Рекомбинантные антитела

Рис, 55, Стратегии снижения иммуногенности антител, типы рекомбинантных антител и их фрагментов [c.411]

В приведенных примерах мишенями антител, полученных методами белковой инженерии, были белки, экспонированные на поверхности клеток. Однако не меньшего биологического эффекта удается достичь с помощью рекомбинантных антител, действие которых направлено против внутриклеточных лигандов. [c.418]

Вторичные клонотеки, используемые для осуществления аффинного созревания рекомбинантных антител. Имеются задачи, для решения которых аффинность рекомбинантных антител, получаемых с помощью описанных выше первичных клонотек, является слишком низкой. С целью дальнейшего улучшения их характеристик проводят процедуру, получившую название аффинного созревания . Для этого новые раунды отбора осуществляют среди последовательностей новой, целиком синтетической клонотеки, полученной на основе последовательностей антител с лучшими характеристиками, которые были выявлены в результате селекции первичной клонотеки. [c.425]

Фаговый дисплей. Отбор рекомбинантных антител на основе фагового дисплея является одним из наиболее популярных методов получения антител требуемой специфичности. В этом случае [c.425]

Несмотря на простоту идей, лежащих в основе получения рекомбинантных антител с использованием фагового дисплея, его реализация на практике (как впрочем и любой другой искусственной генетической системы) требует учета массы весьма существенных деталей. В частности, антигены, применяемые в такой системе, должны быть высокоочищенными полученные с помощью фагового дисплея антитела часто не взаимодействуют с нативными белками эффекты авидности могут затруднять отбор высокоаффинных клонов разные клоны с одинаковой аффинностью трудно дифференцировать друг от друга и т.д. [270-272]. [c.426]

Уровень продукции чужеродных полипептидов может существенно зависеть от вида растения или ткани, в которых они синтезируются. Например, один и тот же вид рекомбинантных антител в листьях трансгенного табака накапливался лишь до 0,04 % с) марного белка, в то время как в листьях арабидопсиса — до 3 %. [c.470]

На основе Sa haromy es erevisiae созданы высокоэффективные системы экспрессии рекомбинантных генов и крупнотоннажного синтеза рекомбинантных белков человека, животных и растений, в том числе и рекомбинантных антител (см. раздел П.3.4) [257]. Кроме того, экспрессия рекомбинантных белков в этих клетках активно используется для улучшения свойств белков методами направленной эволюции с использованием клеточного дисплея (раздел П.2.3.2), изучения белок-белковых взаимодействий в дрожжевых л-гибридных системах (раздел П.2.3.4) и для множества других не менее важных целей. [c.174]

Хотя гибридомные технологии еще продолжают достаточно активно использоваться, с появлением новых эффективных методов белковой инженерии, в том числе систем отбора белков на основе разнообразных дисплеев и репрезентативных клонотек случайных белковых последовательностей, mAb начинают постепенно сдавать свои позиции. Новые технологии позволяют отбирать антитела требуемой специфичности непосредственно из суспензии фаговых частиц без иммунизации лабораторных животных и при этом получать белки с совершенно новой специфичностью к антигенам, которые неиммуногенны in vivo. Новые подходы дают возможность снять ограничения, накладываемые на производство антител особенностями иммунного ответа живого организма. В последние годы удалось получить большое количество рекомбинантных антител с новыми свойствами значительно уменьшить размер их молекул, а также объединить антитела в поливалентные гибридные комплексы, сильно повысив при этом их авидность. Генно-инженерными методами удалось объединить фрагменты антител с разнообразными аминокислотными последовательностями для обеспечения адресной доставки макромолекул. Такие гибридные молекулы, кроме антител, включают ферменты для активации предшественников цитоток-сичных лекарственных препаратов, токсины, белки вирусных частиц, используемые в генотерапии, и сами могут быть включены в липосомы для повышения эффективности химиотерапии. Рекомбинантные антитела применяют для получения биосенсоров, используемых при мониторинге исследуемых молекул в реаль- [c.409]

Решение этой проблемы было начато с создания методами генной инженерии химерных антител, построенных из гибридных полипептидных цепей, у которых вариабельные участки имели мышиное происхождение, а константные целиком представляли собой последовательности иммуноглобулинов человека [214] (рис. 55,а). Дальнейшим развитием этого направления исследований было получение так называемых очеловеченных (humanized) или перестроенных (reshaped) антител, в которых только антигенсвязывающие петли DR имели мышиное происхождение [215]. Наконец, недавно с помощью двух альтернативных методов были получены рекомбинантные антитела, содержащие только последовательности иммуноглобулинов человека. [c.410]

Рекомбинантные антитела с несколькими специфичностями. Во всех случаях, рассмотренных выше, возможно объединение в единый комплекс s Fv-модулей с разными антигенсвязывающими сайтами, что приводит к образованию антигенсвязывающих белков с несколькими специфичностями. Простейшая макромолекула, которая обладает двумя специфичностями, должна взаимодействовать с двумя разными эпитопами, расположенны- [c.414]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология