Задание градиента элюции

ЗАДАНИЕ ГРАДИЕНТА ЭЛЮЦИИ [c.99]

Развитием метода ступенчатого элюирования является градиентное элюирование. Этот способ отличается от метода ступенчатого элюирования лишь тем, что состав элюента изменяется в течение опыта не скачками, а постепенно. Использование специальных смесителей позволяет варьировать состав элюента в ходе элюции разнообразными способами, создавая в колонке градиенты концентрации и pH любой заранее заданной формы. Время элюции нри таком способе хроматографического разделения значительно сокращается, зоны веществ, двигающихся последними, размываются не сильнее, чем зоны быстро двигающихся веществ. Разделение веществ методом градиентного элюирования может быть полностью автоматизировано [ ], так же как и разделение методом ступенчатого элюирования [ ]. Автоматические жидкостные хроматографы, служащие для этой цели, в настоящее время выпускаются промышленностью. Подробное описание аппаратуры и методик, используемых при ступенчатой и [c.330]

Элюция всех компонентов смеси раствором постоянных концентраций и pH неудобна (последние вещества выходят очень размытым пиком) и не всегда возможна. Для хорошо известных смесей по мере элюции меняют концентрацию или pH элюата ступенчато. Однако для подбора условий разделения или разделения сложной смеси применяют так называемую градиентную элюцию, при которой состав элюента меняется плавно с заданным градиентом. Для подбора условий особенно удобен и часто используется линейный градиент. Многососудные приборы (вари-грады), используемые для сложных градиентов, пригодны, как правило, лишь для смесей известного состава при массовых анализах (ср. [31]), в противном случае длительная отработка условий не всегда окупается. [c.330]

Программное устройство фирмы Waters (модель 660) предусматривает возможность задания любого из 11 фиксированных профилей градиента (линейного, двух ступенчатых и по четыре — выпуклых и вогнутых). Экспериментатору достаточно задать начальный и конечный состав смеси буферов, сумлгарную скорость подачи элюента п время элюции. Существуют варианты п более сложных систем. Например, в хроматографе фирмы Руе Uni am (модель PU 4800) задание формы градиента с помощью микропроцессора можио осуществить путем разбиения всего времени элюции на девять произвольных интервалов, внутри каждого из которых любую кривую можно аппроксимировать экспоненциальной функцией. Однако необходимость столь сложных (и дорогостоящих) устройств представляется сомнительной, по крайней мере для решения тех задач, которым посвящена эта книга. [c.100]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология