Кислотная фосфатаза ингибиторы

Поскольку фосфат-ионы являются конкурентными ингибиторами кислотной фосфатазы, наблюдается линейное соотношение между концентрацией фосфат-ионов и величиной, обратной максимальной скорости изменения тока в диапазоне концентраций фосфатов от 25 мкМ до 1,5 мМ. С другой стороны, градуировочные кривые для фторид-ионов нелинейны, что связано со сложной природой неконкурентного ингибирования кислой фосфатазы этими ионами. Тем не менее в диапазоне концентраций фторид-ионов от 0,2 до 6 мМ можно получить приемлемую градуировочную кривую. Продолжительность определения обоих анионов составляет около 5 мин. Если в [c.50]

В ферментативных реакциях самые убедительные доказательства участия механизма с координированным ионом гидроксила получены для карбоангидразы. По данным инфракрасной спектроскопии, молекула субстрата (СО2) не связана с атомом цинка, но расположена сравнительно близко от него, чтобы быть атакованной координированным гидроксильным ионом [82] (гл. 16, разд. 7). С этим механизмом согласуется зависимость активности от pH и природы разнообразных ингибиторов [ 114, 115]. Селвин [112] предложил похожий механизм для АТФ-азы митохондрий, участвующей в окислительном фосфорилировании. Он основывался на сходстве рН-зависимостей ферментативной реакции и упомянутого выще ускорения гидролиза АТФ ионами лантанидов. Однако величина р/Са для АТФ-азной реакции (примерно 7) была намного выще р/Са воды в комплексе с активирующими двухзарядными ионами. Для наилучщих активаторов М 2+, Со2+ и Ъг эта величина примерно равна соответственно 12, ---9 и 9 [87]. Селвин [112] предполагает, что кислотность комплексов может увеличиваться под влиянием положительно заряженных групп фермента, расположенных поблизости. Надо признать, что расхождение в 5 единиц pH для Mg2+ слишком велико, чтобы его можно было объяснить таким образом (необходимая для этого энергия электростатичеокого взаимодействия должна составлять примерно 7 ккал/моль). Выще говорилось о том, что ионизация свободной молекулы воды предложена в качестве объяснения перехода при pH 8,5, наблюдаемого для 2п +-содержащей щелочной фосфатазы. При этом увеличение pH приводило к уменьщению активности фермента. В силу этого можно считать, что механизм с координированным гидроксильным ионом вряд ли играет существенную роль при ферментативном гидролизе фосфатов. [c.651]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология