Цитомегаловирус человека

Другая группа ученых на основе данных секвенирования ДНК цитомегаловируса человека создала в 1999 г. микрочип, используя фрагменты длиной 75 нуклеотидов, соответствующие всем теоретически предсказанным открытым рамкам трансляции. Для 151 вирусной ОРТ была доказана продукция специфических [c.55]

Пластнковые карточки. Третий вид экспериментального оформления dot-EUSA разработан специально для быстрой диагностики цитомегаловируса человека [14]. В этом методе анти- [c.133]

В этой главе мы обсудим культивирование, очистку и титрование герпесвирусов, взяв в качестве примера по одному представителю каждого из подсемейств, указанных выше. Особое внимание, однако, будет уделено вирусам простого герпеса — наиболее интенсивно изучаемым вирусам этой группы. Коротко будут рассмотрены цитомегаловирус человека и герпесвирус саймири. [c.270]

Репликативный цикл цитомегаловируса человека продолжительнее, чем штаммов ВПГ. Кроме того, данный вирус прочно ассоциирован с клеткой и имеет высокую клеточную специфичность. Хотя во многих лабораториях для наращивания этого вируса используют клетки MR -5, Flow 5000 или Нер-2, В. Гибсон (личное сообщение) рекомендует ранние пассажи на фибробластах крайней плоти человека или клетках легкого эмбриона человека. Гибсон культивирует перечисленные клетки в среде DMEM, содержащей 4500 мг/л глюкозы и 10% ЭТС. В нашей лаборатории используют клетки MR -5, культивируемые в среде Игла в модификации Glasgow с 10% ЭТС. Заготовки вируса получают следующим образом [c.287]

Рис. 10.9. Разделение центрифугированием внеклеточных частиц цитомегаловируса человека, а — очищенную среду фибробластов крайней плоти человека, инфицированных штаммом AD 169, наслаивали на глицерин-тартратный градиент и центрифугировали в роторе SW41 (Be kman). Освещая пробирку сверху, можно обнаружить три фракции неинфекционные оболочечные частицы, вирионы и плотные частицы, б — фракция, содержащая плотные частицы, извлечена из первого градиента, разведена TN-буфером и сконцентрирована равновесным центрифугированием в аналогичном градиенте (40 ООО об/мин, 4 С, 18 ч). Освещая пробирку сверху, можно обнаружить одну узкую, неоднородно окрашенную полосу (цвет ее меняется с красного на коричневый).

Рис. 10.10, Негативно окрашенные внеклеточные частицы цитомегаловируса человека, выделенные из глицерин-тартратного градиента а—неинфекционные оболочечные частицы б — вирионы в — плотные частицы. Образцы получают фракционированием градиента, осаждают, ресуспендируют в буфере TN (0,05 М трис-НС1, pH 7,4, 0,10 М Na l), адсорбируют на электронномикроскопических сетках и окрашивают 1%-ным уранилформиатом. Частицы, расположенные в левых нижних углах снимков а и б, непроницаемые . Стрелками указаны наружные мембранные структуры черта внизу снимков — 100 нм. По данным Аймайера и Гибсона [31]

Рис. 10.12. Сравнение белко цитомегаловирусов человека обезьяны. Радиоактивно мече ные вирионы выделяют, солк билизируют и проводят элект рофорез белков в 10%-ном пс лиакрнламидном геле. Числ слева и справа от геля обознг чают мол. массы соответствук щих белков (ХЮ-З). По дак ным Гибсона [35]

Известно восемь видов вирусов герпеса, для которых человек является естественным хозяином. К ним относятся вирусы простого герпеса типа 1 (HSV-1, или по новой номенклатуре — HHV-1) и типа 2 (HSV-2, или HHV-2), вирус ветряной оспы, или опоясывающего герпеса (VZV, или HIfV-3), вирус Эпштейна-Барр (EBV, или HHV-4), цитомегаловирус человека (h MV, или HHV-5), а также герпесвирусы человека тшюв 6, 7, 8 (HHV-6, -7, -8). Кроме того, выделено более 70 герпесвирусов от различных животных. [c.384]

Использовать в качестве молекулярного вектора герпесвирус кошек (FHV) попытались Г. Коль с соавторами (1990 г.). В ген тимидинкиназы FHV рекомбинационно встраивали либо ген env, либо ген gag вируса лейкемии кошек (FeLV), объединенный с ранним промотором цитомегаловируса человека. Клетки, инфицированные гибридными вариантами FHV, продуцировали соответствующие чужеродные белки. Заражение кошек гибридами приводило к формированию в их организме иммунного ответа на синтезируемые белки FeLV. Таким образом, герпесвирус юшек можно рассматривать как основу для создания живых поливалентных вакцин против ряда инфекционных заболеваний этих животных. [c.388]

Для изучения возможности системы re/lox активировать молчащий трансген в мыши авторы создали три гибридные конструкции. В первых двух кодирующую последовательность гена сге встроили под контроль промотора либо гена таА мышиного А-кристаллина (экспрессируется тканеспецифично в хрусталике глаза), либо раннего гена цитомегаловируса человека (h MV) (рис. 18.4). В третьей плазмиде последовательность TAg, кодирующую большой [c.454]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология