Получение высокоочищенных ферментных препаратов

Третья глава посвящена физико-химии очистки и фракционирования ферментов. Вначале даются общие приемы фракционирования белков и излагается теория процесса диализа белковых растворов. Обращается внимание на влияние распределения электролитов при диализе, а также на освобождение от балластных веществ путем изменения pH вытяжек (экстракт культур плесневых грибов), и обесцвечивание ферментных растворов некоторыми ионитами. Здесь же приведены принципиальные схемы получения высокоочищенных ферментных препаратов. [c.3]

ПОЛУЧЕНИЕ ВЫСОКООЧИЩЕННЫХ ФЕРМЕНТНЫХ ПРЕПАРАТОВ [c.75]

В 1913 г. появилась фундаментальная работа Л. Михаэлиса и М. Л. Ментена по ферментативной кинетике. В 1922—1928 гг. Р. Вильштеттер и его ученики, усовершенствовав метод избирательной адсорбции и последующей элюции, достигли блестящих успехов в получении ферментативных препаратов высокой степени очистки. Последние были в сотни и тысячи раз активнее исходных носителей ферментов. Вместе с тем Р. Вильштеттер, добиваясь высокоочищенных ферментных препаратов, на последних стадиях очистки терял какие-то в то время неизвестные вещества (коферменты) и фермент утрачивал свою активность. [c.123]

Для оценки гомогенности ферментного препарата прибегают к обычным методам белковой химии. Переломным моментом в усовершенствовании методов получения высокоочищенных, гомогенных препаратов ферментов бьшо открытие способности их кристаллизоваться, осуществленное впервые в 1906 г. А. Д. Розенфельдом (им была получена в виде кристаллов оксидаза из корней редьки) и приобретшее с 1926 г. широкую известность после работы [c.97]

Получение высокоочищенных и кристаллических ферментных препаратов основывается на проведении ряда последовательных операций, заключающихся в чередовании известных приемов (диализ, хроматография, препаративный электрофорез и др.), которые часто базируются на экспериментальной интуиции в области химии и физико-химии белковых веществ. [c.75]

Ферментные препараты нашли широкое применение в различных отраслях промышленности (медицинской, пищевой, легкой, химической) и в сельском хозяйстве. Появилась ферментная промышленность, включающая в себя как получение высокоочищенных индивидуальных ферментов, так и широкое их использование [c.190]

Фракционирование комплекса ферментов имеет большое значение при получении как очищенных, так и высокоочищенных ферментных препаратов. В частности, раздельное получе-HHje протеазы и амилазы из комплекса ферментов гриба Asp. oryzae позволит регулировать ферментативный процесс в хлебопечении и пивоварении. [c.62]

При изучении свойств НАД-киназы из скелетных мышц использовали высокоочищенные, но ие гомогенные препараты НАД-киназы. Препарат фермента из сердца голубя был электро-форетически получен в гомогенном состоянии. Метод выделения и очистки в качестве последних стадий включал ионообменную хроматографию на ДЭАЭ-сефадексе А-50 и гель-фильтрацию на сефарозе 6В [5]. Сравнение свойств частично очищенных и гомогенных, по данным электрофореза, препаратов фермента позволило установить следующую закономерность. Частично очищенные ферментные препараты НАД-киназы из сердца голубя подобно ферменту из скелетных мышц кролика гетероген ны и представлены не менее чем пятью молекулярными формами, число которых могло варьировать от препарата к препарату НАД-киназную активность проявляли формы с молекулярными весами, равными 300 000—270 000, 230 000—200 000, 180 000, 120 000 и 45 000. Из распределения общей активности фермента между различными молекулярными формами следует, что большая часть НАД-киназы представлена олигомерами с молекулярным весом 180000. [c.138]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология