Среда Игла

Среда Игла (смесь аминокислот, витаминов и неорганических солей) [c.642]

Среда Игла (сухая) [c.39]

Изучение противовирусной активности проводили в НИИ эпидемиологии и микробиологии НАН Белоруси (Минск). Определение токсичности исследуемых соединений и их антивирусной активности проводили в культуре, которая перевивалась с клеток почки зеленой мартышки - BGM в логарифмической фазе роста культуры (третьи сутки ш vitro). В качестве ростовой среды использовали Даль-беко модифицированную среду Игла (ДМЕМ) с 10% эмбриональной сывороткой крупного рогатого скота и добавлением антибиотика гентамнцина в дозе 100 мкг/мл. Противовирусную активность препаратов по отношению к РНК-содержащим вирусам Коксаки БЗ (Nan y), ЕСНО-30, и ДНК-содержащего вируса простого герпеса [c.284]

Выделение чистой культуры производят разными способами. Платиновой иглой можно собрать со слоя конидиеносцев на теле насекомого свежие конидии. Для этого следует охлажденной в питательной среде иглой зацепить частичку агара, к которому при соприкосновении хорошо прилипают конидии гриба. Иногда можно для сбора конидий разложить пораженных насекомых на покровные стекла в чашках Петри с увлажненной фильтровальной бумагой. При отстреле и разлете конидий они осядут на покровных стеклах. Затем насекомых удаляют со стекла, места их соприкосновения покрывают каплями парафина и стекло переносят на микологический агар в чашке Петри стороной, на которой находятся конидии, вниз. При третьем способе пораженных насекомых приклеивают головой к концу проволоки, которую укрепляют над поверхностью питательной среды, куда и падают конидии. Если конидии, отделяясь от конидиеносцев, летят и вверх, можно получить чистую культуру, помещая перевернутые чашки Петри или пробирки со средой над пораженным насекомым. [c.314]

ИЗ других источников углерода. Удаление любого из семи витаминов приводило к развитию симптомов недостаточности. Таким образом, Игл, используя метод культивирования клеток, продемонстрировал питательные потребности клеток мыши и человека. При культивировании клеток в БСИ среду необходимо обновлять, и поэтому БСИ была вскоре заменена на минимальную среду Игла (МСИ) (гл. 7 и приложение 1), в которой концентрация различных компонентов была повышена, что обеспечивало непрерывный рост клеток в культуре в течение нескольких суток без смены среды. [c.21]

Базальная среда Игла (БСИ) требует ежедневной смены для поддержания непрерывного роста культуры, а минимальная среда Игла (МСИ) может поддерживать рост клеток в течение нескольких дней. [c.78]

Миеломные культуры. Клетки выращивают в среде Игла в модификации Дульбекко (СИМД) с добавлением 10% плодной сыворотки коровы, 10% донорской лошадиной сыворотки, 5% бикарбоната Na, 2% i -глутамина, 0,1% гентамицина и 1% пирувата Na. Доводят pH среды до 7,2—7,4 (по индикатору феноловому красному) 5н. раствором NaOH. [c.311]

Для изучения противовируспой активпости препаратов методом ИФА в культуре клеток клетки МК2 выращивали в 96-лупочных платах фирмы ostar в среде Игла в присутствии 5% фетальной сыворотки телят 10 мМ глутамина до полного монослоя. Перед заражением вирусом клетки 3 раза промывали средой без сыворотки. Исследуемые вещества добавляли к клеткам в 2-кратпой концентрации в 100 мл среды Игла. К вирусному контролю добавляли по 100 мкл этой же среды, а к клеточному контролю - по 200 мкл. После инкубации клеток с препаратами в течепие 30 мипут при 37°, в лупки, исключая клеточный контроль, добавляли по 100 мкл вируса, разведения которого были приготовлены также на среде Игла. Далее планшеты инкубировали в атмосфере СО2 в течение 36 часов при температуре 37°. [c.282]

Если высевают в плотную скошенную среду, иглой с культурой проводят прямую или волнообразную черту по поверхности среды легким движением (не разрезая среды)—поеев штрихом. Бели высевают в столбик питательной среды, иглу вводят в центральную часть в толщу ее — посев уколом. Если посев дела- [c.22]

Методика. Кровь из вены в количестве 3 — 5 мл переносят в пробирку с 1 мл гепарина, предварительно разведенного 1 100 средой Игла без антибиотиков. В пробирку добавляют 10%-й раствор желатина в количестве, равном / о объема взятой крови (0,3 —0,5 мл) и инкубируют 20 — 40 мин при 37 °С. Затем отсасывают надосадочную жидкость (плазму) и подсчитывают число югеток обычным способом в камере Горяева. Оптимальным для реакции является содержание в 1 мл 1-10 клеток. Если количество клеток окажется большим, взвесь разводят до необходимой концентрации средой Игла, если меньшим, то взвесь центрифугируют и осадок суспензируют в необходимом количестве среды. Затем в суспензию добавляют антибиотики (пенициллин и стрептомицин), разведенные в среде Игла в таком объеме, чтобы конечная концентрация антибиотиков составляла 10 000 ЕД на 100 мл среды. Полученную суспензию разливают в специальные флаконы или пробирки по 2 мл. Один из флаконов является контрольным, в другие добавляют специфические или неспецифические митогены. Пробирки выдерживают 48 —72 ч в термостате при 37 °С. Для учета результатов реакции переливают содержимое флаконов в центрифужные пробирки и центрифугируют. Надосадочную жидкость сливают, из осадка делают мазки, окрашивают одним из общепринятых способов и микроскопируют. Подсчитывают 200 лимфоцитов, в том числе количество неизменных клеток, клеток, перешедших в бластную форму, и переходных клеток. [c.86]

Методы разделения клеток костного мозга разработаны При-ступилом с сотр. [14]. Клетки получают на основной среде Игла и хроматографируют на термостатированных (37 °С) колонках [c.319]

Колонка (1,3X10 см) со стеклянными шариками диаметром 0,2 мм промыта азотной кислотой н основной средой Игла. Нанесено 7,5 10 клеток, суспендированных в I мл основной среды Игла, содержащей 20% сыворотки крупного рогатого скота, pH 7,1—7,2. Температура 37 °С. Элюирование проводят в градиенте концентрации ЭДТА на фоне основной среды Игла-ь20% сыворотки крупного рогатого скота. [c.319]

На колонку наносят 1 мл суспензии (содержащей 7,5-10 клеток) со скоростью подачи 1 мл/мин-см промывают двумя порциями по 1 мл основной среды Игла (содержащей 10% инактивированной сыворотки) со скоростью подачи 0,4—0,5 мл/мин X Хсм собирая при этом фракции объемом 2—3 мл. Далее с той же скоростью подачи собирают еще 10 мл элюата, затем увеличивают скорость подачи вдвое и проводят элюирование в ступенчатом градиенте ЭДТА (1,5—10 мМ) на фоне основной [c.319]

В настоящее время одним из лучших в этом отношении объектов являются культуры животных клеток. Эти в некоторой степени искусственные системы представляют собой отдельные клетки, выделенные из тканей какого-либо животного, которые в процессе адаптации к условиям существования in vitro претерпевают дедифференцировку с потерей специфических функций. Вместе с тем такие микрообъекты приобретают способность к стабильному самостоятельному росту, характер которого определен общими законами роста и развития популяции. Существует большое число таких перевиваемых клеточных линий, достаточно полно охарактеризованных и сохраняющих на протяжении многолетних наблюдений свои свойства. Что касается питательных сред, то, являясь в большинстве своем полусинтетическими, они компонуются на основе индивидуальных аминокислот и витаминов, растворяемых в глюкозо-солевом растворе при добавлении некоторого количества сыворотки крови (чаще всего крупного рогатого скота). Прописи используемых в настоящее время питательных сред созданы путем исключения тех компонентов в исходных, достаточно сложных питательных средах, которые не принимают участия в процессе роста популяции. Широко используемая в подобного рода исследованиях так называемая минимальная среда Игла или ее модификация—среда ПС [144] представляет собой минимальный набор компонентов, действительно необходимых для роста и размножения животных клеток. [c.230]

Среда для культивирования клеток. Модифицированная Дульбекко среда Игла (DMEM), содержащая 2 мМ L-глутамин и 100 мкг/мл гентамицина. Диметилсульфоксид (ДМСО DMSO). [c.191]

Приведены две альтернативные разработки, одна [1] из которых предполагает использованпе модифицированной Дульбекко среды Игла (DMEM), а другая [2] — среды MEM-Alpha. [c.247]

Среда Игла, помимо солей и глюкозы СБСР, содержит также 12 незаменимых аминокислот и 9 витаминов. Глутамин и, если необходимо, антибиотики, добавляются вместе с сывороткой перед употреблением. [c.78]

Микоплазмы характеризуются потребностью к сложному составу питательной среды (Rodwell, 1969) и, следовательно, плохо растут в простых средах, таких, как среда Игла, пока в ней [c.116]

Установить культуру мышпмых клеток L929 в среде Игла (модификация Глазго) с 10% сыворотки теленка и менять среду каждые два дня (рис, 5.2). [c.152]

Собрать суспензию клеток СНО на стадии экспоненциального роста, промыть их лишенной нзолейцина средой Игла. [c.155]

Установить культуру мышиных клеток L929 в бутылях Ру в среде Игла (модификация Глазго) с 10% сыворотки теленка. [c.161]

Посеять по 3 105 клеток HeLa в чашки диаметром 5 см в среде Игла (модификация Глазго) с 10% сыворотки теленка и 3 мМ тимидином. [c.161]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология