Определение оптимума pH для действия амилазы

II. Определение оптимума pH действия амилазы [c.60]

Для определения активности а-амилазы две равные небольшие навески препарата ферментов (соответствующие примерно Vio—V20 общего веса полученного осадка ферментов) переносят в конические колбы емкостью 100 мл, приливают по 5 мл воды и растворяют ферменты. К раствору добавляют около 20 мг уксуснокислого кальция, который предохраняет от инактивации а-ами-лазу. Растворы в колбах нагревают в течение 15 минут на водяной бане при температуре 70° (необходимо строго следить за температурой допускаются колебания не более 0,5°), затем колбы быстро охлаждают под краном, а-амилаза более термолабильна и при таком прогревании почти не теряет свою активность, а -амилаза в этих условиях полностью инактивируется, поэтому в дальнейшем распад крахмала будет осуществляться под действием только а-амилазы. Так как оптимум pH равен 5,5—5,8, то после охлаждения в колбы добавляют по [c.150]

Работа 13. Определение оптимума pH для действия амилазы [c.69]

Осахаривающая способность амилазы солода, приготовленного из зерна различных культур (гидролиз 2%-ного раствора крахмала при pH 4,9 в течение 15 мин), по данным Хжоища, приведены на рнс. 64. Из него видно, что наряду с различием в осахаривающей способности разные солода имеют неодинаковый температурный оптимум, который у одних солодов (кукурузный, просяной, овсяной) приходится на одну строго определенную температуру, у других (ржаной, пшеничный, ячменный) — на некоторый интервал температур. Для всех солодов, за исключением овсяного, максимальная температура для действия амилазы не превышает 55Х, за ней наступает резкое снижение осахаривающей способности, а при 75—85°С— полное ее прекращение. Это объясняется тепловой денатурацией белковой молекулы фермента и связанной с ней потерей каталитической активности. [c.181]

По данным Книна, при температуре 20°С оптимум действия а-амилазы находится при pH 5,0, р-амилазы — при pH 4,5. Де-Клерк принимает за оптимум действия а-амилазы в пивоваренном заторе pH 5,8 (температура 70°С), р-амилазы —pH 5,4 (температура 60—65°С). Некоторое различие в экспериментальных данных объясняется неодинаковыми составами и концентрацией субстратов. Необходимо иметь в виду, что все определения значения pH сделаны при температуре 18—20°С (т. е. после охлаждения суб- [c.182]

Определение влияния pH на активност амилаз. Ферменты очень чувствительш к изменению кислотности среды, в которой они действуют. Отклоне ние активной кислотности среды в ту или иную сторону от оптимум pH вызывает понижение активности ферментов. Влияние pH на ак тивность ферментов можно проследить на примере действия амилазь солода на крахмал. [c.94]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология