно повышает вероятность рекомбинации. Кроме того, точнее всего можно изучить генетическую карту этим методом в небольшой области хромосомы. Герен и Левинталь изучили строение одного цистрона Е. сой, а именно управляющего синтезом фосфатазы (Р-цистрона). В пределах этого одного цистрона было получено несколько сот мутаций, и расположение каждой мутации (или точее, каждого мутона, т. е. области генетического вещества, затронутой мутацией) внутри цистрона определено с помощью многих рекомбинационных экспериментов. Подобным же путем Моно и Жакоб изучили небольшую область хромосомы вблизи локуса La . [c.310]

Далее был применен метод отпечатков пальцев к триптическому гидролизату фосфатазы Е. oli. Ферментный белок бактериальной клетки есть один из 1000 производимых клеткой белков. Синтез фосфатазы i . oli регулируется, точнее подавляется, в присутствии иона фосфата. Если выращивать бактерии на среде с го- [c.418]

Синтез гликогена. Г люкокортикоиды увеличивают запасы гликогена в печени как голодных, так и сытых животных (на этой основе был разработан метод определения эффективности глтококортикоид-ных гормонов). Это осуществляется посредством превращения неактивной формы гликогенсинтазы в активную ( Ь в а ), вероятно, путем активации фосфатазы, которая способствует этому превращению. [c.214]

Цитохимическими методами выявляется увеличение содержания гликогена, РНК, повышение активности фосфорилазы, гликогенсин-тетазы, сукцинахцегидрогеназы, кислой фосфатазы. Прн беременности содержание сократительных белков в ГМК увеличивается с максимумом к ее окончанию (почти на 50 Ж). Установлено, что в конце беременности эстрогены, синтезируемые в плаценте из андрогенов надпочечников гглода, поступают в цитоплазму ШК миометрия, где образуют комплексы с белками и переносятся в ядра De Sombre et al., 1972). Под влиянием эстрогенов в ядрах синтезируется своеобразная РНК. Уменьшение содержания такой РНК может привести к нарушению синтеза сократительных белков. [c.127]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология