Обработка фосфатазой

Рис. 7.2. Разделение олигонуклеотидов по длине цепи с зарядом -3 (рис. 7.1) после обработки фосфатазой. Присутствие метки р показано штриховкой.

Если немышечный миозин дефосфорилировать путем обработки фосфатазой, он становится легко растворимым. Седиментационный анализ показал, что единичные молекулы растворимого миозина имеют компактную конфигурацию, и, судя по данным электронной микроскопии, каждый миозиновый хвост складывается с самим собой, цепляясь за липкий участок на головке В этой свернутой конформации миозиновые молекулы не способны эффективно образовывать филаменты. Когда киназа легких цепей миозина фосфорилирует головки, они теряют липкость , хвосты освобождаются, распрямляются и могут ассоциировать друг с другом, образуя биполярные миозиновые филаменты (рис. 11-25 и 11-26). [c.270]

Альтернативная методика состоит в обработке фосфатазой вектора, расщепленного в сайте клонирования. Результат зави- [c.47]

Если обработанную фосфатазой ДНК необходимо непосредственно добавить в лигируемую смесь, то се следует очистить, как описано в разд. 1.5.2. Если после обработки фосфатазой требуется выделить специфический фрагмент, то, остановив реакцию, смесь необходимо обработать так же, как после полного рестрикционного гидролиза согласно методикам, приведенным в разд. 1.5.4 или 1.5.5. [c.51]

Кофермент А принимает участие в биологической активации и переносе ацетильных групп. Структура кофермента (70) была установлена Липманом и сотр. [61] в результате проведения серии специфических ферментативных гидролизов. Так, обработка фосфатазой кишечника приводила к образованию аденозина, пантетеина и 3 моль фосфата. Положение фосфатных групп определяли после проведения более специфичных деградаций. Так, после обработки нуклеотидазой, специфически расщепляющей нуклеотид 3 -фосфа-ты, был получен дефосфокофермент А и 1 моль ортофосфата. Пирофосфатаза, с другой стороны, вызывала образование адено-зр.н-3, 5 -дифосфата (известное соединение) и пантетеин-4 -фосфата. Положение фосфатной группы в последнем соединении было установлено путем его сравнения с синтетическим образцом известной структуры. [c.610]

Если в анализируемых объектах присутствуют другие окрашенные или флуоресцируюшие вешества, от них освобождаются пропусканием раствора (после обработки фосфатазой) через колонку с адсорбентом (Декальсо). Тиамин при этом адсорбируется, в то время как загрязняющие вещества в колонке не задерживаются. Затем тиамин вымывают подкисленным раствором хлорида калия, полученный раствор разбавляют до нужного объема и обрабатывают, как указано выше. [c.64]

A. Почему обработка щелочной фосфатазой уменьшает число пятен ламинов до трех независимо от их исходного числа (до обработки фосфатазой) [c.211]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология