Химерные антитела

Рис. 6.8. Очистка химерного белка с помощью иммуноаффинной хроматографии. Антитела к маркерному пептиду химерного белка фиксируют на твердом носителе и пропускают через колонку химерный белок. Маркерный пептид, входящий в состав химерного белка, связывается с антителами, а все остальные белки свободно проходят через колонку. Очищенный химерный белок элюируют из колонки.

Получение методом генетической инженерии химерных антител, содержащих F -фрагмент антител человека, связанный с Р(аЬ) 2-фрагментом антител мыши, позволяет снизить вероятность иммунного ответа на мАт со стороны организма-хозяина. Кроме того, F -фрагмент антител человека обеспечивает мобилизацию эффекторных механизмов хозяина. Другой путь оптимизации терапевтического действия мАт -связывание с ними различных молекул для нацеливания на опухолевые клетки. К таким молекулам относятся. например, токсины (2), цитотоксические лекарственные препараты, ферменты, способные активировать пролекарства (3) или радиоактивно меченные изотопы (4). (мАт - моноклональные антитела.) [c.389]

Компонент химерного белка, связывающийся с антителом Размер Антитело Условия элюирования [c.114]

Решение этой проблемы было начато с создания методами генной инженерии химерных антител, построенных из гибридных полипептидных цепей, у которых вариабельные участки имели мышиное происхождение, а константные целиком представляли собой последовательности иммуноглобулинов человека [214] (рис. 55,а). Дальнейшим развитием этого направления исследований было получение так называемых очеловеченных (humanized) или перестроенных (reshaped) антител, в которых только антигенсвязывающие петли DR имели мышиное происхождение [215]. Наконец, недавно с помощью двух альтернативных методов были получены рекомбинантные антитела, содержащие только последовательности иммуноглобулинов человека. [c.410]

Усатая акула-нянька, как недавно установлено, обладает ранее неизвестной молекулой иммуноглобулинового суперсемейства, которая, возможно, эволюционно предшествовала появлению иммуноглобулинов и ТкР. Эта молекула (получившая название нового антигенного рецептора. НАР, англ. — NAR) состоит из одного вариабельного и пяти константных доменов и присутствует в сыворотке в виде димера. Кодирует НАР генный локус, который подвергается перестройке и соматическому мутированию. В настоящее время у хрящевых рыб выявлен новый класс химерных антител это позволяет усомниться в том, что первичным изотипом Ig является IgM. [c.289]

Применение химерных белков В некоторых случаях конечным продуктом, который предполагается использовать, является сам химерный белок. Например, нередко возникает необходимость в получении антител, узнающих конкретный участок белковой молекулы. Чтобы рещить эту задачу, можно встроить в подходящий вектор сегмент ДНК, кодирующий белковый домен, к которому будут вырабатываться нужные антитела. Образующийся в результате химерный белок и будет служить антигеном. Антитела к стабилизирующему его белковому компоненту, происходящему от хозяйской клетки, можно удалить абсорбцией их на чистом стабилизирующем белке, и тогда останутся только антитела, связывающиеся с нужной аминокислотной последовательностью. [c.113]

Последние достижения в этой области включают получение антиидиотипических антител [8 ] и моноклональных антител овцы [9 ] межвидовым слиянием клеток. Кроме того, получены моноклональные антитела человека как из гибридом, образованных с помощью внутри- или межвидового слияния клеток, так и из культуры В-лим цитов, трансформированных вирусом Эпштейна - Барра (ВЭБ) [10]. Другими большими достижениями, важными для практики, являются получение биспецифических антител (т.е. специфических к определяемому веществу и метке) из гибридных гибридом [11-13] и создание химерных антител (в целях преодоления сверхчувствительности к ксеногенному материалу) с по- [c.37]

Конструирование химерных молекул, о которых шла речь выше, — это первый этап в создании моноклональных антител мышей и крыс, обладающих сходством с антителами человека. Другой подход состоит в замещении только DR-участков человеческих антител фрагмента- [c.216]

Получение моноклональных антител с более низкой антигенностью по отношению к человеку может быть осуществлено с помощью генноинженерных методов. Моноклональные антитела, созданные с помощью этого подхода ( химерные ), включают активный центр из иммуноглобулина мыши, а остальную часть молекулы, F -фрагмент, — из иммуноглобулина человека. [c.167]

Антитела обладают иммуногенностью и могут быть атакованы иммунной системой. Поэтому химерные, или гибридные, антитела, т. е. содержащие участки иммуноглобулинов человека, способны индуцировать антиидиотипический иммунный ответ. Эту проблему возможно устранить путем проведения последовательных курсов лечения различными мАт. [c.389]

Химерные антитела, несушие антигенсвязы-вающий участок моноклонального антитела мыши к поверхностному антигену клеток рака толстой кишки человека, тестировали на больных с раком толстой и прямой кишки. Антитела оставались в кровотоке примерно в шесть раз дольше обычных антител мыши, тем самым оказывая свое действие в течение большего времени. При этом лишь у одного пациента из 10 наблюдался слабо выраженный иммунный ответ. К сожалению, в этих испытаниях не удалось получить противоопухолевого эффекта антител возможно, это было связано с введением их в слишком малых дозах или с тем, что раковый процесс находился на поздних стадиях. В опытах in vitro химерные антитела проявляли высокую эффекторную активность, что позволяет надеяться на успешное их применение в других случаях. [c.216]

Химерные антителе ( himaeri antibody) - антитела, полученные путем комбинирования генетического материала из различных источников. [c.265]

Один из клонирующих векторов системы слияния, сконструированных для получения специфических антител, содержит 5 "-концевой сегмент гена ompF Е. соН, кодирующего один из наружных мембранных белков, и прилегающую к нему часть гена la Z (Р-галактозидазы) Е. соИ (рис. 6.7). Этот сегмент содержит информацию, необходимую для инициации транскрипции и трансляции химерного гена, а также для секреции химерного белка. Несмотря на то что укороченный ген la Z лищен кодонов для первых восьми аминокислот, кодируемый им белок сохраняет ферментативную активность. В такой [c.113]

При создании комбинаторных библиотек вместо фага X можно использовать нитевидные бактериофаги М13 или fd (рис. 10.14). В этих случаях соответствующий фрагмент антитела синтезируется как часть химерного белка, локализованного на поверхности фаговой частицы. Скрининг комбинаторной библиотеки фрагментов антител можно провести при помощи ферментного иммуносорбентного анализа (ELISA). Суть метода состоит в следующем образцы (аликвоты) из библиотеки помещают в ячейки планшеты, содержащие антиген-мишень. Ячейки промывают, чтобы удалить несвязанные фаговые частицы. В каждую ячейку вносят конъюгат, состоящий из антитела, связывающегося с белком фаговой оболочки, и фермента. Ячейки промывают для удаления несвязанного конъюгата и добавляют в каждую из них хромогенный субстрат, который расщепляется ферментом, связанным с фагом, и окраши- [c.219]

Иммунотерапия (Immunotherapeuti pro edure) Использование антитела или химерного белка, содержащего сайт связывания антитела, для лечения больного или облегчения его состояния. [c.549]

Иммунотоксин (Immunotoxin) Химерный белок, состоящий из двух доменов, один из которых обладает свойствами антитела, а другой - токсина. Первый домен [c.549]

Мышиные V-гены можно соединить с С-генами человека и ввести продукт рекомбинации в геном клетки, которая в результате будет синтезировать химерные мышино-человеческие антитела (1). Другой вариант конструирования антител заключается в присоединении к каркасу V-области легкой цепи гипервариабель- [c.155]

Галактозидазу можно выделить из клеток Е. соИ в гомогенном виде в один этап с помощью аффинной хроматографии на л-амино-фенил- - -тиогалактозид-аггфозе. Поэтому при создании векторных систем, предназначенных для синтеза чужеродных белков в составе химер с /З-галактозидазой, важно было сохранить большую часть /3-галактозидазы в неповрежденном виде, что обеспечило бы специфичность хроматографической очистки химерных белков. Вьщеленные таким образом химерные белки при иммунизации кроликов вызывают наработку в организме животных антител как на /З-га-лактозидазу, так и на целевой белок. [c.123]

Оказалось, что взаимодействие 6xHis с Ni-NTA-матрицей не зависит от конформации синтезируемого химерного белка. При этом 6xHis имеет значительно меньшие размеры, чем другие полипептиды-носители. При физиологических значениях pH 6xHis не заряжен и слабо-иммуногенен, поэтому химерный белок может быть с успехом использован для получения антител против целевого белка, кодирующая последовательность которого встроена в вектор pQE. [c.126]

НЫЙ склероз. Т. Аракава с соавторами (1998 г.) показали, что экспрессируемый в картофеле химерный полипептид, состоящий из последовательности СТ-В и присоединенной к ее С-концу последовательности человеческого инсупина, сохранял пентамерную структуру и способность связываться с ОМ1-ганглиозидами, а также обладал иммуногенностью как инсулина, так и СТ-В. У мышей, принимавших с пищей трансгенный картофель, наблюдалось образование анти-СТ-В-антител и значительное замедление развития экспериментально индуцированного диабета. [c.475]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология